一种金花菜的杂交方法技术

本发明专利技术涉及一种金花菜的杂交方法。本发明专利技术技术方案涉及母本的选择即选择刚现蕾的花朵，花瓣还被花萼包裹，选择盛花期时花瓣展开的花朵作为父本，用镊子和手术刀去除母本中多余的花粉粒作母本去雄，获取花粉即用镊子夹取父本花朵，切离花瓣、花萼，露出雄蕊，人工授粉后包裹杂交花朵，做好信息记录。本发明专利技术克服了现有技术存在的金花菜尚无成功杂交的先例的缺陷。本发明专利技术去雄后直接进行授粉，减少了二轮操作对柱头造成的伤害，并确定了授粉的最佳时段，并根据金花菜的植物学、生物学特性确定了亲本的选择标准和两种杂交技术手法，成功地实现了金花菜的杂交，并提高了杂交的成功率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物育种方法的
，特别涉及。
技术介绍
金花菜(Medicago poIymorpha)为一年生或越年生苜猜,又称南苜猜、秧草、草头等。近年来，随着人们对食品安全的关注，金花菜作为绿色有机食品，日益受到消费者的喜爱和政府的重视，以市场为导向的金花菜产业迎来了前所未有的发展，种植面积不断扩大，总产不断增加，加工产品也越来越丰富。相比快速发展的产业化进程，金花菜的遗传育种工作明显滞后，目前仍以地方乡土品种为主，缺乏品质优良的高产品种。在本专利技术作出之前，金花菜尚无成功杂交的先例，这主要是因为:1.区域材料间缺少交流，没有获得多态性差异水平高的亲本材料；2.金花菜本身的植物学、生物学特性决定的。金花菜是严格的自花授粉作物，花器小(成花约3mm)，结构特殊(蝶形花)，发育快(1-2天便完成自花授粉)，分布零散，受精过程对环境有较高要求，一般作物的杂交手法不适于金花菜。这些因素都给杂交工作的突破带来了相当大的难度。随着金花菜产业发展的要求，亟待一种适合金花菜杂交的技术方案出现。
技术实现思路
本专利技术的目的就在于克服上椁缺陷，研制。本专利技术的技术方案是:，其主要技术特征在于步骤如下:(I)亲本的选择:母本的选择:选择刚现蕾的花朵，花瓣还被花萼包裹，花萼缘口刚出现花瓣，花瓣的长度约为花萼的1/2，约为1mm，挑开花瓣后，雄蕊应成明显的颗粒状，作为母本；父本的选择:选择盛花期时花瓣展开的花朵作为父本；(2)母本去雄:用镊子和手术刀去除母本中多余的花粉粒；(3)获取花粉:用镊子夹取父本花朵，切离花瓣、花萼，露出雄蕊；(4)人工授粉:人工授粉后包裹杂交花朵，做好信息记录。所述对杂交种进行真伪性鉴定。所述用纸巾和胶带仔细包裹杂交朵，并将植株移至避光处。所述用彩色细线沿荚果螺旋方向缠绕。所述步骤(1)父本的选择中，在选择父本前停止对金花菜的浇水。所述步骤(4)人工授粉中，对杂交花上部、下部枝叶进行修剪、摘心。本专利技术的优点和效果在于在去雄后直接进行授粉，减少了二轮操作对柱头造成的伤害，并确定了授粉的最佳时段，并根据金花菜的植物学、生物学特性确定了亲本的选择标准和两种杂交技术手法，成功地实现了金花菜的杂交，并提高了杂交的成功率。本专利技术在获得不同地域多态性差异明显的材料的基础上，成功地进行了金花菜的杂交，并且杂交成功率达到40%左右，实现了该领域的实质性突破和创新，推进了金花菜遗传育种的工作。本专利技术的关键在于亲本材料的选择和杂交的技术手法。本专利技术其他更具体的优点和效果将在下面继续说明。【附图说明】图1—本专利技术流程操作示意图。【具体实施方式】本专利技术的技术思路:采用杂交技术，选择来源不同且多态性差异明显的父母本，达到克服现有技术存在的缺陷的目的。下面就是本专利技术的具体说明。如图1所示:首先是亲本的选择。 母本选择:选择刚现蕾的花朵，花瓣还被花萼包裹，花萼缘口刚出现花瓣。可见花瓣的长度约为花萼的1/2，约1mm，去掉其他花瓣，作为母本。父本选择:选择花粉成熟的植株作父本。母本去雄:用镊子和手术刀去除母本中多余的花粉粒。获取花粉:用镊子夹取父本花朵，切离花瓣、花萼，露出雄蕊。人工授粉:人工授粉后包裹杂交花朵，做好信息记录。保护处理:用纸巾和胶带仔细包裹杂交朵。跟踪标记:用彩色细线沿荚果螺旋方向缠绕，避免后期荚果成熟脱落丢失。杂种鉴定:对杂交种进行真伪性鉴定。具体的步骤如下:1.亲本材料的选择1.1母本的选择选择刚现蕾的花朵，花瓣还被花萼包裹，花萼缘口刚出现花瓣。此时可见花瓣的长度约为花萼的1/2 (约Imm);如果花瓣长度与花萼等长或超过花萼，此时虽然花瓣未打开，但是雌雄蕊已经完成了自花授粉，柱头已经萎焉变形，花托明显膨大，就不能作为受体了 ；另外值得注意的是，适合杂交的母本，花瓣打开后，雄蕊应明显成颗粒状，而某些花瓣打开后，雄蕊相连，成肉松状，不易于下面的去雄操作。选择合适的母本，为后面的完全去雄提供了方便，健壮的柱头也更容易接受授粉和发育，提高了杂交的成功率。