一种昆明山海棠药材的质量检测方法技术

技术编号:8561926 阅读:202 留言:1更新日期:2013-04-11 03:11
本发明专利技术目的在于公开一种昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法。以乙腈-甲醇-0.02%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;注温20℃;本发明专利技术的指纹图谱不仅可以测定雷公藤甲素、雷公藤红素和雷公藤内酯甲三种成分的含量,还对其微观的成分组成进行分析,制定了指纹图谱共有模式,从定性和定量方面都达到了最先进的水平。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药材的质量检测方法,特别是涉及昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法。
技术介绍
色谱指纹图谱用于中药质量检测符合中药复杂的多组分特点,在某些化学结构尚不清楚的情况下,能够较为全面地控制中药材的稳定性。与传统鉴别相比较,指纹图谱能够更好的反映中药(植物药)的整体质量信息,借助现代分析仪器等先进手段进行分析,方便易行。美国FDA及WHO通过了 “对植物药允许以指纹图谱判断上市产品批间样品的一致性”的规定。近年来,日、韩、德等国的植物药研究也广泛应用指纹图谱进行质量检测。由此可见,指纹图谱已成为控制植物药的有效控制手段,广·泛得到应用。昆明山海棠为卫矛科雷公藤属多年生落叶藤本灌木[Tripterygiumhypoglaucum(Levl)Hutch],又名粉背雷公藤、火把花、紫金皮等,中医用于杀虫、舒筋活络、清热解毒、祛风除湿等。国内外研究相继发现昆明山海棠在众多自身免疫性疾病(如红斑狼疮等)、肿瘤、白血病、以及艾滋病等方面的重要价值。但目前,现有方法仅上海市药材标准和广东省中药材标准有收载昆明山海棠的质量检测方法。对昆明山海棠药材的质量检测手段仅限于简单的性状和显微鉴别,没有对主要有效成分的定性或定量的鉴别,质量检测方法及其缺乏。本专利技术建立了昆明山海棠药材的指纹图谱的鉴别方法,通过药材的指纹图谱与标准指纹图谱对比,以确保药材质量稳定、可控。
技术实现思路
本专利技术的目的在于公开昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法。本专利技术目的是通过如下技术方案实现的本专利技术昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法,该方法包括如下步骤A、供试品溶液制备称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末O. 5 1. 5重量份,置锥形瓶中,加入甲醇60 100体积份,置30 50°C超声水浴中超声提取O. 5 1. 5小时,室温放置O. 5 1. 5小时,在4000转/分钟条件下离心5 15分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱I 5°C下放置O. 5 1. 5小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为O. 45 μ m的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液;B、对照品溶液制备取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含O. 00005 O. 00015重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液;C、色谱条件色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪;色谱柱Symmetry C18 (250X4. 6mm,5 μ m);流动相乙腈-甲醇-O. 02%磷酸溶液梯度洗脱;柱温10 30°C;流速1. Oml/分钟;检测波长210nm ;D、测定法吸取供试品溶液与对照品溶液各O. 00001体积份,注入液相色谱仪,测定,即得;昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰,共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰,其中36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰,各峰号相对保留时间为5号峰O. 140 O. 160,24号峰O. 560 O. 580,32号峰O. 820 O. 840,36号峰1、37号峰1. 030 1. 050。本专利技术昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法,优选如下步骤A、供试品溶液制备称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末I重量份,置锥形瓶中,加入甲醇80体积份,置40°C超声水浴中超声提取I小时,室`温放置I小时,在4000转/分钟条件下离心10分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱I 5°C下放置I小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为O. 45 μ m的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液;B、对照品溶液制备取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含O. 0001重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液;C、色谱条件色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪;色谱柱Symmetry C18 (250X4. 6mm,5 μ m);流动相乙腈-甲醇-O. 02%磷酸溶液梯度洗脱;柱温20°C;流速1. Oml/分钟;检测波长2IOnm ;D、测定法吸取供试品溶液与对照品溶液各O. 00001体积份,注入液相色谱仪,测定,即得;昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰,共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰,其中36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰,各峰号相对保留时间为5号峰O. 156,24号峰O. 569,32号峰O. 829,36号峰1、37号峰1. 044。本专利技术昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法,还可以优选如下步骤A、供试品溶液制备称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末O. 8重量份,置锥形瓶中,加入甲醇90体积份,置45°C超声水浴中超声提取O. 8小时,室温放置O. 8小时,在4000转/分钟条件下离心12分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱I 5°C下放置O. 