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一种极度酸性pH荧光探针及其制备方法和应用技术

技术编号:10384679 阅读:99 留言:1更新日期:2014-09-05 11:45
本发明专利技术公开了一种极度酸性的pH荧光探针及其制备方法和应用。该探针是利用丁二烯桥联吲哚或其衍生物和3-[3-(4-氟苯基)-1-烷基-1H-吲哚构建基于分子内电荷转移效应的pH荧光探针。其制备方法:在惰性气体保护下,将2,3,3-三甲基吲哚或1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚与3-[3-(4-氟苯基)-1-烷基-1H-吲哚-2-基]-丙烯醛溶于N,N-二甲基甲酰胺,加入KOH固体,室温搅拌,过夜,减压浓缩制得粗品,经硅胶柱分离制得纯品。该探针具有较低的pKa值,对H+有较高的灵敏度、好的选择性、以及大的Stocks位移。由于该探针在结合H+前后颜色变化较明显,可方便地通过裸眼识别。该探针可穿透细胞膜,适用于细胞内pH值的检测和细胞成像。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种极度酸性的pH荧光探针及其制备方法和应用。该探针是利用丁二烯桥联吲哚或其衍生物和3-吲哚与3--丙烯醛溶于N,N-二甲基甲酰胺,加入KOH固体,室温搅拌,过夜,减压浓缩制得粗品,经硅胶柱分离制得纯品。该探针具有较低的pKa值,对H+有较高的灵敏度、好的选择性、以及大的Stocks位移。由于该探针在结合H+前后颜色变化较明显,可方便地通过裸眼识别。该探针可穿透细胞膜,适用于细胞内pH值的检测和细胞成像。【专利说明】一种极度酸性pH荧光探针及其制备方法和应用
本专利技术涉及荧光探针,具体属于一种极度酸性PH荧光探针及其制备方法,以及该探针在细胞成像中的应用。
技术介绍
pH值不仅对物质的物化性质及其反应性能有明显的影响,细胞和细胞器的许多重要生理过程等也都与pH值密切相关。酸性和碱性过强会导致心、肺病变或神经类疾病,严重时甚至会有生命危险。在正常的生理条件下,细胞液中H+的浓度约为40nmol/L(pH =7.40),其变动幅度一般在0.1~0.2个pH单位。细胞内还有一个pH值范围是酸性范围,如溶酶体的PH值范围为4.5-5.5,内涵体的pH值范围为5.4-6.2,称为酸性细胞器。极度酸性环境(pH〈4)对大多数生物体是致命的。细胞内pH值与细胞功能的密切关系意味着对细胞内PH值的精确测量可以为研究小至 单个细胞器的生理学和病理学过程提供关键信息。所以,监测细胞内PH值的动态变化对于理解细胞内许多生理功能的机制有着重要的作用。生命体系要求能检测到微小的pH值变化。测定pH值一般用玻璃电极,但由于存在电化学干扰、可能的机械损伤等缺陷而不适于活体PH监测。还有采用比色法测定pH值,但是比色法也存在着明显的缺点,无法应用到生命体系进行活体细胞造影。另外,比色法的灵敏度较低。荧光探针具有快速实时响应、对细胞无损伤、响应灵敏度高以及选择性专一等优点,利用荧光探针对细胞内PH值变化进行检测已引起人们的广泛兴趣。目前报道的许多PH荧光探针集中在检测细胞内中性,即细胞液的pH值以及溶酶体和内涵体等酸性细胞器PH值;测定极度环境,如pH〈4或pH>9的荧光探针报道的非常少。因此,设计合成具有大的Stokes位移、对H+离子高度敏感、选择性好、能测定极度环境下pH的荧光探针在生物和化学等方面都具有潜在应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种具有大的Stocks位移、对pH高度敏感、选择性高、能测定极度酸性条件下PH值的荧光探针;目的之二是提供该探针的制备方法,该方法工艺简单、成本低廉;目的之三是提供该探针的用途,即该探针作为荧光指示剂检测细胞内PH值。本专利技术提供的一种极度酸性的pH荧光探针,其结构式为:【权利要求】1.一种极度酸性的PH荧光探针,其特征在于结构式为: 2.如权利要求1所述的一种极度酸性的PH荧光探针的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: (1)在惰性气体保护下,将2,3,3-三甲基吲哚或1,1,2-三甲基-1H-苯并吲哚与3--丙烯醛按摩尔比1: 1.0-1.5溶于N,N-二甲基甲酰胺,按2,3,3-三甲基吲哚或1,I, 2-三甲基-1H-苯并吲哚计加入5倍摩尔数的KOH固体,室温搅拌,反应过夜; (2)过滤除去KOH固体,向反应液中加入1-2倍体积的H2O,用CH2Cl2萃取2_3次;合并有机相,用无水Na2SO4干燥后,减压蒸懼得到粗品; (3)粗品经硅胶柱分离,得到纯品。3.如权利要求1所述的一种极度酸性的PH荧光探针用作检测细胞内pH值的指示剂。4.如权利要求1所述的一种极度酸性的pH荧光探针在细胞成像中的应用。【文档编号】G01N21/64GK104017572SQ201410262408【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月12日 优先权日:2014年6月12日 【专利技术者】牛卫芬, 樊丽, 武庭瑄, 钞建宾, 双少敏, 董川 申请人:山西大学本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种极度酸性的pH荧光探针,其特征在于结构式为:其中,R1、R2为氢原子或烷基。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:牛卫芬樊丽武庭瑄钞建宾双少敏董川
申请(专利权)人:山西大学
类型:发明
国别省市:山西;14

网友询问留言 已有1条评论
  • 来自[美国加利福尼亚州圣克拉拉县山景市谷歌公司] 2014年12月17日 17:20
    2009年世界著名饮料巨头百事集团为年轻一代打造的新一代可乐百事极度现已登陆中国4月正式登陆北京市场这款被称之为新一代的无糖可乐将以前所未有的极酷包装更劲爆优越的口感以及勇敢无畏无所顾忌的最契合80后的品牌精神迅速席卷中国的80后消费者市场引爆一场让无数青年为之疯狂的百事极度风暴
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