S-扁桃酸脱氢酶与漆酶偶联反应制备苯乙酮酸和R-扁桃酸的方法技术

技术编号:8677956 阅读:255 留言:0更新日期:2013-05-08 22:22
本发明专利技术提供一种S-扁桃酸脱氢酶和漆酶偶联催化S-扁桃酸转化成苯乙酮酸和R-扁桃酸的方法,该方法特别之处是通过漆酶不断再生反应媒介,进而不断再生S-扁桃酸脱氢酶的辅酶FMN,从而将S-扁桃酸脱氢酶和漆酶偶联起来进行催化反应,这样,只需要少量的反应媒介,通过充分利用酶催化的高效性,不断催化氧化S-扁桃酸,提高了单一使用S-扁桃酸脱氢酶的转化效率,降低了反应成本。本发明专利技术用S-扁桃酸脱氢酶和漆酶两种酶偶联催化S-扁桃酸转化为苯乙酮酸,产物R-扁桃酸的对映体过量值可达99.8%。该法只需少量的亚铁氰化物或铁氰化物作为反应媒介,工艺简单、成本低、环境压力小、纯度高,便于工业化生产,对外消旋扁桃酸的手性拆分具有很大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种通过铁氰化物或亚铁氰化物作为偶联剂将两种酶偶联催化S-扁桃酸生成苯乙酮酸的方法,同时实现外消旋扁桃酸手性拆分,具体涉及S-扁桃酸脱氢酶和漆酶的偶联反应。
技术介绍
S-扁桃酸脱氢酶是一类以黄素FMN为辅酶的氧化还原酶,能专一性催化氧化S-扁桃酸生成苯乙酮酸,其辅酶FMN还原为FMNH2。铁氰化物可以氧化FMNH2生成FMN和亚铁氰化物。漆酶是一类包含铜离子的酚氧化酶,其利用氧气将底物氧化,而氧气被还原成水,而且漆酶具有底物催化范围广的特点,可以催化亚铁氰化物氧化为铁氰化物。国外DietmarHaltrich等人曾用纤维二糖脱氢酶和漆酶偶联生产乳糖酸,但缺乏铁氰化物作为化学媒介的实验数据。我们以铁氰化物作为反应媒介,偶联漆酶和S-扁桃酸脱氢酶催化的酶反应,进行苯乙酮酸的制备以及外消旋扁桃酸的手性拆分,生产手性扁桃酸,产物R-扁桃酸的对映体过量值可达99.8 %。
技术实现思路
本 专利技术的目的是以亚铁氰化物或铁氰化物作为反应媒介,通过漆酶再生辅因子,实现S-扁桃酸脱氢酶和漆酶偶联催化S-扁桃酸转化成苯乙酮酸。其反应历程如下:

【技术保护点】
一种S?扁桃酸脱氢酶与漆酶偶联反应制备苯乙酮酸和R?扁桃酸的方法,其特征在于所述制备步骤如下:步骤1、将0.1~1?mmol/L亚铁氰化物或铁氰化物用pH为3~8的缓冲液溶解后放在容器中;步骤2、加入1~100?mmol/L外消旋扁桃酸,添加10~500活力单位的S?扁桃酸脱氢酶和10~500活力单位的漆酶后,在10~45℃反应。

【技术特征摘要】
1.一种s-扁桃酸脱氢酶与漆酶偶联反应制备苯乙酮酸和R-扁桃酸的方法,其特征在于所述制备步骤如下: 步骤1、将0.ri mmol/L亚铁氰化物或铁氰化物用pH为:T8的缓冲液溶解后放在容器中; 步骤2、加入1 100 mmol/L外消旋扁桃酸,添加10飞00活力单位的S-扁桃酸脱氢酶和10^500活力单位的漆酶后,在1(T45°C反应。2.根据权利要求1所述的S-扁桃酸脱氢酶与漆酶偶联反应制备苯乙酮酸和R-扁桃酸的方法,其特征在于步骤I中所述的缓冲液为NaH2PO4-柠檬酸缓冲液或Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液。3.根据权利要求1所述的S-扁桃酸脱氢酶与漆酶偶联反应制备苯乙酮酸和R-扁桃酸的方法,其特征在于步骤I中所述的亚铁氰化物为亚铁氰化钾或亚铁氰化钠。4.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员:李大力王鹏杨军方杨成丽
申请(专利权)人:南京理工大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1