缓解神经痛的经修饰的SIP30制造技术

本发明专利技术涉及一种能够缓解神经痛的经修饰的SIP30，这种经修饰的SIP30的分子量更小，易于通过脑血屏障。

【技术实现步骤摘要】
缓解神经痛的经修饰的SIP30
本专利技术涉及一种经修饰的SIP30，这种经修饰的SIP30的分子量更小，易于通过脑血屏障。
技术介绍
神经痛是一种长期且慢性的疼痛，成因复杂，常见得，多源于组织的损伤，也有因为糖尿病或肿瘤等疾病诱发的。而对于神经痛的治疗或缓解，当前所用的药物不多，且广泛运用的合成化学的镇痛药物实际上在临床上都显示有明显的副作用。US20120245216A1 的美国专利申请公开了与 SNARE (synaptosome-associatedprotein receptors)位点作用的 SNAP25 (synaptosome-associated protein of 25kDa)的SIP30 (SNAP25interating protein of30kDa),可作为一种治疗或缓解神经痛的药物。SIP30具有266个氨基酸，本身在脑里有丰富表达，尤其是在上下丘脑，在海马体中几乎不表达。但在健康生物体内，例如健康鼠的脑内几乎不表达，但作为患有脑瘤后期的鼠脑，尤其是上下丘脑内高表达。本专利技术所述的SIP30的改进是基于US20120245216A1的美国专利申请所公开的内容的基础上所作出的经修饰的生物药物。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种修饰的SIP30的仍然保留与SNARE受体蛋白结合的蛋白质，并且能够提高通过血脑屏障的效率，从而提高生物利用率。SIP30是分子量为30kDa的蛋白质，但其与SNAP25作为的主要区域为靠近膜区域形成colied-coli结构的重复片段的区域，以下简称CCS区域。这个区域及专利技术人确认，发现也是与SNAP23相结合的区域，即SIP30与SNAP25和SNAP23具有相同的结合区域。并且只能结合后，SIP30才能出现三级结构的转变，从而暴露了另两个区域(140-233，以及His富集的末端区域)，从而发挥缓解神经痛作用。(由于US2012245216A1中已经明确上述结构域的氨基酸序列，本申请未附可机读的氨基酸序列表。)实事上，仅保留这三个区域或以上的SIP就可以实现上述功能，因此可以在保留这三个结构域的基础上，修饰其它部分肽链，剪切其它部分也可以发挥作用，从而使其在通过血脑屏障时更为迅速。原因可能在于SIP30与SNAP23仍然具有特异性的结合，并且SNAP23相比于SNAP25在神经细胞的树突状细胞中更为丰富，从而当SIP30与其结合时，更能阻断痛觉在神经中的传递。为进一步确认，SNAP23和SIP30的特异性，使用GST pull-down assay进行共免疫沉淀，转染鼠脑瘤恶性细胞。S35标记的SIP30由体外转录和翻译。GST-SNAP25、GST-SNAP23和GST突触蛋白IA融合蛋白在E.coli中表达。GST突触蛋白IA融合蛋白作为控制组。用放射性同位素标记SIP30，然后将其孵育到磁珠上，然后经过三组测试物，发现SIP30能够与 GST-SNAP25 和 GST-SNAP23。用经修饰的本专利技术的SIP30同样重复上述实验，仍然发现相同的结果，证明经修饰的本专利技术的SIP30能够与SNAP25和SNAP23结合。因此，表明具有上述三个结构域的经修饰的SIP30已经能够达到与SNARE受体特异的结合能力，并通过在US2012245216A1中的研究证明其具有镇痛能力。【具体实施方式】实施例1将FIGO分期为III期的患有脑瘤并疼痛烦燥的鼠分为两组(组A和组B)，分别将未经修饰的SIP30、以及本专利技术的经修饰的SIP30，600IU注射的到患有脑瘤的鼠中，发现均有鼠A组和鼠B组都在8小时后明显能够入睡，不再烦燥，持续给药后，显示具有持续缓解作用。实施例2 3天后，将上述鼠A组和B组分别通过静脉给药安乐死后，取其大脑皮层和上下丘脑组织进行定量测量，通过SIP30的特异性兔抗鼠抗体，以及经修饰的本专利技术的兔抗鼠抗体定量测定，发现组B鼠的本专利技术的经修饰SIP30的量明显多于组A鼠组的未经修饰的SIP30。可见，经修饰的SIP30可能在空间结构上更为有效得通过血脑屏障，进而可以明确其生物利用率应该会有与之相应的进步。本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有缓解神经痛功能的经修饰的SIP30，至少具有CCS(collied‑coli structure)、140‑233和富含组氨酸的末端。

【技术特征摘要】
1.具有缓解神经痛功能的经修饰的SIP30,至少具有CCS(collied-coli structure)、140-233和富含组氨酸的末...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭宁，杨继斌，
申请(专利权)人：苏州晶奇生物纳米技术有限公司，江苏省赛诺雅生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32