UROD自身抗体识别的抗原多肽制造技术

本发明专利技术涉及UROD自身抗体识别的抗原多肽。其中，该多肽具有如SEQ IDNO：1-5所示氨基酸序列至少之一。利用本发明专利技术的UROD自身抗体识别的抗原多肽，能够有效地检测样品，例如肺癌或疑似肺癌患者的血液样品（例如血清样品）中的UROD自身抗体。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及UROD自身抗体识别的抗原多肽。其中，该多肽具有如SEQ?IDNO：1-5所示氨基酸序列至少之一。利用本专利技术的UROD自身抗体识别的抗原多肽，能够有效地检测样品，例如肺癌或疑似肺癌患者的血液样品（例如血清样品）中的UROD自身抗体。【专利说明】UROD自身抗体识别的抗原多肽
本专利技术涉及生物医学领域。具体地，本专利技术涉及UROD自身抗体识别的抗原多肽及其用途。更具体地，本专利技术涉及一种UROD自身抗体识别的抗原多肽、该多肽在制备检测肿瘤血清中UROD抗体的用途、一种用于检测样品中UROD抗体的试剂盒。
技术介绍
肺癌，尤其是非小细胞肺癌(NSCLC)生物学特性十分复杂，早期无创性诊断困难，目前寻找肿瘤相关标志物已成为NSCLC等肺癌早期诊断和免疫治疗的研究热点。而近年研究表明，肿瘤患者自身免疫系统会对肿瘤相关抗原产生自身抗体，这些自身抗体存在于肺癌患者体循环中，甚至在肺癌临床症状出现5年前就可以出现了，因此自身抗体可能成为监测肿瘤发生的早期标志物。相较于血清中肿瘤抗原型标志物,血清中肿瘤抗原相应自身抗体同时具有丰度高，易检测等优势，可能成为更为可靠的血清肿瘤标志物，将有助于肿瘤的早期诊断。因此，寻找NSCLC等肺癌抗原相应自身抗体，对于NSCLC等肺癌的早期诊断以及预后检测意义重大。然而，目前相关报道很少。
技术实现思路
本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的:专利技术人在肺癌T7噬菌体展示cDNA文库结合血清学筛选研究中发现，UROD为肺癌相关的肿瘤相关抗原之一，血液样本中UROD的自身抗体水平在肺癌患者中远高于健康对照者。UROD自身抗体可能成为 更为有效的肿瘤标志物，但是目前尚未有商品化的UROD自身抗体检测试剂盒。其中，UROD (uroporphyrinogen decarboxylase,尿卟啉原脱羧酶)是一种参与生产血红素分子的酶，而血红素对身体所有器官都是至关重要的(尽管它在血液、骨髓和肝脏中最丰富)。血红素是一类叫做血红素蛋白(其中包括在血液中携带氧气的蛋白:血红蛋白)的含铁蛋白中的主要成分。在小鼠中，阻断UROD基因的表达可增加癌细胞的死亡。对头颈部癌症组织样本的分析披露，肿瘤中的UROD蛋白表达水平比正常组织显著升高。此外，研究人员确认，临床结果的改善与病人体内较低的UROD水平有关联，提示UROD可被用来预测病人对放疗的反应。UROD抑制剂将来可与放疗和化疗共同使用以降低副作用。进一步，专利技术人发现，UROD自身抗体水平检测可能有助于肿瘤中UROD浓度的无创性检测，另外，UROD自身抗体可能存在拮抗肿瘤中UROD的作用，UROD自身抗体具有保护性作用。由此，本专利技术提出了一种UROD自身抗体识别的抗原多肽。根据本专利技术的实施例，其多肽活性片段为下列至少之一:I) SEQ ID NO:1:ARECVGKTVTLQGNLDPCAL ；2) SEQ ID NO:2:DPNSARECVGKTVTL ；3) SEQ ID NO:3: SARECVGKTVTLQGN ；4) SEQ ID NO:4:ECVGKTVTLQGNLDP ；5) SEQ ID NO:5:GKTVTLQGNLDPCAL ；6) SEQ ID NO: 1_5所示氨基酸序列经氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。根据本专利技术的实施例，优选地，本专利技术的UROD自身抗体识别的抗原多肽具有如ARECVGKTVTLQGNLDPCAL (SEQ ID NO:1)所示的氨基酸序列。由此，可以进一步提高利用多肽检测肺癌或疑似肺癌患者的血液样品中的UROD自身抗体的效率。另外，本专利技术还提出了前面所述的UROD自身抗体识别的抗原多肽在制备检测肿瘤血清UROD抗体试剂盒中的用途。尤其是，该试剂盒可以用于检测的肿瘤为肺癌。另外，利用该试剂盒还可以通过检测对象血液中UROD自身抗体的存在，而对患者对治疗方法例如放射疗法的反应进行预后。为此，本专利技术提出了一种用于检测样品中UROD抗体的试剂盒。