基于dCAPS技术对日本看麦娘抗药性相关突变的分子检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于dCAPS技术检测导致日本看麦娘对ACCase抑制剂类除草剂产生抗性的相关突变的分子检测方法，可用于对日本看麦娘抗性相关突变进行快速准确的检测，本发明专利技术属于生物技术领域。根据日本看麦娘与抗性相关的ACCase基因，针对不同突变分别设计引物，以日本看麦娘基因组DNA为模板进行PCR扩增并获得扩增片段；选择相应的限制性内切酶对上述的PCR扩增片段进行酶切；酶切后根据琼脂糖凝胶电泳可判断日本看麦娘是否具有抗性相关突变及其突变的基因型。相对于传统的突变检测方法，本发明专利技术的特异性强，准确度高，方法更加快速简单，并且大大降低了检测成本，为日本看麦娘抗性相关突变的检测提供了一种优良的分子检测方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速准确检测抗ACCase抑制剂类除草剂的日本看麦娘、看麦娘、菵草等杂草中与抗性相关的突变位点(Ile‑1781‑Leu，Trp‑1999‑Cys，Trp‑1999‑Leu，Trp‑2027‑Cys，Ile‑2041‑Asn，Asp‑2078‑Gly)的分子检测方法，其特征是基于衍生酶切扩增多态性(dCAPS)技术对抗性相关突变的检测，该方法包括以下步骤：步骤1：提取杂草DNA样本；步骤2：进行PCR；步骤3：用限制性内切酶酶切PCR产物；步骤4：琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：董立尧，徐洪乐，李俊，潘浪，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32