冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程中冠心病相关基因相关技术领域，涉及一种冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用，该基因的核苷酸序列具有SEQIDNO:1所示的序列。本发明专利技术对冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用做了详细介绍，该体外检测冠心病相关基因的试剂盒除了可以用于体外检测冠心病相关基因的多态性外，还可以用于检测、预防、诊断或治疗冠心病，从而降低冠心病的发生率，对预防和治疗冠心病具有重大的意义。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属于生物工程中冠心病相关基因相关
，涉及一种冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用，该基因的核苷酸序列具有SEQIDNO:1所示的序列。本专利技术对冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用做了详细介绍，该体外检测冠心病相关基因的试剂盒除了可以用于体外检测冠心病相关基因的多态性外，还可以用于检测、预防、诊断或治疗冠心病，从而降低冠心病的发生率，对预防和治疗冠心病具有重大的意义。【专利说明】冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用
本专利技术属于生物工程中冠心病相关基因相关
，涉及一种冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用。
技术介绍
流行病学与临床研究表明，冠心病(coronary artery disease)是发达国家和大多数发展中国家成年人发病和死亡的主要原因。冠心病患病率和死亡率呈逐年增高的趋势已引起全球性关注。许多发展中国家，随着物质条件的富裕和生活方式的西方化，预计到21世纪20年代冠心病可能成为全球排名第一名的疾病。自上世纪60年代Frmainghma的研究结果公布以来，人们对冠心病的认识也有了很大的提高，已经认识到冠心病不只是一种单因素疾病，而是由多种内源性及外源性因素共同决定的复杂性疾病，除了高血压，糖尿病，吸烟，代谢综合征等环境因素外，遗传因素在冠心病发生发展过程中的作用也得到了逐步的更进一步的认识及得到了一定程度的重视在冠心病发生发展中遗传因素约占40%至60%。胶原蛋白(collagen)是一种具有独特结构的,细胞外基质的一种结构蛋白，广泛存在于哺乳类动物组织中，约占总蛋白质的30%以上。胶原蛋白的种类较多，目前发现的种类至少有25种，其中结构与功能比较清楚的类型为I型、II型、III型、IV型，V型。不同类型胶原在体内的分布不同，I型胶原主要分布在筋腱、骨骼、牙齿和各种软组织器官中；II型胶原主要分布于透明软骨和弹性软骨中；III型胶原分布在各种软组织脏器内，与I型胶原分布大致相同；IV型胶原分布在各组织器官基底膜基膜内；V型胶原分布在细胞外周。IV型胶原首次于1966年被Kefalides等人从肾小球基底膜中分离出来的，是基底膜的主要结构成分，约占基底膜成分的50%左右。IV型胶原的结构较特殊，由(α 1-α 6)六条链组成，编码这六条α链的基因以头对头的方式成对的位于3条不同的染色体上。这六条α链以a 1.a 1.α 2，α 3.α 4.α 4，α 5.α 5.α 6的方式构成异源三聚体,每一条α链均包含3个结构域:Ν端的7S结构域；中间的三螺旋胶原结构域，此区域含有重复的甘氨基-X -Y序列(XY —般为脯氨酸和羟脯氨酸或赖氨酸和羟赖氨酸)，此重复序列在胶原形成螺旋过程中起重要作用；C末端的非胶原结构域(NC1)，NCl富含半胱氨酸和赖氨酸。Rodriguez等发现，与IV型胶原蛋白异常有关的疾病主要是由于该蛋白质胶原结构域中甘氨酸的突变有关，可能的致病机理有以下几个:甘氨酸是分子量最小的一种氨基酸，是唯一一个能够进入IV型胶原三螺旋结构中心的氨基酸，甘氨酸突变可影响三螺旋结构的形成或者IV型胶原的分泌，从而影响基底膜结构的稳定性，另外甘氨酸的突变使三螺旋区的CB3区结构发生变化，隐藏的整合素蛋白结合位点暴露，使IV型胶原蛋白降解或变性，甚至这些位点的抗体可能会抑制血管新生。在脉管系统中，IV型胶原分布于动脉壁中层的血管平滑肌细胞周围，是血管壁基底膜的主要成分。