本发明专利技术涉及一种超声提取款冬花中总黄酮的方法，包括以下步骤：（1）款冬花的处理，将款冬花在90℃的恒温干燥箱中烘12小时，粉碎，过20目筛；（2）提取，将步骤（1）处理好的款冬花与乙醇溶液按液料比（mL/g）为20:1～30:1进行混合，乙醇溶液中乙醇的体积分数为30%～70%，超声功率为350W～500W，超声提取时间为30～45分钟，得到总黄酮提取液。通过响应面法对超声功率、超声波提取时间、料液比进行优化，得到超声提取款冬花总黄酮的最佳的提取工艺，该工艺下总黄酮实际测定提取率为6.57%，此提取条件准确可靠，提取率较高，具有方便、简单、快速、安全等优点，为款冬花有效成分的提取和开发利用提供了相应的参考数据，具有实际使用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及的是一种植物总黄酮提取技术和方法，具体地，本专利技术涉及一种超声提取款冬花中总黄酮的方法。
技术介绍
中药款冬花为菊科植物款冬(Tussilago farfara)的干燥花蕾，又名冬茬、九九花、西冬花等，始载于《神农本草经》，为常用中药材之一，主产于我国山西、陕西和甘肃等地。款冬花味辛、甘、性温，具有润肺止咳、化痰平喘之功效。研究表明,款冬花镇咳、祛痰、平喘等药理活性与其中含量较高的黄酮类成分有关。从文献调研发现，对款冬花的研究多集中于生理药理作用和化学成分方面，而对其活性成分黄酮类物质的提取及纯化工艺方面的报道较少。郑州大学的丁彩丽，对款冬花中黄酮类化合物的提取及纯化工艺进行的研究，比较了不同溶剂对款冬花黄酮提取率的影响，结果表明乙醇为性能良好的提取剂；研究了索氏提取法、回流提取法、超声辅助提取法、闪式提取法四种不同提取方法对款冬花总黄酮的提取效果；研究了乙醇浓度、提取时间、提取温度、提取次数对款冬花总黄酮回流提取工艺的影响，并结合L9(34)正交试验法，优化回流提取工艺；该回流提取工艺简单易行，为工业化生产提供依据。响应面分析法(Response Surface methodology，RSM)是优化工艺参数的一种有效统计方法，采用多元回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系，分析因素间的交互作用，进而确定最优工艺参数。响应面分析法因其设计合理、试验次数少和试验时间短，已被逐渐关注并应用于工艺优化中。但是，各种提取方法中，对于超声提取工艺及其利用响应面法优化的研究较少。
技术实现思路
针对现有技术中有关响应面法优化超声提取款冬花中总黄酮的工艺及方法的研究的不足，本专利技术的目的是对款冬花中的黄酮类化合物进行系统研究，利用响应面法（RSM）优化款冬花总黄酮的超声提取工艺；研究款冬花中总黄酮提取率的影响因素，在单因素试验的基础上，选择超声功率、超声时间、液料比为自变量，总黄酮提取量为响应值，采用Box-Behnken中心组合试验设计和响应面(RSM)分析法建立影响因素的二次回归模型，通过对二次回归模型求解编码转换，研究各自变量交互作用及其对黄酮类化合物提取量的影响，提供一种工艺简单、提取率较高的超声提取方法，响应面法结果准确，分析方便，为款冬花中总黄酮的提取工艺优化提供了理论支持，为使款冬花更好的应用于医药、食品、化妆品等领域提供理论基础。为实现上述目的，本专利技术采用以下方案：一种超声提取款冬花中总黄酮的方法，包括以下步骤：（1）款冬花的处理将款冬花在90℃的恒温干燥箱中烘12小时，粉碎，过20目筛；（2）提取将步骤（1）处理好的款冬花与乙醇溶液按液料比（mL/g）为20:1～30:1进行混合，乙醇溶液中乙醇的体积分数为70%，超声功率为350W～500W，超声提取时间为30～45分钟，得到总黄酮提取液。优选地，所述步骤（2）中，款冬花与乙醇溶液按液料比（mL/g）为25:1进行混合；优选地，所述步骤（2）中，超声功率为420W；优选地，所述步骤（2）中，超声提取时间为35分钟；优选地，所述步骤（2）中，款冬花与乙醇溶液按液料比（mL/g）为27:1进行混合，提取功率426W，提取时间30min。本专利技术以款冬花为原料，应用超声波技术辅助提取黄酮类化合物，通过响应面法对超声功率、超声波提取时间、料液比进行优化，得到超声提取款冬花总黄酮的最佳的提取工艺，该工艺下总黄酮实际测定提取率为6.57%，预测结果和实验基本吻合。