一种紫色马勃液体菌种的制作方法技术

技术编号:10089749 阅读:298 留言:0更新日期:2014-05-28 12:09
本发明专利技术公开了一种紫色马勃液体菌种的制作方法,它是由紫色马勃子实体,马铃薯,胰蛋白胨,碳酰二胺,葡萄糖,牛肉浸膏,玉米粒,维生素B1,磷酸氢二钾,硫酸镁,氯化钙等制作特定紫色马勃液体培养基,经培养基灭菌、接种、菌种培养而得。本发明专利技术与现有技术相比具有十分突出的特点,本发明专利技术紫色马勃液体菌种的制作方法简单;可使生产成本降低20%以上;菌种污染可降低30%以上;菌丝体生物量(125.55mg/kg)比传统方法提高20mg/kg以上,菌种对林木的感染强度(62%)可比传统方法提高15%以上。本发明专利技术专利的方法可实现紫色马勃液体菌种的规模化、产业化生产,为贵州山区农民打开一条致富之路。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了,它是由紫色马勃子实体,马铃薯,胰蛋白胨,碳酰二胺,葡萄糖,牛肉浸膏,玉米粒,维生素B1,磷酸氢二钾,硫酸镁,氯化钙等制作特定紫色马勃液体培养基,经培养基灭菌、接种、菌种培养而得。本专利技术与现有技术相比具有十分突出的特点,本专利技术紫色马勃液体菌种的制作方法简单;可使生产成本降低20%以上;菌种污染可降低30%以上;菌丝体生物量(125.55mg/kg)比传统方法提高20mg/kg以上,菌种对林木的感染强度(62%)可比传统方法提高15%以上。本专利技术专利的方法可实现紫色马勃液体菌种的规模化、产业化生产,为贵州山区农民打开一条致富之路。【专利说明】
本专利技术涉及食药用菌菌种制作
,特别是涉及。
技术介绍
紫色马勃(Ck/FaiiaIilacina (Mont.et Berk.) Lloyd.)子实体陀螺形,较小,直径通常5~12厘米,上部扁圆形产孢子,下部不育,成一个长圆柱状的柄,又称有柄马勃;孢子老熟后,上部全破失,只剩杯状不育基部。孢子球形,直径4~5.5微米,上有小刺;孢丝很长,分枝,有横隔,互相交织,色淡,粗2~5微米。与林木共生,能提高林木抗逆性,促进林木的生长发育。紫色马勃含磷酸钠、马勃素(gemmatein, C17H12O7X麦角甾醇、亮氨酸(leucine)、酪氨酸(tyrosine)等氨基酸及尿素、类脂质等。具有机械性止血作用,对口腔出血有明显的止血作用,疗效不亚于淀粉海绵或明胶海绵,其水浸剂对奥杜盎氏小芽胞癣菌、铁锈色小芽胞癣菌等皮肤真菌均有不同程度的抑制作用。紫色马勃作为一种外生菌根真菌,既具有重要的经济作用,也具有重要的生态功能。紫色马勃子实体带有种类较多的真菌和数量庞大的细菌,由于受到菌种培养技术的制约,紫色马勃引种驯化工作一直没有得到突破性进展,其开发利用仅限于野生资源。导致紫色马勃资源开发利用基本上处于“自然生长,自由采集,自发贸易”的状态,每到采收季节,采菌的人们掠夺式地采集紫色马勃,严重损害了紫色马勃赖于生存、生长的自然环境,紫色马勃产量逐年减少,在某些区域甚至面临濒危灭绝的境地。
技术实现思路
`本专利技术所要解决的技术问题是克服现有紫色马勃菌种污染率高、生长周期长、工艺复杂的问题,提供一种新的紫色马勃液体菌种制作方法,使得制成的紫色马勃菌种工艺简便、菌种纯、污染少、操作简单、周期短(6~8d)。为了解决上述技术问题,本专利技术采用如下的技术方案: 1、,其特征在于:包括以下步骤 (1)培养基制作:按重量份数计算,将成熟紫色马勃子实体150-200份切成块状,去皮马铃薯150-200份切成块状,将块状紫色马勃子实体和块状马铃薯加入1000份水中,煮沸30~40min,用纱布滤去紫色马勃子实体和土豆残渣,向滤液中加入胰蛋白胨5_8份,碳酰二胺0.45-0.50份,葡萄糖8-10份,牛肉浸膏0.55-0.65份,玉米粒8_10份,维生素B10.000031-0.000033份,磷酸氢二钾0.50-0.70份,硫酸镁0.50-0.60份,氯化钙0.60-0.70份,加水定容至1000份,控制pH值为5.5-6.5 ; (2)培养基灭菌:将配制的培养基分装于三角瓶内,每瓶150-200ml,用棉塞盖上,在110-130°C下用压力为0.1~0.15Mpa的高压蒸汽灭菌25-35min,然后置于24~28°C恒温培养箱培养24h,无菌生长的紫色马勃液体培养基留存备用;(3)接种:将灭菌培养基及接种工具放入超净工作台中,采用紫外灯灭菌30-40min后,在超净工作台中用棉花蘸75%的酒精将紫色马勃子实体整体擦试一遍,然后点燃酒精灯,将接种刀置酒精灯外焰灼烧ls,在酒精灯外焰前上方5-6cm处用灼烧后的接种刀将紫色马勃子实体划成3-4辨,取菌盖与菌柄相接处紫色马勃子实体组织1-1.5份放入无菌生长的紫色马勃液体培养基中; (4)菌种培养:将接种好的培养基置于25-28°C、120-140r/ min的菌种培养摇床中培养6~8d,待培养基中长满白色菌丝即可进行下一步的接种栽培。本专利技术紫色马勃液体菌种的制作方法,在紫色马勃液体菌种培养基中加入少许玉米粒,在摇床中培养过程中,菌丝附着生长在麦粒周围,从而缩短培养时间。