沿岸水体沉积物表层底栖微型藻类的提取方法，涉及微型藻的分离。提供一种用于稳定同位素测定的沿岸水体泥质或泥沙质沉积物表层的底栖微型藻类样品的提取方法。采集沉积物，在沉积物表层铺设第一层沙层，在第一层沙层表面覆上筛绢，筛绢上再铺设第二层沙层，从上到下形成“第二层沙层-筛绢-第一层沙层-沉积物层”的四层结构，在第二层沙层上喷洒过滤海水湿润沙表面，盖上透光外罩并放在有光的环境中；收集筛绢上的沙至海水中并搅拌，使底栖微型藻类充分悬浮，待沙沉淀后，导出上层水液，经筛绢过滤拦截可能的细沙颗粒，然后将滤液过滤至GF/F膜上，即得沿岸水体沉积物表层底栖微型藻类，可用于碳、氮稳定同位素的测定。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】，涉及微型藻的分离。提供一种用于稳定同位素测定的沿岸水体泥质或泥沙质沉积物表层的底栖微型藻类样品的提取方法。采集沉积物，在沉积物表层铺设第一层沙层，在第一层沙层表面覆上筛绢，筛绢上再铺设第二层沙层，从上到下形成“第二层沙层-筛绢-第一层沙层-沉积物层”的四层结构，在第二层沙层上喷洒过滤海水湿润沙表面，盖上透光外罩并放在有光的环境中；收集筛绢上的沙至海水中并搅拌，使底栖微型藻类充分悬浮，待沙沉淀后，导出上层水液，经筛绢过滤拦截可能的细沙颗粒，然后将滤液过滤至GF/F膜上，即得沿岸水体沉积物表层底栖微型藻类，可用于碳、氮稳定同位素的测定。【专利说明】
本专利技术涉及微型藻的分离，尤其是涉及一种用于稳定同位素测定的沿岸水体泥质或泥沙质沉积物表层的底栖微型藻类样品的提取方法，主要用于提取具有运动能力的羽纹硅藻和具鞭毛的甲藻等藻类，通过该技术可以提取环境中含量较低的微型藻类，用于稳定同位素测定以及用于底栖微型藻类的进一步纯化、培养的粗样品需求。
技术介绍
在沿岸海洋生态系统中，初级生产者是支持食物网正常流转的物质基础或有机碳的来源。在这些初级生产者中，底栖微型藻类在河口、潟湖、潮滩等沿岸浅水系统的营养贡献得到广泛的关注(Miller DC, Geider RJ, MacIntyre HL.Microphytobenthos: theecological role of the “secret garden，，of unvegetated, shallow-water marinehabitats.11.Role in sediment stability and shallow-water food webs.Estuaries,1996,19:202-212;Ansel I A, Gibson R,Barnes M.The role of benthicmicroalgae in neritic ecosystems.0ceanography and marine biology: an annualreview, 1999，37:47-86)。许多研究表明，在近岸的海草床生态系统和盐沼湿地，底栖微型藻类在食物网的营养动态中扮演着重要的角色(Moncreiff CA, SullivanMJ.Trophic importance of epiphytic algae in subtropical seagrassbeds: evidence from multiple stable isotope analyses.Marine Ecology-ProgressSeries, 2001，215:93-106)。在食物网研究中，稳定同位素示踪技术是用于追溯消费者有机碳源及确定其营养级的有效工作。在底质为泥质或泥沙质沉积物的沿岸浅水系统，却很少人关注底栖微型藻类在食物网营养动态中的作用。这主要是由于泥质或泥沙质水质浑浊，传统的方法很难获取纯净、无污染的底栖微型藻类样品。有研究表明，在无植被覆盖的沿岸浅水系统底栖微型藻类生物量和生产力高(MacIntyre HL, Geider RJ, Miller DC.Microphytobenthos: theecological role of the “secret garden^of unvegetated, shallow-watermarine habitats.1.Distribution,abundance and primary production.Estuaries, 2006, 19:186-201)。