一种β-葡聚糖基因载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种β-葡聚糖基因载体及其制备方法和应用。β-葡聚糖基因载体的制备包括如下步骤：（1）将β-葡聚糖溶于磷酸盐缓冲液中130-145℃下加热15-60分钟或溶于二甲基亚砜或强碱溶液中制得变性的单链多糖溶液；（2）将poly(dA)n通过共价键与目标核苷酸键接并溶于pH7-9缓冲液；（3）将（1）的变性单链多糖溶液加入到（2）poly(dA)n-目标核苷酸/缓冲溶液中，混匀，静置12-48小时。本发明专利技术的基因载体不显示细胞毒性，具有很好的稳定性、较高的转染效率和免疫活性，同时负电性能够避免血清的抑制作用，能够广泛用于CpGDNA的转染，促进炎症调节因子的释放，可用于免疫治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种β-葡聚糖基因载体及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种β -葡聚糖基因载体及其制备方法和应用，它属于高分子物理领域，也属于生物医用领域。
技术介绍
基因治疗已成为人类许多疾病的有效治疗方式，安全有效的基因载体是基因治疗成功与否的关键因素。目前报道的绝大多数非病毒基因载体，包括阳离子脂质体、树突状聚合物以及纳米粒子具有较高的细胞毒性，进而限制了这些载体的广泛应用。只有少数天然高分子，比如甲壳素和纤维素，因其良好的生物相容性、低免疫原性等优势被用于基因转染。但是，甲壳素和纤维素与DNA的结合能力差，导致较低的转染效率。为了解决这些问题，需对天然高分子进行化学修饰以提高基因转染效率。β-葡聚糖作为另一种具有较高生物活性的天然高分子，尤其是来自酵母和真菌的β_葡聚糖，能被鼠和人的巨噬细胞特异性识别，使β-葡聚糖作 为新型的药物和基因载体更具优势。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种β -葡聚糖基因载体及其制备方法和应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现: 一种β_葡聚糖基因载体的制备方法，包括如下步骤: (I)将β-葡聚糖溶于磷酸盐缓本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种β‑葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将β‑葡聚糖溶于磷酸盐缓冲液中130‑145℃下加热15‑60分钟或溶于二甲基亚砜或强碱溶液中制得变性的单链多糖溶液；（2）将poly(dA)n通过共价键与目标核苷酸键接并溶于pH 7‑9缓冲液；（3）将（1）得到的变性的单链多糖溶液加入到（2）得到的poly(dA)n‑目标核苷酸/缓冲溶液中，混匀，静置12‑48小时，得到β‑葡聚糖基因载体。

【技术特征摘要】
1.一种β-葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于包括如下步骤: (1)将β-葡聚糖溶于磷酸盐缓冲液中130-145°C下加热15-60分钟或溶于二甲基亚砜或强碱溶液中制得变性的单链多糖溶液； (2)将poly((^)?通过共价键与目标核苷酸键接并溶于pH 7-9缓冲液； (3)将(I)得到的变性的单链多糖溶液加入到(2)得到的poly(dA)n-目标核苷酸/缓冲溶液中，混匀，静置12-48小时，得到β -葡聚糖基因载体。2.根据权利要求1所述的葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于:步骤(1)中所述的葡聚糖为三螺旋葡聚糖，其分子量为5.0Χ104-4.5Χ105。3.根据权利要求1所述的葡聚糖基因载体的制备方法，其特征在于:步骤(1)中所述的强碱溶液的浓度> 0.1Μ。4.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：许小娟，刘青业，张俐娜，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42