此提取条件准确可靠，并且提取率较高，克服了传统的总黄酮提取方法时间长、成本高、效率低的缺点，超声法提取款冬花中总黄酮具有方便、简单、快速、安全等优点，为款冬花有效成分的提取和开发利用提供了相应的参考数据，具有实际使用价值。附图说明图1为芦丁标准工作曲线图；图2为超声功率对款冬花总黄酮提取率的影响；图3为乙醇体积分数对款冬花总黄酮提取率的影响；图4为超声提取时间对款冬花总黄酮提取率的影响；图5为液料比对款冬花总黄酮提取率的影响；图6为超声功率和超声时间对款冬花总黄酮提取率的影响响应面图；图7为超声功率和超声时间对款冬花总黄酮提取率的影响等高线图；图8为超声功率和液料比对款冬花总黄酮提取率的影响响应面图；图9为超声功率和液料比对款冬花黄酮提取率的影响等高线图；图10为超声时间和液料比对款冬花总黄酮提取率的影响响应面图；图11超声时间和液料比对款冬花黄酮提取率的影响等高线图。具体实施方式下面通过具体实例对本专利技术进行进一步的阐述，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本专利技术，并不对其内容进行限定。实施例1：（1）款冬花的处理将款冬花置于90℃恒温干燥箱内，烘干12小时，然后用药材粉碎机进行粉碎，过20目筛，备用；（2）提取将步骤（1）处理好的款冬花与乙醇溶液按液料比（mL/g）为27:1进行混合，乙醇溶液中乙醇的体积分数为70%，超声功率为426W，超声提取时间为30分钟，得到总黄酮提取液。下面通过单因素试验法和响应面法，以总黄酮提取率为指标，考察液料比、乙醇体积分数、超声功率和超声提取时间对款冬花中总黄酮提取率的影响，以选取优化的总黄酮提取工艺条件。1材料与仪器1.1材料款冬花：购自泰安市永春堂药店；芦丁标准品：购自中国药品生物制品检定所，纯度≥98%；95%乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯；1.2仪器超声波清洗仪：型号 KQ-800KDB，生产厂家 昆山舒美超声仪器有限公司；恒温干燥箱：型号 DHG-9240，生产厂家 上海精宏实验设备有限公司；紫外分光光度计：型号 752S，生产厂家 上海棱光技术有限公司。2方法与结果2.1芦丁标准曲线的绘制精密称取已在120℃干燥至恒重的芦丁标准品2.5mg，用70%乙醇溶解后移至10ml棕色容量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，得浓度为0.250mg/ml的芦丁标准品溶液。精密吸取不同体积的芦丁标准品溶液，分别置于25ml，摇匀，放置6min，加入4%氢氧化钠溶液7.50ml，用70%乙醇定容到刻度，摇匀，制成浓度分别为0.020mg/ml、0.030mg/m、0.040mg/ml、0.050mg/ml、0.060mg/ml的芦丁标准品溶液，放置10min后在510nm波长处测定吸光度，以吸光度A为横坐标，浓度C为纵坐标作图，得图1，并进行线性回归，得回归方本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种超声提取款冬花中总黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）款冬花的处理将款冬花干燥，粉碎，过筛；（2）提取将步骤（1）处理好的款冬花与体积分数为70%乙醇溶液按液料比为20:1～30:1进行混合，液料比的单位为mL/g，超声功率为350W～500W，超声提取时间为30～45分钟，得到总黄酮提取液。
【技术特征摘要】
1.一种超声提取款冬花中总黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）款冬花的处理
将款冬花干燥，粉碎，过筛；
（2）提取
将步骤（1）处理好的款冬花与体积分数为70%乙醇溶液按液料比为20:1～30:1进行混
合，液料比的单位为mL/g，超声功率为350W～500W，超声提取时间为30～45分钟，得到总
黄酮提取液。
2.如权利要求1所述的一种超声提取款冬花中总黄酮的方法，其特征在于，所述步骤（1）
中，款冬花在90℃的恒温干燥箱中烘12小时，粉碎，过20目筛。
3.如权利要求1所述的一...
【专利技术属性】
技术研发人员：秦坤，刘彩红，孟宪锋，
申请(专利权)人：泰山医学院，
类型：发明
国别省市：山东;37
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