许多研究也显示，底栖微型藻类可能是消费者重要的碳源，如栖息在沉积物中的多毛类，小型甲壳动物以及植食性螺和滤食性双壳类等软体动物(Kang CK, Kim JB, Lee KS, Kim JB, Lee PY, Hong JS.Trophic importance of benthicmicroalgae to macrozoobenthos in coastal bay systems in Korea:dual stable Cand N isotope analyses.Marine Ecology Progress Series, 2003, 259:79-92;YokoyamaH, Ishihi Y.Feeding of the bivalve Theora lubrica on benthic microalgae:1sotopicevidence.Marine Ecology Progress Series, 2003，255:303-309)。鱼类胃含物的分析结果显示，底栖微型藻类是鲻鱼，罗非鱼等杂食性鱼类的重要食物来源(黄良敏，张雅芝，潘佳佳，等.厦门东海域鱼类食物网研究.台湾海峡，2008，27:64-73; Lin HJ, Kao WY, WangYT.Analyses of stomach contents and stable isotopes reveal food sources ofestuarine detritivorous fish in tropical/subtropical Taiwan.Estuarine, Coastaland Shelf Science, 2007，73:527-537)。因此，在利用稳定同位素技术研究沿岸系统的食物网动态时，底栖微型藻类的作用不容忽视，这对充分理解沿岸生态系统结构和功能具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于稳定同位素测定的沿岸水体泥质或泥沙质沉积物表层的底栖微型藻类样品的提取方法。本专利技术包括以下步骤:I)采集沉积物，在沉积物表层铺设第一层沙层，在第一层沙层表面覆上筛絹，筛絹上再铺设第二层沙层，从上到下形成“第二层沙层-筛絹-第一层沙层-沉积物层”的四层结构，在第二层沙层上喷洒过滤海水湿润沙表面，盖上透光外罩并放在有光的环境中；2)收集筛絹上的沙至海水中并搅拌，使底栖微型藻类充分悬浮，待沙沉淀后，导出上层水液，经筛絹过滤拦截可能的细沙颗粒，然后将滤液过滤至GF/F膜上，即得沿岸水体沉积物表层底栖微型藻类，可用于碳、氮稳定同位素的测定。在步骤I)中，所述沉积物的厚度可为I?2cm，沉积物的表面积最好在0.04m2以上，保证可以在环境较低的藻密度下提取足够用于稳定同位素分析的样品；所述沉积物的表面最好完整，没有被扰动和翻转；所述第一层沙层的厚度最好是0.5mm,第一层沙层的沙颗粒粒径最好是0.5?1mm，第一层沙层的沙可采用石英砂，所述沙最好预先在马弗炉550°C灼烧4h以去除其中的有机质，然后将灼烧过的沙子滤洗，烘干；所述筛絹的孔径可为63 μ m ;筛絹是用于阻止栖息沉积物中的底栖动物进入沙层，但又能让底栖微型藻类自由进出沙层，由于底栖微型藻类个体小，粒径大多在63 μ m以下，因此所述的筛絹筛絹孔径最好是63 μ m左右的孔径；所述第二层沙层的厚度可为0.5cm ;所述过滤海水可取自采样区域的海水且需经过0.22 μ m的微孔滤膜过滤(无菌水)；所述透光外罩可米用玻璃外罩或亚克力外罩等；所述有光的环境可以是现场或实验室，但以现场本文档来自技高网...
【技术保护点】
沿岸水体沉积物表层底栖微型藻类的提取方法，其特征在于包括以下步骤：1）采集沉积物，在沉积物表层铺设第一层沙层，在第一层沙层表面覆上筛绢，筛绢上再铺设第二层沙层，从上到下形成“第二层沙层‑筛绢‑第一层沙层‑沉积物层”的四层结构，在第二层沙层上喷洒过滤海水湿润沙表面，盖上透光外罩并放在有光的环境中；2）收集筛绢上的沙至海水中并搅拌，使底栖微型藻类充分悬浮，待沙沉淀后，导出上层水液，经筛绢过滤拦截可能的细沙颗粒，然后将滤液过滤至GF/F膜上，即得沿岸水体沉积物表层底栖微型藻类，可用于碳、氮稳定同位素的测定。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郑新庆，蓝文陆，林荣澄，
申请(专利权)人：国家海洋局第三海洋研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35
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