1.2父本的选择选择盛花期或临近盛花期的花，花的形态成蝶形，旗瓣、翼瓣、龙骨瓣明显。剥离花瓣后，雄蕊尚存，花药开裂，花粉已经完全成熟，抖动时，有花粉散出，呈黄色粉末状。如此，可以选到花粉量大，花粉高度成熟的父本花朵，方便授粉过程，提高了杂交的成功率。此外，选择父本前，可以停止对金花菜的浇水，因为适当的干旱胁迫，可以使金花菜提前进行生殖生长，大量开花，扩大了父本的选择范围。2.母本去雄由于金花菜花器小，操作时要清楚、仔细、平稳。合适、健壮的母本，一定要在彻底去雄的同时，避免花粉触碰柱头，伤害柱头。下面就介绍两种易于操作的技术手法。2.1悬空操作法选择11#手术刀和ATT-1IE型号的镊子作为操作工具。这两种型号的工具其尺寸、外形、做工等方面都很适用于金花菜花朵的剥离。首先对镊子、手术刀用75%的酒精进行消毒处理。用镊子夹断母本花周围大的叶片和不适宜杂交的花，用带有乳胶手套的拇指、食指，轻捏花托部分，此时应保持手套的干燥和力度。乳胶手套可以避免手指出汗，发热，造成花梗的软化。用刀片从翼瓣中间将闭合的花瓣挑开，注意不要碰到雌蕊柱头。在解剖镜下，用刀片将花瓣、花萼在拇指、食指上切除，露出雌雄蕊，不建议用镊子拔除，因为镊子力度过大，会使花梗断裂。用刀片轻轻剔除雄蕊。剔除雄蕊过程中，一定要将10个雄蕊剔除完全；剔除雄蕊时，母本雄蕊会粘到手指上，因此在去雄后，一定要用水中洗手，避免在杂交时，手指上残留的母本花粉抖落，与母本柱头接触，造成自花授粉。悬空操作法的效果就是使手指可以自由拿别花，自由转动，在解剖镜子下，可以寻找最佳视角，立体地观察花的构造，小心剔除雄蕊。在后期的杂交时，也可以清楚地在视线内小心操作，提高杂交的成功率，眼睛也不会觉得酸痛。2.2载玻片法对镊子、手术刀进行消毒处理。用镊子剔除多余的花叶，然后用透明胶带贴住花梗，固定在载玻片上。置于解剖镜下，用手术刀进行花瓣、花萼的去除。在去除雄蕊后，轻轻的将胶带从载玻片上撕开。载破片法可以有效的避免手指接触花朵造成的伤害，透明的载玻片也不影响在解剖镜下的观察，而且固定住的花，对于手指粗大、手抖的人，更容易操作。3.获取花粉选取盛花期的花，花朵自然展开，可以轻松获得成熟花粉。判别有无成熟的花粉，只要用镊子捏取花，轻触几下大拇指指甲，若指甲上有黄色粉末，则说明花粉成熟。4.人工授粉用镊子将父本花的旗瓣、翼瓣、龙骨瓣拔取，可以清晰地看见雄蕊、雌蕊。在解剖镜下，轻轻地将父本雄蕊触碰母本柱头，来回反复几次，直至看到柱头上粘有花粉。金花菜是典型的闭花自花授粉，所以在授粉时，要避免母本本身花粉触碰柱头。对授粉花周围的枝叶进行适当修剪。金花菜是茎长、分枝多、花芽易分化的牧草。对杂交花上部和下部多余的枝叶进行修剪，以及对杂交花所在的花序、侧枝花芽进行摘心，可以减少养分供应的分散，对杂交花朵进行集中供养。值得注意的是，要保留杂交花着生处的叶片，这样可以保证杂交花所需的光合作用，配合集中供养，提高杂交的成功率。5.保护处理 杂交完成后，要轻轻摆立好花盆，先用彩色细线打结套在花梗上，再在自粘性标签上记录此次杂交的亲本单株、时间等信息，对折贴于细线上，做为标记，再用面纸、透明胶带包裹花朵。面纸剪成三角形，便于折叠，将花梗连同枝条本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金花菜的杂交方法，其特征在于步骤如下：(1)亲本的选择：母本的选择：选择刚现蕾的花朵，花瓣还被花萼包裹，花萼缘口刚出现花瓣，可见花瓣的长度约为花萼的1/2，挑开花瓣后，雄蕊应成明显的颗粒状，作为母本；父本的选择：选择盛花期时花瓣展开的花朵作为父本；(2)母本去雄：用镊子和手术刀去除母本中多余的花粉粒；(3)获取花粉：用镊子夹取父本花朵，切离花瓣、花萼，露出雄蕊；(4)人工授粉：人工授粉后包裹杂交花朵，做好信息记录。

【技术特征摘要】
1.一种金花菜的杂交方法，其特征在于步骤如下: (1)亲本的选择: 母本的选择:选择刚现蕾的花朵，花瓣还被花萼包裹，花萼缘口刚出现花瓣，可见花瓣的长度约为花萼的1/2，挑开花瓣后，雄蕊应成明显的颗粒状，作为母本； 父本的选择:选择盛花期时花瓣展开的花朵作为父本； (2)母本去雄:用镊子和手术刀去除母本中多余的花粉粒； (3)获取花粉:用镊子夹取父本花朵，切离花瓣、花萼，露出雄蕊； (4)人工授粉:人工授粉后包裹杂交花朵，做好信息记录。2.根据权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏臻武，陈祥，任海龙，王小山，刘国志，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32