本发明专利技术涉及一种高效液相色谱法检测多抗霉素B的方法，采用如下色谱条件：色谱柱：以嵌入极性基团的烷基硅烷键合硅胶为固定相；流动相：有机相-水相；流速：0.5-1.5mL/min；检测波长：240-290nm；柱温：10-40℃；进样量：5-20μL；检测器采用紫外检测器或二极管阵列检测器。与现有技术中的生测法、HPLC法相比，本发明专利技术通过所述色谱柱与所述流动相的配合使用，取得了很好的分离度良好，准确度高，通过本检测方法使多抗霉素B与结构相似的同系物达到很好的分离，提高了多抗霉素B检测的准确度；该检测方法的运行时间短；多抗霉素B主峰出峰时间在8min。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种高效液相色谱法检测多抗霉素B的方法，采用如下色谱条件：色谱柱：以嵌入极性基团的烷基硅烷键合硅胶为固定相；流动相：有机相-水相；流速：0.5-1.5mL/min；检测波长：240-290nm；柱温：10-40℃；进样量：5-20μL；检测器采用紫外检测器或二极管阵列检测器。与现有技术中的生测法、HPLC法相比，本专利技术通过所述色谱柱与所述流动相的配合使用，取得了很好的分离度良好，准确度高，通过本检测方法使多抗霉素B与结构相似的同系物达到很好的分离，提高了多抗霉素B检测的准确度；该检测方法的运行时间短；多抗霉素B主峰出峰时间在8min。【专利说明】一种高效液相色谱法检测多抗霉素B的方法
本专利技术属于农药检测分析
，具体涉及一种多抗霉素B的高效液相色谱检测方法。
技术介绍
多抗霉素又叫多氧霉素，在日本是从可可链霉菌素阿索变种(S.cacaoi var.asoensis)中分离到一种核苷类抗生素。而在我国是金色产色链霉菌(S.aureachromogenes 4896)的代谢产物。多抗霉素是由A至N共14种不同的同系物组成的混合物，主要活性成分为多抗霉素B，属于多氧嘧啶核苷类农用抗生素类杀菌剂，能有效地抑制真菌细胞壁骨架成分——几丁质的合成，使菌体细胞壁不能进行生物合成导致病菌死亡。多抗霉素B是一种高效、低毒、无环境污染的安全农药，所以被广泛用于苹果斑点落叶病、烟草赤星病、三七黑斑病等病害的防治。目前关于多抗霉素B检测方法的报道有生测法、HPLC法。如中国专利申请200810039564.0多氧霉素B的定量分析检测方法，报道了多氧霉素B的牛津杯生物测定法，该检测方法缺点:可靠性差，检测时间较长。如《化学分析计量》1999第8卷第3期的《用液相色谱二极管阵列检测器测定多氧霉素B》公开了一种检测多氧霉素B的HPLC方法，色谱条件:色谱柱:YWG-CN，250mmX4.5mm,粒径5 μ m,检测波长:270nm,流速:0.8mL/min,流动相:pH=4乙酸铵缓冲溶液。如《农药》2008年第47卷第3期的《多抗霉素B的高效液相色谱分析方法》公开了一种多抗霉素B的HPLC方法，色谱条件:色谱柱:Kromasil C18不锈钢色谱柱，250mmX4.6 mm (5 μ m),检测波长262 nm,流速:0.6 mL/min,柱温:30°C，进样量5 μ L，流动相:甲醇-水(用磷酸调ρΗ=4.0)(体积比 10:90)。多抗霉素B与多抗霉素同系物结构相似，在HPLC检测中，容易受到某些同系物的干扰。在现有HPLC检测方法中，多抗霉素B和某些同系物之间不能达到较好的分离，影响分析的准确性。因此，本领域迫切需要一种分离度良好，运行时间短的检测多抗霉素B的方法。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术旨在提供一种准确、快速的高效液相色谱法检测多抗霉素B的方法，实现多抗霉素B与其他同系物的分离，从而达到产品质量的控制。本专利技术提供的高效液相色谱法检测多抗霉素B的方法，采用如下色谱条件: 色谱柱:以嵌入极性基团的烷基硅烷键合硅胶为固定相； 流动相:有机 相-水相；流速:0.5 -1.5 mL/min,优选 1.0 mL/min ； 检测波长:240-290nm，优选260nm ； 柱温:10-40°C，优选 25°C ； 进样量:5-20 μ L，优选10 μ L ; 检测器:紫外检测器或二极管阵列检测器。