本发明专利技术属于生物工程中心肌梗死相关基因相关技术领域，涉及一种心肌梗死相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用，该心肌梗死相关基因即第八外显子突变的CYP8A1基因，该基因的核苷酸序列具有SEQIDNO:1所示的序列。本发明专利技术对心肌梗死相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用做了详细介绍，该体外检测心肌梗死相关基因的试剂盒除了可以用于体外检测心肌梗死相关基因的多态性外，还可以用于检测、预防、诊断或治疗心肌梗死，从而降低心肌梗死的发生率，对预防和治疗心肌梗死疾病具有重大的意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程中心肌梗死相关基因相关
，涉及一种心肌梗死相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用。
技术介绍
流行病学与临床研究表明，冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary arterydisease)是多数发达国家和许多发展中国家成人发病和死亡的主要原因。随着人均寿命的延长、物质条件的富裕和文化生活方式的西化，许多发展中国家(包括中国)的心血管疾病，特别是心肌梗死患病率和死亡率的增高趋势已经引起了全世界的关注。预计到2020年，心肌梗死和脑卒中将分别成为全球排名第I位和第4位的疾病。虽然近年来心肌梗死的诊断和治疗有了很大发展，溶栓药物和介入治疗等大大改善了心肌梗死患者的预后，但其病因学与发病机制的研究仍然进展缓慢。自从20世纪60年代Frmainghma的研究结果首次公布以来，人们已逐步认识到心肌梗死是由多种危险因素决定的。除了传统的心肌梗死危险因素，如吸烟、肥胖、高血压等以外，遗传因素与环境因素的相互作用在心肌梗死的发生发展中起着非常重要的作用。心肌梗死(myocardial infarction ；MI)是冠心病的一种严重状态，致残率和死亡率均居冠心病之首。随着分子生物学技术的发展，遗传因素在心肌梗死发病机制中的作用逐渐成为目前研究的热点。近年基础研究表明，某些基因的变异，包括肾素-血管紧张素-醛固酮系统、脂质代谢系统、凝血与纤溶系统和炎症因子等基因多态性可以增加冠心病的发生风险。 前列环素(prostacyclin，PGI2)首先发现于1976年，是花生四烯酸的一种代谢产物，在正常PH值水中水解成无活性的6-酮-前列腺素Fl α (6-酮-PGFl α )，在人体中半衰期约为6 min，主要通过刺激环磷酸腺苷(cAMP)的生成而引起血管平滑肌舒张并抑制平滑肌细胞的生长，同时有强大的抗血小板聚集作用。另外，PGI2还可以促使内皮细胞释放一氧化氮(NO)，而NO又能促使PGI2生成增加，可见两者可以形成良性循环，共同参与维持血管平滑肌的舒张。因此自PGI2在1976年被发现以后人们就考虑其在心血管领域中的应用问题，早在1979年有研究者提出，PGI2具有减少心肌梗死面积和心肌耗氧量等细胞保护作用，但机制还没有完全阐明。目前已经肯定的是PGI2对肺动脉高压的治疗作用，并有PGI2制剂和其类似物应用于临床，且取得肯定疗效。日本学者Nakayama研究认为PGI2类似物可以有效地预防心血管疾病的发生。由于其舒张血管、抑制血小板聚集和抗平滑肌细胞增殖的作用，从而阻断了动脉粥样硬化发生发展的某些环节，有利于预防动脉血栓性疾病的发生。因此可以设想PGI2水平的下降可以降低其对血管的保护作用而增加动脉血栓性疾病的发生率。前列环素合酶(prostacyclin synthase, PGIS)是细胞色素P450超家族中的成员，能催化前列腺素H2 (PGH2)生成PGI2。有研究证实PGIS主要分布在血管内皮细胞和平滑肌细胞，但新近研究表明PGIS在中枢神经系统亦有广泛分布，如大脑皮层和海马的锥体细胞以及小脑部位的浦肯野细胞，作者还发现PGIS mRNA在血管和中枢大神经元中均有大量表达，且二者具有明显的相关性。另有一项动物实验证明PGIS cDNA转染至大鼠血管平滑肌细胞可以导致PGI2合成增加并且抑制细胞的生长。Zou等研究结果也表明PGIS活性降低可以促进动脉粥样硬化的发生。上述结果显示PGIS不仅可以调节PGI2的合成，而且还具有直接的抑制血管平滑肌细胞增殖的作用，并可能对中枢神经系统功能的调节具有重要意义。PGI2的生成主要受到PGIS的调节，而CYP8A1基因是编码PGIS的基因，其遗传多态性对PGI2的合成存在明显的影响。PGIS基因定位于第20号染色体上，长度大约为60kb并包含10个外显子。同年日本学者Nakayama等对PGIS基因进行了测序并对其结构进行了系统描述。认为PGIS基因的长度为70kb，约为cDNA长度的30倍，外显子的长度范围为74bp至182bp,内含子为Ikb至19kb。近年来已经有大量的临床研究证实PGI2在心血管疾病中的作用，其血清水平的高低可能直接决定患者发生心肌梗死的风险。临床上该蛋白质有可能被优先应用于心肌梗死患病风险的预测指标。