公所周知，血管壁的完整性和稳定性对于心血管系统来说至关重要，这种完整性及稳定性是通过血管壁基底膜、内皮细胞和周围平滑肌细胞等之间相互协调而获得的，如果这种协调作用由于某些原因受到破坏，会影响脉管系统，结果导致出血，水肿，炎症和组织缺血等严重后果，而这些都是冠心病发生发展的基础。除此之外，IV型胶原还对细胞的迁移、增殖、分化起重要作用。IV型胶原蛋白基因α I (C0L4A1)，基因位于13q34，mRNA全长6549bp，编码IV型胶原α?链，包含52个外显子。C0L4A1基因是近期在一项有关冠心病的全基因组关联研究(GWAS)中发现的新基因，认为遗传多态性与冠心病之间存在关联。此外，Y Yamada等人首次研究表明，C0L4A1基因的多态性与心肌梗死的发生有关。近年来对于C0L4A1基因多态性及编码蛋白质在心血管系统发生发展过程中的作用逐渐引起了人们关注。临床上该蛋白质有可能被优先应用于冠心病患病风险的预测指标。
技术实现思路
本专利技术提供了一种冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有技术在预防和治疗冠心病时效果不理想的问题。本专利技术的技术方案之一是通过以下措施来实现的:一种冠心病相关基因即C0L4A1基因，该基因的核苷酸序列具有SEQ ID NO:1所示的序列。本专利技术的技术方案之二是通过以下措施来实现的:一种体外检测根据权利要求1所述的冠心病相关基因的试剂，该试剂用于检测C0L4A1基因rs605143位点的多态性，该试剂包括如下引物: 上游引物:5’AAAGCCATTGCTACCTCA3’ 下游引物:5’ CTGCTCCTGGTGACTCTG3’ 下面是对上述专利技术技术方案之二的进一步优化或/和改进: 上述试剂可为用于聚合酶链式反应与限制性片段长度多态性分析相结合的试剂或用于聚合酶链式反应与直接测序法相结合的试剂。本专利技术的技术方案之三是通过以下措施来实现的:一种有体外检测冠心病相关基因的试剂的制剂或试剂盒，该试剂盒包含PCR扩增酶及相应缓冲液。本专利技术的技术方案之四是通过以下措施来实现的:一种体外检测冠心病相关基因的试剂在制备用于体外检测冠心病相关基因的制剂或试剂盒中的应用。下面是对上述专利技术技术方案之四的进一步优化或/和改进: 上述试剂盒中可包含PCR扩增酶及相应缓冲液。本专利技术对冠心病相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用做了详细介绍，该体外检测冠心病相关基因的试剂盒除了可以用于体外检测冠心病相关基因的多态性外，还可以用于检测、预防、诊断或治疗冠心病，从而降低冠心病的发生率，对预防和治疗冠心病具有重大的意义。【专利附图】【附图说明】图1为本专利技术中冠心病相关基因序列变异的筛查流程示意图。图2为本专利技术的部分测序图谱。图3为本专利技术的rs605143多态性位点的酶切图谱。 其中如泳道I和2显示待测个体rs605143位点的基因型为G/G纯合子；泳道3，4，6和7显示待测个体的rs605143位点为Α/G杂合子；泳道5显示待测个体的rs605143位点为A/A纯合子。【具体实施方式】为了更清楚地理解本专利技术，现参照下列实施例及附图进一步描述本专利技术，实施例仅用于解释而不以任何方式限制本专利技术。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行:如Sambrook等人所著的《分子克隆:实验手册》(New fork: Cold SpringHarbor Laboratory Press, 1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。实施例1，一种冠心病相关基因即C0L4A1基因，该基因的核苷酸序列具有SEQ IDNO:1所示的序列。含有C0L4A1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冠心病相关基因即COL4A1基因，其特征在于该基因的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:?1所示的序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马依彤，迪拉热·阿迪，谢翔，杨毅宁，向阳，付真彦，李晓梅，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：