甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物制造技术

本发明专利技术涉及甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物，其涉及通式（I）所示的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐、其制备方法，及其在制备治疗以缺乏红细胞生成素或红细胞群缺少或缺陷为特征的疾病的药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物
本专利技术涉及一种能够和促红细胞生成素受体结合并激活促红细胞生成素受体或者能起促红细胞生成素激动作用的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物，具体地说，本专利技术涉及促红细胞生成素模拟肽衍生物的修饰用的活性甲氧基聚乙二醇的选择，即通过对比不同分子量或不同结构的活性甲氧基聚乙二醇修饰的红细胞生成素模拟肽的生物学活性和稳定性等因素，选择特定结构的活性甲氧基聚乙二醇来修饰红细胞生成素模拟肽。
技术介绍
聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)是一种pH中性、无毒、水溶性较高的亲水聚合物，其重复单元为氧乙烯基，端基为两个羟基，呈线性或支化链状结构。PEG聚合物是迄今为止已知聚合物中蛋白和细胞吸收水平最低的聚合物，由于PEG无毒及良好的生物相容性，PEG已被FDA批准可作为体内注射药用聚合物。药物的PEG修饰是将活化的PEG通过化学方法偶联到药物上的过程，即PEG化(PEGylation)。PEG最早用于药物修饰，是1977年Abuchowsk等用PEG来修饰牛血清蛋白，发现可以有效地改变其免疫性质。随后研究者采用PEG修饰抗癌药物天门冬酰胺酶，并将其应用于临床。除此之外，研究者还成功地将PEG应用于酰苷脱氨酶、干扰素等蛋白质药物、喜树碱、紫杉醇、阿糖胞苷、灯盏乙素等小分子药物的修饰。由于PEG修饰后的药物分子量增加，超出肾脏过滤的分子量范围，从而可以有效地延长药物的半衰期，增强药物的稳定性；PEG修饰后的药物水溶性一般均增加，药物通过改变分子结构从而改进了药物动力学和药效等性质，提高了作用部位的血药浓度。PEG修饰后的药物与修饰前相比，具有突出的优势:(I)药物的溶解性提高；(2)半衰期延长；(3)最大血药浓度降低，血药浓度波动较小；(4)酶降解作用减少，免疫原性和抗原性减少；(5)毒性降低。促红细胞生成素(e`rythropoietin, ΕΡ0)是一种糖蛋白激素，分子量约34kD。促红细胞生成素是最早应用于临床的细胞因子，是迄今所知作用最单一、且安全可靠的升血红蛋白制剂。对于肾贫血、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤及阵发性夜间血尿等均有一定疗效；此外，应用促红细胞生成素还可减少手术中的输血量，并能在一定程度上纠正由恶性肿瘤、化疗及类风湿性关节炎引起的贫血。由于促红细胞生成素主要由肾小管内皮细胞产生，肾性疾患引起的贫血是促红细胞生成素的首选适应证；促红细胞生成素纠正肾性贫血的疗效几乎100%，但并不能改善肾功能。促红细胞生成素的治疗安全、有效，适合长期治疗，也能避免血源紧张。在2006年的全球生物技术药市场上，促红细胞生成素类的重组药物占了119亿美元，有巨大的市场容量。早在1989年，美国FDA就正式批准重组人促红素(EPOGEN)用于肾性贫血的治疗，但直到1992年才在我国上市。我国慢性肾炎的年发病率约为0.25%，其中相当一部分患者最终会转为肾衰，每年的肾性贫血患者约50-60万。根据保守的用药量估算，如果按当前的价格30-40元/支，加上癌症相关性贫血等其他病人的用药，国内市场容量约12-16亿元甚至更大(病人平均体重按50Kg计算)。自20世纪90年代后期，促红细胞生成素已进入我国重点城市医院畅销药品行列，2003年在全国重点城市样本医院用药金额6213万元，排名第56位。2004年，全国重点城市样本医院购药金额增长到8049万元，同比增长了 30%。促红细胞生成素的部分生物学效应可以通过和细胞膜表面的受体内在作用来调节。起先，使用从小鼠的脾脏里分离出的未成熟的红细胞来研究细胞表面结合的促红细胞生成素蛋白时发现，这种蛋白是由两种多聚肽组成，其分子量大约为85000~100000KD(Sawyer, et al.(1987)Proc.Natl.Acad.Sc1.USA84:3690-3694)有比较详细的叙述。随后的工作就是两种促红细胞生成素受体被单个基因翻录，这个基因已经被克隆。目前的模型表明促红细胞生成素结合到促红细胞生成素受体导致了两个促红细胞生成素受体的活化和二聚，这种二聚进一步导致了信号传导的开始。促红细胞生成素克隆基因的应用更有助于帮助寻找这些重要受体的激动剂和拮抗剂。某种程度上能够作用促红细胞生成素受体的肽已经被确定和叙述。特别是确定了一组含有主要肽段的肽，这些肽可以和促红细胞生成素受体结合并能刺激促红细胞生成素细胞的分化增殖。但是能够刺激红细胞增殖分化的肽的EC50却很低，半衰期短，因此这些肽在临床应用上受到了较大的限制。通过采用聚乙二醇修饰，可以改造多肽的生理应用，使其具有增长的生理半衰期，降低的毒副作用，从而获得更好的治疗效果。本专利技术提供了一种生物活性更好，生物利用度更高的促红细胞生成素模拟肽衍生物以及它们的制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种通式为(I)的具有体内生物活性的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物，本文档来自技高网...

【技术保护点】
式（I）所示的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐：其中所述mPEG是分枝型或直链型的甲氧基聚乙二醇，分子量为20,000～40,000道尔顿，各分枝以甘油为接头。FDA00001906520200011.jpg

【技术特征摘要】
1.式(I)所示的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐: 2.根据权利要求1所述的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐，其中所述分枝型mPEG的分子量在各分枝上平均分配。3.根据权利要求1所述的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐，其中所述分枝型mPEG的分子量在各分枝上不平均分配。4.根据权利要求2所述的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐，其具有式(II )所示结构: 5.一种制备权利要求1~4任一项所述的甲氧基聚乙二醇修饰的促红细胞生成素模拟肽衍生物及其可药用盐的方法，包括以下步骤: (1)合成肽链部分； (2)合成式(III)所示功能小分子 R7-CO-(CH2)nl-Z2-(CH2)n2-CO-R8 (III)； 其中!^、!^各自独立地选自O~10 ; R7、R8选自OH或H ;Z2 选自 O、S、CH2、N(CH2)n6NHR9' NCO (CH2)n7NHR9, CHOCONH(CH2)n8NH...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴文涛，王瑞军，孙长安，吕爱锋，
申请(专利权)人：江苏豪森药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：