利用表面等离子共振传感器检测抗草甘膦CP4-EPSPS蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了利用表面等离子共振传感器检测CP4-EPSPS蛋白的方法。本发明专利技术提供了一种制备用于检测目的蛋白的SPR金片的方法，包括如下步骤：1）用巯基十一酸和3-巯基丙酸共修饰SPR金片，得到修饰后金片；2）将抗目的蛋白抗体固定到所述修饰后金片，得到用于检测所述目的蛋白的SPR金片。本发明专利技术的实验证明，本实验基于抗原抗体特异性结合的原理，依托SPR检测平台，建立了对CP4-EPSPS蛋白的新的检测方法，此方法相比较于常规的蛋白检测方法其优点在于，检测灵敏度高，操作简便、快捷，特异性好，为抗草甘膦作物的检测提供了一种新的可行性方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种利用表面等离子共振传感器检测抗草甘膦CP4-EPSPS蛋白的方法。
技术介绍
草甘膦是由美国孟山都公司于20世纪70年代开发的除草剂产品，是一种非选择性、无残留灭生性除草剂，对多年生根杂草非常有效，广泛应用于农业生产当中，是目前全世界使用量最大的除草剂品种之一。据美国环境保护协会估计，2007年全球草甘膦使用量约为82000-84000吨。中国自上世纪八十年代起开始生产草甘膦，现已成为仅次于美国的世界第二大草甘膦生产和出口国。草甘膦的作用机理主要是竞争性抑制莽草酸途径中5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)的活性，导致分支酸合成受阻，阻断芳香族氨基酸和一些芳香化合物的生物合成，从而扰乱了生物体正常的氮代谢而使其死亡。但由于草甘膦的非选择性，使其对农作物同样有着杀伤性，这就限制了其使用范围和使用时间。而抗草甘膦基因是编码抗草甘膦酶5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶的基因，通过该酶的作用，可以阻断草甘膦对生物合成途径的干扰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备用于检测目的蛋白的SPR金片的方法，包括如下步骤：1）用巯基十一酸和3‑巯基丙酸共修饰SPR金片，得到修饰后金片；2）将抗目的蛋白抗体固定到所述修饰后金片，得到用于检测所述目的蛋白的SPR金片。

【技术特征摘要】
1.一种制备用于检测目的蛋白的SPR金片的方法，包括如下步骤：
1）用巯基十一酸和3-巯基丙酸共修饰SPR金片，得到修饰后金片；
2）将抗目的蛋白抗体固定到所述修饰后金片，得到用于检测所述目的蛋白的SPR
金片。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
步骤1）中，所述巯基十一酸和3-巯基丙酸共修饰SPR金片按照如下方法制备：
将所述SPR金片浸泡在含有巯基十一酸和3-巯基丙酸的乙醇溶液中。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
步骤1）中，所述含有巯基十一酸和3-巯基丙酸的乙醇溶液中，所述巯基十一酸
和所述3-巯基丙酸的摩尔比为1:1。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：
所述巯基十一酸在所述溶液中的终浓度为10mM；
所述3-巯基丙酸在所述溶液中的终浓度为10mM。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄新，杜方，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11