【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种甘薯褪绿矮化病毒西非株系的实时荧光定量PCR检测方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)以甘薯褪绿矮化病毒西非株系SPCSV‑WA的核苷酸序列为模板,设计扩增SPCSV‑WA cp基因的特异性引物CSV‑CP‑P1和CSV‑CP‑P2,在SPCSV‑WA cp基因内部设计特异性引物CSV‑DL1、CSV‑DL2和特异性CSV探针,设计的引物和探针序列分别为:CSV‑CP‑P1:ATGGCTGATAGCACTAAAGTCGA; CSV‑CP‑P2:TCAACAGTGAAGACCTGTTCCAG; CSV‑DL1:5′‑GACTCAGATTTGGAAACTAA‑3′; CSV‑DL2:5′‑TGGAGAATTGGAATATACTTG‑3′; CSV探针:FAM‑5′‑AACTACAGTCCGAGTATGCGTCTC‑3′‑BHQ1; (2)病毒RNA的提取和RT‑PCR用柱式总RNA抽提试剂盒,提取感病甘薯叶片的总RNA;用CSV‑DL2引物反转录合成cDNA第一链,用于实时荧光定量PCR检测;然后用CSV‑CP‑P2引物反转录合成cDNA第一链,利用正向引物C ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:张振臣,王丽,张德胜,王爽,乔奇,秦艳红,田雨婷,王永江,
申请(专利权)人:河南省农业科学院植物保护研究所,
类型:发明
国别省市:河南;41
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