本发明专利技术涉及一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，是将蚕桑生物质自然干燥或热风干燥，粉碎，过筛，备用；灵芝菌株经活化后培养灵芝菌液；按(4-5):(1.0-1.2):(0.8-1.0)的比例分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3溶于18-20倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120℃灭菌20-30min，接种体积比为2-3%的活化灵芝菌液，室温摇床振荡发酵培养2-3天；收集经灵芝菌株发酵的产物，在60℃下热风干燥、粉碎，经处理后，蚕桑生物质的DNJ含量显著提高，大分子物质的含量显著降低，工艺简便，易于工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种利用微生物发酵技术提高蚕桑生物质中1-脱氧野尻霉素含量的方法，属于发酵工艺技术应用领域。
技术介绍
1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)是一种多羟基哌啶生物碱，具有通过抑制α-葡萄糖苷酶活性，进而抑制餐后血糖升高（降血糖）、抗病毒、抗肿瘤等多种生物学活性，在食品、医药等领域中具有重要的应用价值。自然界中含有DNJ的生物如桑树、鸭跖草、风信子、沙参属植物、爵床科植物、链霉菌属及芽孢杆菌属，其中以桑树的含量最为丰富，然而，桑叶中DNJ含量约为0.10%，相对于临床需求仍然偏低，用桑叶加工成的药品或保健品功效不明显；其次，桑树生长期较长，产量易收到季节影响，难以稳定持续地供应市场；而且，桑叶中DNJ的含量受诸多因素影响，如季节、叶位、大气环境和土壤微环境等。因此，限制了以桑树为来源的DNJ在医药、食品上的应用。市场迫切需要一种能够有效提高含生物材料DNJ含量的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的方法，来源易于获得，制备工艺简单。为了达到上述目的，本专利技术实现目的所采用的技术方案如下：一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，包括以下步骤：（1）蚕桑生物质的处理：将蚕桑生物质如桑叶、桑根、桑枝、蚕粪、家蚕幼虫，自然干燥或热风干燥，粉碎，过40目筛，备用；（2）微生物菌株的选择及菌液培养：选用灵芝菌株，经活化后在普通PDA培养液中培养至长满菌丝球，即为灵芝菌液。（3）发酵：按(4-5):(1.0-1.2):(0.8-1.0)的重量比例分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3，溶于18-20倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120℃灭菌20-30min，接种体积比为2-3%的活化灵芝菌液，在25℃-28℃下，100rpm摇床振荡发酵培养2-3天;（4）干燥粉碎：收集经灵芝菌株发酵的产物，在60℃下热风干燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。本专利技术的微生物发酵方法提高蚕桑生物质中DNJ含量的优点和有益效果：1、采用微生物发酵法，将灵芝菌株的菌液加入到蚕桑生物质中，经液体发酵后蚕桑生物质的DNJ含量显著提高，技术工艺简便，易于工业化生产；2、以桑树枝条为原料，或者以桑叶为食的家蚕（具有累积DNJ的作用，研究表明，5龄第3天家蚕幼虫体内DNJ的含量是桑叶中的2.7倍）为原料，易于获得，来源广泛；3、经微生物发酵后蚕桑生物质中大分子物质（如蛋白质、核酸等）或不利于消化物质（生物碱、脂肪等）可进行降解作用，提高其消化吸收率。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术的微生物发酵提高蚕桑生物质中DNJ含量的方法进行进一步具体描述：实施例1一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，包括以下步骤：（1）分别收集以下蚕桑生物质：成熟桑叶、桑根、桑枝、蚕粪、5龄家蚕幼虫，自然干燥或60℃热风干燥，经普通粉碎机粉碎过40目筛。（2）微生物菌株的选择与培养：选用灵芝菌株（中国科学院微生物研究所），经活化后（采用常规微生物活化技术）在普通PDA培养液中培养灵芝菌液，至长满菌丝球，即为灵芝菌液。（3）微生物发酵：按5:1:0.8的重量比分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3溶于20倍体积的水中，混匀，调pH值至6.97，120℃灭菌20min；然后，接种1/50体积的活化灵芝菌液，在26℃下，100rpm摇床振荡发酵培养2-3天。（4）干燥粉碎：收集经灵芝菌株发酵的蚕桑生物质产物，在60℃下热风干燥、粉碎，即得富含DNJ的原料粉。实施例1各种蚕桑生物质经发酵后DNJ含量和大分子物质（如蛋白质、核酸等）含量比较数据见表1：表1 DNJ含量大分子物质桑叶提高20.6%降低28.7%桑根提高9.8%降低8.3%桑枝提高15.3%降低12.5%蚕粪提高40.8%降低51.2%家蚕幼虫提高22%降低30.5%实施例2除了发酵步骤的原料用量不同之外，其余均与实施例1相同：发酵：按5:1.2:1.0的比例分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3，溶于19倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120℃灭菌20-30min，接种体积比为2%的活化灵芝菌液，在25℃-28℃下，100rpm摇床振荡发酵培养2-3天。经处理后，蚕桑生物质的DNJ含量显著提高，大分子物质的含量显著降低。实施例3除了发酵步骤的原料用量不同之外，其余均与实施例1相同：发酵：按4:1.0:0.9的比例分别称取蚕桑生物质、葡萄糖和KNO3，溶于18倍体积的水中，混匀，调pH值至中性，120℃灭菌20-30min，接种体积比为3%的活化灵芝菌液，在25℃-28℃下，100rpm摇床振荡发酵培养2-3天。经处理后，蚕桑生物质的DNJ含量显著提高，大分子物质的含量显著降低。本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种提高蚕桑生物质中DNJ含量的微生物发酵法，包括以下步骤：
（1）蚕桑生物质的处理：将蚕桑生物质自然干燥或热风干燥，粉碎，过40
目筛，备用；
（2）微生物菌株的选择：选用灵芝菌株，经活化后在普通PDA培养液中培
养至长满菌丝球，得到灵芝菌液，备用；
（3）发酵：按(4-5):(1.0-1.2):(0.8-1.0)的重量比分别称取蚕桑生物质、
葡萄糖和KNO3，溶于18...
【专利技术属性】
技术研发人员：桂仲争，贾俊强，蒋运钢，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：
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