根据本专利技术的实施例，该试剂盒包括:前面所述的UROD自身抗体识别的抗原多肽。具体地，根据本专利技术的实施例，该试剂盒可以包括:96孔板，所述96孔板的孔中包被前面所述的UROD自身抗体识别的抗原多肽。进一步，该试剂盒可以进一步包括:阴性对照样品，所述阴性对照样品为UROD抗体为阴性的血清，或者/额外地可以进一步包括:标准样品，所述标准样品为UROD抗体浓度分别为lU/ml，5U/ml，10U/ml，15U/ml的血清。根据本专利技术的实施例，UROD自身抗体识别的抗原多肽的浓度可以为，每个反应孔I μ g/ml。根据本专利技术的实施例，尤其是，该试剂盒可以用于检测的肿瘤为肺癌。为此，在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种分离的多肽。根据本专利技术的实施例，该多肽具有如SEQ ID NO:1-5所示氨基酸序列至少之一。即，多肽具有如下列所示氨基酸序列之一:SEQ ID NO:1:ARECVGKTVTLQGNLDPCAL ；SEQ ID N0:2:DPNSARECVGKTVTL ；SEQ ID NO:3:SARECVGKTVTLQGN ；SEQ ID N0:4:ECVGKTVTLQGNLDP ；SEQ ID NO:5:GKTVTLQGNLDPCAL。根据本专利技术的实施例，利用具有上述氨基酸序列的多肽，能够有效地检测样品，例如肺癌或疑似肺癌患者的血液样品(例如血清样品)中的UROD自身抗体。由此，可以用于检测患者是否患有肿瘤，例如肺癌。另外,还可以通过检测对象血液中UROD自身抗体的存在，而对患者对治疗方法例如放射疗法的反应进行预后。根据本专利技术的实施例，优选地所述多肽具有如ARECVGKTVTLQGNLDPCAL (SEQ IDNO:1)所示的氨基酸序列。由此，可以进一步提高利用多肽检测肺癌或疑似肺癌患者的血液样品中的UROD自身抗体的效率。在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了前面所述多肽在检测样品中UROD自身抗体的用途。根据本专利技术的实施例，所述样品为来自肺癌或疑似肺癌患者以及健康志愿者的血液样品。在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了前面所述多肽在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于检测样品中的UROD自身抗体。根据本专利技术的实施例，所述样品为来自肺癌或疑似肺癌患者以及健康志愿者的血液样品。在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种用于检测样品中UROD自身抗体的试剂盒。根据本专利技术的实施例，该试剂盒包括:前面所述的多肽。由此，利用根据本专利技术的实施例，可以有效地借助根据本专利技术的多肽对样品中的UROD自身抗体进行检测。根据本专利技术的实施例，该试剂盒可以进一步包括:适于进行ELISA检测的试剂。由此，可以通过ELISA检测方法，利用根据本专利技术的多肽对样品中的UROD自身抗体进行检测，从而可以进一步提高利用多肽检测肺癌或疑似肺癌患者的血液样品中的UROD自身抗体的效率。根据本专利技术的实施例，所述多肽设置于96孔板中。由此，可以方便地高通量地进行检测。可以进一步提高利用多肽检测肺癌或疑似肺癌患者的血液样品中的UROD自身抗体的效率。根据本专利技术的实施例，所述样品为来自肺癌或疑似肺癌患者以及健康志愿者的血液样品。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种UROD自身抗体识别的抗原多肽，其特征在于，其多肽活性片段为下列至少之一：1）SEQ ID NO:1：ARECVGKTVTLQGNLDPCAL；2）SEQ ID NO:2：DPNSARECVGKTVTL；3）SEQ ID NO:3：SARECVGKTVTLQGN；4）SEQ ID NO:4：ECVGKTVTLQGNLDP；5）SEQ ID NO:5：GKTVTLQGNLDPCAL；6）SEQ ID NO:1‑5所示氨基酸序列经氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：岳文涛，张丽娜，赵晓婷，顾勐，王玥，
申请(专利权)人：北京市结核病胸部肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11