技术实现思路
本专利技术提供了一种心肌梗死相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒、应用，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有技术在预防和治疗心肌梗死时效果不理想的问题。本专利技术的技术方案之一是通过以下措施来实现的一种心肌梗死相关基因即第八外显子突变的CYP8A1基因，该基因的核苷酸序列具有SEQ ID NO:1所示的序列。本专利技术的技术方案之二是通过以下措施来实现的一种体外检测根据权利要求1所述的心肌梗死相关基因的试剂，该试剂用于检测CYP8A1基因G1120C位点的多态性，该试剂包括如下引物 上游引物5’ATGTGACTGTGTGGGCGAG3’ ； 下游引物5’AGGAAGGGGAAGAGGAGGA3’。下面是对上述专利技术技术方案之二的进一步优化或/和改进 上述试剂可为用于聚合酶链式反应与限制性片段长度多态性分析相结合的试剂或用于聚合酶链式反应与直接测序法相结合的试剂。本专利技术的技术方案之三是通过以下措施来实现的一种有体外检测心肌梗死相关基因的试剂的制剂或试剂盒，该试剂盒包含PCR扩增酶及相应缓冲液。本专利技术的技术方案之四是通过以下措施来实现的一种体外检测心肌梗死相关基因的试剂在制备用于体外检测心肌梗死相关基因的制剂或试剂盒中的应用。下面是对上述专利技术技术方案之二的进一步优化或/和改进 上述试剂盒中可包含PCR扩增酶及相应缓冲液。 本专利技术对心肌梗死相关基因及其体外检测的试剂、制剂或试剂盒和应用做了详细介绍，该体外检测心肌梗死相关基因的试剂盒除了可以用于体外检测心肌梗死相关基因的多态性外，还可以用于检测、预防、诊断或治疗心肌梗死，从而降低心肌梗死的发生率，对预防和治疗心肌梗死疾病具有重大的意义。附图说明图1为本专利技术中心肌梗死相关基因的基因组结构示意图，从图中可以看出心肌梗死相关基因，由10个外显子和9个内含子构成。图2为本专利技术中心肌梗死相关基因序列变异的筛查流程示意图。图3为本专利技术的部分测序图谱。图4为本专利技术的G1120C多态性位点的酶切图谱。其中如泳道3显示待测个体G1120C位点的基因型为C/G杂合子；泳道I显示待测个体的G1120C位点为C/C纯合子；泳道2显示待测个体的G1120C位点为G/G纯合子。具体实施例方式为了更清楚地理解本专利技术，现参照下列实施例及附图进一步描述本专利技术，实施例仅用于解释而不以任何方式限制本专利技术。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行如Sambrook等人所著的《分子克隆实验手册》(New fork: Cold SpringHarbor Laboratory Press, 1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。实施例1，一种心肌梗死相关基因即第八外显子的CYP8A1基因，该基因的核苷酸序列具有SEQ ID NO:1所不的序列。含有CYP8A1的基因的待测样品可以从来自试验者的细胞获得，如来自血液、尿、唾液、胃液、头发、活组织检查和尸体解剖材料的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种心肌梗死相关基因即第八外显子突变的CYP8A1基因，其特征在于该基因的核苷酸序列具有SEQ?ID?NO:?1所示的序列。
【技术特征摘要】
1.一种心肌梗死相关基因即第八外显子突变的CYP8A1基因，其特征在于该基因的核苷酸序列具有SEQ ID NO:1所示的序列。2.—种体外检测根据权利要求1所述的心肌梗死相关基因的试剂，其特征在于该试剂用于检测CYP8A1基因G1120C位点的多态性，该试剂包括如下引物 上游引物5’ATGTGACTGTGTGGGCGAG3’ ； 下游引物5’AGGAAGGGGAAGAGGAGGA3’。3.根据权利要求2所述的体外检测心肌梗死相关基因的试...
【专利技术属性】
技术研发人员：马依彤，谢翔，杨毅宁，王宝珠，付真彦，李晓梅，马翔，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：
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