microRNA‑23b及其拟似物在制备防治肥胖、高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及microRNA‑23b及其拟似物在制备防治肥胖、高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用，所述的microRNA‑23b的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述microRNA‑23b拟似物的核苷酸序列为在microRNA‑23b的核苷酸序列的基础上，对除了UCACAUU碱基外的其它核苷酸进行的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或几种的组合或核苷酸的增减、替换。本发明专利技术制备的药物可为microRNA‑23b及其拟私物单一成分，也可为一种药物组合物。本发明专利技术药物通过静脉，肌肉或腹腔注射等可用来治疗肥胖、高血脂、高血压及其并发症。

【技术实现步骤摘要】
microRNA-23b及其拟似物在制备防治肥胖、高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用
本专利技术涉及microRNA-23b及其拟似物在制备防治肥胖、高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用，属于生物医药领域。
技术介绍
肥胖是一种由多因素引起的慢性代谢性疾病，与糖尿病、高脂血症、心脑血管疾病及癌症等多种疾病有明显关系，被称为“万症之源”。目前，肥胖已经与艾滋病、吸毒和酗酒并列为世界四大生活问题，被公认为困扰人类健康的重要顽症之一。据“国际肥胖问题工作组”公布的数据显示，地球上每4人中就有1人过于肥胖。具体而言，全球3.12亿人体重超标，17亿人应该减肥。报告指出，全世界肥胖人口已超过饥饿人口，超重和肥胖已经成为困扰发达国家和发展中国家的一个重大社会问题，也是整个人类社会所要面临的巨大挑战。肥胖可伴有或不伴有高血脂的发生，高血脂是一种全身性疾病，指血中总胆固醇（TC）和/或甘油三酯（TG）过高或高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）过低，也称高脂血症。高脂血症的主要危害是导致动脉粥样硬化，进而导致众多的相关疾病，其中最常见的一种致命性疾病就是冠心病，严重乳糜微粒血症可导致急性胰腺炎，是另一种致命性疾病。此外，高脂血症也是导致糖耐量异常、糖尿病的一个重要危险因素。高脂血症还可导致脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、眼底出血、周围血管疾病、高尿酸血症。目前，对于肥胖及高血脂的防治效果并不理想，极易造成多种并发症的产生，因此急需建立一种以新的治疗靶点研发的有效药物。microRNA（miRNA）起源于内源性表达转录本，是长约21-25nt的双链RNA分子。成熟的microRNA可以结合基因沉默复合体（RNA-InducedSilencingComplex,RISC）并与靶标mRNA并列互补；microRNA和靶序列的互补程度决定了靶基因mRNA在翻译水平被部分抑制或完全断裂。植物体中，断裂似乎是主要的工作方式，而哺乳动物中则以翻译水平的抑制为主要方式。研究表明，microRNA广泛参与发育、凋亡、分化、增殖、代谢等过程的调控，在生命体的各种生命活动中发挥着重要作用。近年来，基于microRNA为靶点的药物不断获得实验成功，从而为各种病症的治疗带来新的希望，因此，以microRNA做为治疗肥胖和高血脂的新靶点有着十分重大的突破性和应用性。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术采用多种技术手段证明了microRNA-23b（miR-23b）及其拟似物在制备防治肥胖、高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用。其中，所述的microRNA-23b的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述microRNA-23b拟似物的核苷酸序列为为在microRNA-23b的核苷酸序列的基础上，对除了UCACAUU碱基外的其它核苷酸进行的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或几种的组合或核苷酸的增减、替换。优选的，所述的microRNA-23b拟似物的核苷酸序列为在microRNA-23b的核苷酸序列的基础上对碱基进行了甲基化修饰，并对5’端利用胆固醇进行了标记。所述的肥胖、高血脂、高血压并发症包括糖尿病肝病、糖尿病心肌病、糖尿病肾病、动脉粥样硬化、冠心病、心肌肥厚、胰腺炎和脂肪肝。