【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，为miRNAs的功能研究 中寻找其调控的可能靶基因提供了一种简单、实用的方法。
技术介绍
miRNAs是一类由大约19-23个碱基组成的单链RNA分子，是一种不能编码蛋白质 但是具有重要调控作用的小RNA。成熟的miRNA通过碱基互补配对可以结合到靶基因的相 关序列上面，现在已知报道的结合位点可以位于基因 mRNA的3'和5'非翻译区，也可能位于 基因的启动子区域。现在已知miRNAs在包括细胞分化、凋亡、增殖、发育、造血和肿瘤等多 种生命活动中具有重要的调控功能。由于miRNA发挥调控生命活动的作用是通过与调控靶 基因的表达实现的，所以对于miRNAs革E基因的寻找和确定对于miRNAs的功能研究具有重 要的意义。但是由于miRNAs和靶基因之间的互补结合可以通过碱基的不完全匹配，因此一 个miRNA可能会调控很多种的祀基因，所以导致miRNAs的寻找十分困难。现在对于miRNAs 靶基因的寻找主要是通过生物软件的预测，但是生物软件预测具有不真实性、假阳性率较 高、工作量太大等缺陷，所以使用实验方法直接分离和筛选出miRNAs...
【技术保护点】
一种筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法，其特征在于包括：（1）将miRNAs与靶基因组DNA互补结合的RNA链进行生物素标记，转染细胞后，利用甲醛将miRNAs和与之结合的DNA、蛋白交联在一起；（2）将生物素标记的miRNAs以及结合在一起的DNA进行Streptavidin‑Biotin亲和沉淀分离和纯化；（3）通过克隆和测序鉴定分离纯化出来的DNA序列，鉴定出miRNAs调控的靶基因。
【技术特征摘要】
1. 一种筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法，其特征在于包括： (1) 将miRNAs与靶基因组DNA互补结合的RNA链进行生物素标记，转染细胞后，利用甲 醛将miRNAs和与之结合的DNA、蛋白交联在一起； (2) 将生物素标记的miRNAs以及结合在一起的DNA进行Streptavidin-Biotin亲和沉 淀分离和纯化； (3) 通过克隆和测序鉴定分离纯化出来的DNA序...
【专利技术属性】
技术研发人员：向双林，魏科，颜峰，胡翔，张健，
申请(专利权)人：湖南师范大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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