一种卷曲乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种卷曲乳杆菌及其应用，所述卷曲乳杆菌在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC?No.6406。所述卷曲乳杆菌具有高耐酸性、高产过氧化氢特性和抑制阴道致病菌生长的作用，还涉及卷曲乳杆菌LCR15在调节阴道菌群、预防和治疗阴道炎方面的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种乳杆菌属的新菌株及其应用，更准确地说，本专利技术描述了卷曲乳杆菌Hactobacillus crispatus)的一个新菌株LCR15,及其高耐酸性、高产过氧化氢特性、对阴道致病菌的抑菌作用和预防与治疗阴道炎的功能。
技术介绍
健康妇女阴道内存在多种微生物，它们与宿主、环境之间构成了相互制约、相互协调、动态平衡的阴道微生态系统。健康妇女的阴道菌群主要由乳杆菌构成，包括卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌和格氏乳杆菌等。正常情况下乳杆菌对阴道可以起到保护作用，而以乳杆菌占优势的阴道微生态的紊乱可以导致阴道炎。细菌性阴道炎(BV )是妇科的常见病、多发病。它是由于阴道内微生态平衡失调、厌氧菌和阴道加德纳菌过盛生长、兼性厌氧性乳杆菌受抑制所引起的一种阴道粘膜炎症性表现的综合征。应用抗生素治疗，虽然可暂时缓解BV的症状，但也使本已减少的乳杆菌进一步减少，加重阴道微生态失调，从而使BV反复复发。产H2O2乳杆菌是健康妇女阴道内的优势菌，是保护女性阴道免受病原体感染的重要因素。另外乳杆菌代谢产生的酸和一些抗微生物因子也可有效地抑制其他细菌的生长繁殖。有学者通过微生物培养鉴定发现，产生H2O2的乳杆菌的缺乏，可使阴道加德纳菌、厌氧革兰氏阴性杆菌、人型支原体、衣原体等增加。卷曲乳杆菌为主要定植于人体阴道中的一种乳杆菌，也可定植于人体口腔和肠道。卷曲乳杆菌属于几种健康妇女阴道中的主要产H2O2的菌之一。很多研究表明，卷曲乳杆菌不但可改变阴道PH值(通过发酵产生乳酸)，而且可以对阴道pH值变化做出反应。健康阴道PH值在4.0左右，受到微生物感染后，其环境pH值会上升至中性左右。卷曲乳杆菌可能会具有以下三种生理作用:一、产生乳酸，降低阴道内环境的PH值，抑制非嗜酸性微生物的生成，刺激嗜酸性微生物的生成；二、产生H2O2调节阴道微生态平衡，防止外籍菌侵入引起的感染；三、粘附抑制，卷曲乳杆菌能够粘附于阴道上皮细胞表面，同时抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌对阴道上皮细胞的粘附作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种卷曲乳杆菌LCR15，具有耐酸及高产过氧化氢特性，对阴道致病菌有抑菌作用，具有预防和治疗阴道炎的功能。实现上述专利技术目的的解决方案是:一种卷曲乳杆菌，所述卷曲乳杆菌在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC N0.6406。上述卷曲乳杆菌LE16直接自健康人体肠道中分离获得，已于2012年7月31日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称06110:，地址为:北京市朝阳区北辰西路I号院，中国科学院微生物研究 所)，保藏登记号为CGMCC N0.6406。所述的卷曲乳杆菌LCR15在抑制阴道致病菌中的应用。所述阴道致病菌是指枯草芽孢杆菌、粪肠球菌、浅黄色微球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和蜡样芽孢杆菌。所述的卷曲乳杆菌在调节阴道菌群、预防和治疗阴道炎中的应用。本专利技术的卷曲乳杆菌LCR15的形态为杆状，具有强耐酸性以及高产过氧化氢的特性，革兰氏染色阳性，不形成芽孢，产生乳酸，兼性厌氧。附图说明图1是本专利技术的卷曲乳杆菌在显微镜(X 1000倍)下的菌体形态。具体实施例方式本专利技术的卷曲乳杆菌LCR15利用葡萄糖、果糖、甘露糖、N-乙酰-葡萄糖胺、七叶灵、水杨甙(柳醇)、纤维二糖、麦芽糖、乳糖、蜜二糖、鹿糖、棉籽糖、淀粉和肝糖(糖原)，不利用甘油、赤癣醇、D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、核糖、D-木糖、L-木糖、阿东醇、β -甲基-D-木糖甙、半乳糖、山梨糖、鼠李糖、卫矛醇、肌醇、甘露醇、山梨醇、α -甲基-D-甘露糖甙、α -甲基-D-葡萄糖甙、苦杏仁甙、熊果甙、海藻糖(草糖)、菊糖、松叁糖、木糖醇、龙胆二糖、D-松二糖、D-来苏糖、D-塔格糖、D-岩糖、L-岩糖、D-阿糖醇、L-阿糖醇、匍萄糖酸钠、2-酮基-葡萄糖酸钠和5-酮基-葡萄糖酸钠。本专利技术的卷曲乳杆菌LCRl5发酵过程:于MRS液体培养基中37°C培养24h。实施例1:菌株镜检无菌条件下用接种环挑卷曲乳杆菌LCR15，涂于载玻片上，制片并革兰氏染色，在显微镜下观察菌体形态。实施例2 =MRS平板纯化分离无菌条件下用接种环挑卷曲乳杆菌LCR15，在MRS平板上划线，平板置于培养箱中37°C培养48h，挑选单菌落进行镜检，达到菌株纯种分离。实施例3:菌株发酵用接种环将卷曲乳杆菌LCR15从斜面上挑取二环至装有15ml MRS液体培养基中，37°C培养24h，再以1%接种量接入15ml MRS液体培养基中，37°C培养24h，即得卷曲乳杆菌LCRl5发酵液。实施例4:卷曲乳杆菌LCR15的16S rDNA部分序列(见序列表)。实施例5:卷曲乳杆菌LCR15耐酸性能卷曲乳杆菌LCR15菌株于MR S液体培养基中37°C培养24小时后，离心收集菌体，取1.0ml细胞重悬液至ρΗ3.0、ρΗ4.0和ρΗ5.0的9.0ml无菌PBS中，37°C处理0、1、2、3小时后进行活菌计数分析(表I)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卷曲乳杆菌，其特征在于，所述卷曲乳杆菌在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC?NO.6406。

【技术特征摘要】
1.一种卷曲乳杆菌，其特征在于，所述卷曲乳杆菌在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC N0.6406。2.权利要求1所述的卷曲乳杆菌LCR15在抑制阴道致病菌中的应用。3.根据权利要求2...

【专利技术属性】
技术研发人员：张旻，杭晓敏，张和春，夏祎稚，陈培青，
申请(专利权)人：上海交大昂立股份有限公司，上海诺德生物实业有限公司，
类型：发明
国别省市：