本专利技术与现有技术相比具有十分突出的特点,本专利技术紫色马勃液体菌种的制作方法简单;可使生产成本降低20%以上;菌种污染可降低30%以上;菌丝体生物量(125.55mg/kg)比传统方法提高20 mg/kg以上,菌种对林木的感染强度(62%)可比传统方法提高15%以上。本专利技术专利的方法可实现紫色马勃液体菌种的规模化、产业化生产,为贵州山区农民打开一条致富之路。【具体实施方式】实施例1: 1、,其特征在于:包括以下步骤 (1)培养基制作:按重量份数计算,将成熟紫色马勃子实体150份切成块状,去皮马铃薯150份切成块状,将块状紫色马勃子实体和块状马铃薯加入1000份水中,煮沸30min,用纱布滤去紫色马勃子实体和土豆残渣得滤液,在滤液中加入胰蛋白胨5份,碳酰二胺0.45份,葡萄糖8份,牛肉浸膏0.`55份,玉米粒8份,维生素B10.000031份,磷酸氢二钾0.50份,硫酸镁0.50份,氯化钙0.60份,加水定容至1000份,控制pH值为5.5-6.5 ; (2)培养基灭菌:将配制的培养基分装于三角瓶内,每瓶150ml,用棉塞盖上,在110°C下用压力为0.1~0.15Mpa的高压蒸汽灭菌25min,然后置于24°C恒温培养箱培养24h,无菌生长的紫色马勃液体培养基留存备用; (3 )接种:将灭菌培养基及接种工具放入超净工作台中,采用紫外灯灭菌30min后,在超净工作台中用棉花蘸75%的酒精将紫色马勃子实体整体擦试一遍,然后点燃酒精灯,将接种刀置酒精灯外焰灼烧ls,在酒精灯外焰前上方5cm处用灼烧后的接种刀将紫色马勃子实体划成3辨,取菌盖与菌柄相接处紫色马勃子实体组织1份放入无菌生长的紫色马勃液体培养基中; (4)菌种培养:将接种好的培养基置于25°C、120-140r / min的菌种培养摇床中培养6d,待培养基中长满白色菌丝即可进行下一步的接种栽培。实施例2:1、,其特征在于:包括以下步骤(O培养基制作:按重量份数计算,将成熟紫色马勃子实体200份切成块状,去皮马铃薯200份切成块状,将块状紫色马勃子实体和块状马铃薯加入1000份水中,煮沸40min,用纱布滤去紫色马勃子实体和土豆残渣得滤液,在滤液中加入胰蛋白胨8份,碳酰二胺0.50份,葡萄糖10份,牛肉浸膏0.65份,玉米粒10份,维生素B10.000033份,磷酸氢二钾0.70份,硫酸镁0.60份,氯化钙0.70份,加水定容至1000份,控制pH值为5.5-6.5 ; (2)培养基灭菌:将配制的培养基分装于三角瓶内,每瓶200ml,用棉塞盖上,在130°C下用压力为0.1~0.15Mpa的高压蒸汽灭菌35min,然后置于28°C恒温培养箱培养24h,无菌生长的紫色马勃液体培养基留存备用; (3 )接种:将灭菌培养基及接种工具放入超净工作台中,采用紫外灯灭菌40min后,在超净工作台中用棉花蘸75%的酒精将紫色马勃子实体整体擦试一遍,然后点燃酒精灯,将接种刀置酒精灯本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种紫色马勃液体菌种的制作方法,其特征在于:包括以下步骤(1)培养基制作:按重量份数计算,将成熟紫色马勃子实体150?200份切成块状,去皮马铃薯150?200份切成块状,将块状紫色马勃子实体和块状马铃薯加入1000份水中,煮沸30~40min,用纱布滤去紫色马勃子实体和土豆残渣得滤液,在滤液中加入胰蛋白胨5?8份,碳酰二胺0.45?0.50份,葡萄糖8?10份,牛肉浸膏0.55?0.65份,玉米粒8?10份,维生素B10.000031?0.000033份,磷酸氢二钾0.50?0.70份,硫酸镁0.50?0.60份,氯化钙0.60?0.70份,加水定容至1000份,控制pH值为5.5?6.5;(2)培养基灭菌:将培养基分装于三角瓶内,每瓶150?200ml,用棉塞盖上,在110?130℃下用压力为0.1~0.15Mpa的高压蒸汽灭菌25?35min,然后置于24~28℃恒温培养箱培养24h,无菌生长的紫色马勃液体培养基留存备用;(3)接种:将灭菌培养基及接种工具放入超净工作台中,采用紫外灯灭菌30?40min后,在超净工作台中用棉花蘸75%的酒精将紫色马勃子实体整体擦试一遍,然后点燃酒精灯,将接种刀置酒精灯外焰灼烧1s,在酒精灯外焰前上方5?6cm处用灼烧后的接种刀将紫色马勃子实体划成3?4辨,取菌盖与菌柄相接处紫色马勃子实体组织1?1.5份放入无菌生长的紫色马勃液体培养基中;(4)菌种培养:将接种好的培养基置于25?28℃、120?140r/min的菌种培养摇床中培养6~8d,待培养基中长满白色菌丝即可进行下一步的接种栽培。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:贺红早张珍明刘盈盈王莹任春光孙超张玉武
申请(专利权)人:贵州省生物研究所
类型:发明
国别省市:

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