在本专利技术的优选的实施方案中，上述以嵌入极性基团的烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱，优选以嵌入极性基团的十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱。在本专利技术的优选的实施方案中，所述流动相中的有机相选自甲醇、乙腈。在本专利技术的优选的实施方案中，所述流动相中的水相含有三氟乙酸，三氟乙酸的浓度范围为0.05%-0.13% (以重量百分比计)，优选0.1%。在本专利技术的优选的实施方案中，所述流动相中有机相-水相的体积比例为O:100-3:94，优选 0:100。在本专利技术的优选的实施方案中，所述的色谱柱和流动相配合使用。本专利技术还提供一种高效液相色谱法检测多抗霉素B的方法，通过以下步骤实现: (O称取含适量多抗霉素B的标品，于50mL容量瓶中，用纯水溶解、定容、摇匀，过0.45 μ m滤膜，备供试标品溶液用。(2)称取含适量多抗霉素B的样品，于50mL容量瓶中，用纯水溶解、定容、摇匀，过0.45 μ m滤膜，备供试样品溶液用。(3)取供试标品和样品溶液，注入高效液相色谱仪，按照上述条件进行高效液相色谱分析。与现有技术中的生测法、HPLC法相比，本专利技术通过所述色谱柱与所述流动相的配合使用，分离度良好，准确度高，通过本检测方法使多抗霉素B与结构相似的同系物达到很好的分离，提高了多抗霉素B检测的准确度；该检测方法的运行时间短；多抗霉素B主峰出峰时间在8min。【专利附图】【附图说明】下面结合附图对本专利技术进一步说明: 图1:按照实施例1条件分离的多抗霉素B样品高效液相色谱图； 图2:按照实施例2条件分离的多抗霉素B样品高效液相色谱图； 图3:按照实施例3条件分离的多抗霉素B样品高效液相色谱图。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术做进一步详细说明，但本专利技术并不仅仅局限于下述实施例。实施例1 试验仪器和条件: Waters 1525高效液相色谱仪，Waters 2487紫外检测器； 色谱柱:嵌入极性基团的C18 (250 X 4.6mm，5 μ m)； 流动相:0.1%三氟乙酸水溶液； 流速:1.0 mL/min ； 检测波长:260nm ； 柱温:25°C ； 进样量:10 μ L。试验步骤: 称取含0.02g多抗霉素B标品，于50mL容量瓶中，用纯水溶解、定容、摇匀，过0.45 μ m滤膜，备供试标品溶液用。称取含0.02g多抗霉素B样品，于50mL容量瓶中，用纯水溶解、定容、摇匀，过0.45 μ m滤膜，备供试样品溶液用。取上述供试标品和样品溶液，注入高效液相色谱仪，按照上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见图1，多抗霉素B主峰出峰时间为8.97min。实施例2 试验仪器和条件: Waters 1525高效液相色谱仪，Waters 2487紫外检测器； 色谱柱:嵌入极性基团的C18 (250 X 4.6mm，5 μ m)； 流动相:0.05%三氟乙酸水溶液； 流速:0.8 mL/min ； 检测波长:260nm ； 柱温:25°C ； 进样量:10yL ; 试验步骤: 称取含0.02g多抗霉素B标品，于50mL容量瓶中，用纯水溶解、定容、摇匀，过0.45 μ m滤膜，备供试标品溶液用。称取含0.02g多抗霉素B样品，于50mL容量瓶中，用纯水溶解、定容、摇匀，过0.45 μ m滤膜，备供试样品溶液用。取上述供试样品溶液，注入高效液相色谱仪，按照上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见图2，多抗霉素B主峰出峰时间为8.92min。实施例3 试验仪器和条件: Waters 1525高效液相色谱仪，Waters 2487紫外检测器； 色谱柱:嵌入极性基团的C18 (250 X 4.6m本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：颜瑞莉，杨宏勃，李蒲民，
申请(专利权)人：陕西绿盾生物制品有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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