本领域技术人员可对本专利技术所述的microRNA-23b及其拟似物的核苷酸序列进行适当修饰，所述的修饰包括除UCACAUU序列外任意核苷酸的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或几种的组合或任意核苷酸的增减、替换，只要修饰后的核苷酸序列仍具有与microRNA-23b相同的活性就应当属于本专利技术所要保护的范围之内。进一步的，本专利技术还包括microRNA-23b作为肥胖、高血脂、高血压的诊断检测的血清biomarker（标志物）。更进一步的，本专利技术还提供了一种用于预防或治疗肥胖、高血脂、高血压及并发症的药物组合物，所述组合物含有microRNA-23b或者microRNA-23b的拟似物以及药学上接受的载体。优选的，所述的载体为病毒、胆固醇、纳米颗粒、壳聚糖或脂质体。在本专利技术中，可将上述组合物按照药物制备的常规方法制成注射制剂，口服制剂，喷雾制剂，软膏制剂或贴剂等。附图说明图1为1个月各组db/db转基因鼠体重变化情况；图2为1个月后各组db/db转基因鼠血清中TG含量；图3为1个月后各组db/db转基因鼠肝脏中TG含量；图4为1个月后各组db/db转基因鼠脂肪组织中TG含量；图5为1个月后各组db/db转基因鼠脂肪HE染色及F4/80免疫荧光；图6为1个月后各组db/db转基因鼠肝脏HE染色及肝脏细胞电镜图片；图7为1个月后各组db/db转基因鼠血压变化；图8为1个月后各组正常C57B6小鼠注射microRNA-23b类似物后血压变化。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实施例1microRNA-23b及其microRNA-23b拟似物对肥胖、高血脂、高血压的治疗作用。（1）选用体重为45-50g成年健康db/db转基因Ⅱ型糖尿病肥胖小鼠（上海斯莱克动物公司），分为4组：①正常对照组；②db/db转基因Ⅱ型糖尿病肥胖小鼠；③db/db转基因Ⅱ型糖尿病肥胖小鼠注射含有microRNA-23b序列（SEQIDNO.1所示）的试剂，注射剂量为0.2ml/10nM;④db/db转基因Ⅱ型糖尿病肥胖小鼠注射阴性对照试剂，阴性对照试剂主要成分为含有SEQIDNO.2所示序列的试剂，注射剂量为0.2ml/10nM。该microRNA与任何人、大鼠、小鼠microRNA几乎无同源性，广泛用于microRNA相关实验中，注射注射剂量为0.2ml/10nM。3、4、5组Db/Db小鼠每3天注射一次，一个月后进行测血压、取材、取血清。（2）选用体重为25-30g成年健康C57BL小鼠（上海斯莱克），分为3组：①正常对照组；②正常C57BL小鼠注射microRNA-23b（SEQIDNO.1所示），注射剂量为0.2ml/10nM;③正常C57BL小鼠注射阴性对照试剂，阴性对照试剂主要成分为，注射剂量为0.2ml/10nM。该microRNA与任何人、大鼠、小鼠microRNA几乎无同源性，广泛用于microRNA相关实验中，注射注射剂量为0.2ml/10nM。各组体重变化如图1所示。结果可见microRNA-23b作用组大鼠体重明显低于单纯肥胖组（P<0.05,P<0.001）。用试剂盒测量各组大鼠血清、肝脏、脂肪中TG含量，结果如图2-4所示microRNA-23b作用组大鼠相对肥胖组TG显著降低（P<0.05,P<0.001），图5可见脂肪细胞体积明显减小（P<0.001），图6可见肝脏HE染色可见microRNA-23b可明显逆转脂肪细胞增多，而肝细胞中脂滴显著降低，图7可见microRNA-23b可以降低dbdb转基因肥胖小鼠血压（P&l本文档来自技高网...

【技术保护点】
microRNA‑23b及其拟似物在制备防治肥胖、高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用，其特征在于，所述的microRNA‑23b的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述microRNA‑23b拟似物的核苷酸序列为在microRNA‑23b的核苷酸序列的基础上，对除了UCACAUU碱基外的其它核苷酸进行的核糖修饰、碱基修饰和磷酸骨架修饰中的一种或几种的组合或核苷酸的增减、替换。

【技术特征摘要】
1.microRNA-23b在制备防治II型糖尿病导致的高血脂、高血压及其并发症的药物中的应用，其特征在于，所述的microRNA-23b的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述的并发症包...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵冰海，初彦辉，李洪志，刘洁婷，柏合，张春雷，
申请(专利权)人：牡丹江医学院，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23