6小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为O. 45 μ m的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液;B、对照品溶液制备取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含O. 00008重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液;C、色谱条件色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪;色谱柱Symmetry C18 (250X4. 6mm,5 μ m);流动相乙腈-甲醇-O. 02%磷酸溶液梯度洗脱;柱温15。。;流速1. Oml/分钟;检测波长2IOnm ; D、测定法吸取供试品溶液与对照品溶液各O. 00001体积份,注入液相色谱仪,测定,即得;昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰,共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰,其中36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰,各峰号相对保留时间为5号峰O. 148,24号峰O. 560,32号峰O. 819,36号峰1、37号峰1. 035。本专利技术昆明山海棠药材的指纹图谱质量检测方法还可以优选如下步骤A、供试品溶液制备称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末1. 2重量份,置锥形瓶中,加入甲醇70体积份,置35°C超声水浴中超声提取1. 3小时,室温放置1. 2小时,在4000转/分钟条件下离心6分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱I 5°C下放置1. 2小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为O. 45 μ m的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液;B、对照品溶液制备取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含O. 00012重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液;C、色谱条件色谱仪Agilent 1200本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种昆明山海棠药材的质量检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤:A、供试品溶液制备称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末0.5~1.5重量份,置锥形瓶中,加入甲醇60~100体积份,置30~50℃超声水浴中超声提取0.5~1.5小时,室温放置0.5~1.5小时,在4000转/分钟条件下离心5~15分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱1~5℃下放置0.5~1.5小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液;B、对照品溶液制备取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含0.00005~0.00015重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液;C、色谱条件色谱仪Agilent?1200型高效液相色谱仪;色谱柱Symmetry?C18(250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈?甲醇?0.02%磷酸溶液梯度洗脱;柱温10~30℃;流速1.0ml/分钟;检测波长210nm;D、测定法吸取供试品溶液与对照品溶液各0.00001体积份,注入液相色谱仪,测定,即得;昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰,共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰,各峰号相对保留时间为:5号峰0.140~0.160、24号峰0.560~0.580、32号峰0.820~0.840、36号峰1、37号峰1.030~1.050;其中5号峰为雷公藤甲素、37号峰为雷公藤内酯甲,36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰。...

【技术特征摘要】
1.一种昆明山海棠药材的质量检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤 A、供试品溶液制备 称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末0. 5 1. 5重量份,置锥形瓶中,加入甲醇60 100体积份,置30 50°C超声水浴中超声提取0. 5 1. 5小时,室温放置0. 5 1.5小时,在4000转/分钟条件下离心5 15分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱I 5°C下放置0. 5 1. 5小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为0. 45 y m的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液; B、对照品溶液制备 取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含.0.00005 0. 00015重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液; C、色谱条件 色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪;色谱柱Symmetry C18 (250 X 4. 6mm, 5 u m);流动相乙腈-甲醇-0. 02%磷酸溶液梯度洗脱;柱温10 30°C ;流速1. Oml/分钟;检测波长2IOnm ; D、测定法 吸取供试品溶液与对照品溶液各0. 00001体积份,注入液相色谱仪,测定,即得;昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰,共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰,各峰号相对保留时间为5号峰0. 140 0. 160,24号峰.0.560 0. 580,32号峰0. 820 0. 840,36号峰1、37号峰1. 030 1. 050 ;其中5号峰为雷公藤甲素、37号峰为雷公藤内酯甲,36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰。2.如权利要求1所述的昆明山海棠药材的质量检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤 A、供试品溶液制备 称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末I重量份,置锥形瓶中,加入甲醇80体积份,置40°C超声水浴中超声提取I小时,室温放置I小时,在4000转/分钟条件下离心10分钟,取出,倾取上清液置旋转蒸发仪中浓缩至近干,残渣用甲醇4体积份溶解,在冰箱I 5°C下放置I小时,取出,在10000转/分钟条件下离心5分钟,上清液用甲醇5体积份稀释,稀释液用孔径为0. 45 的微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液; B、对照品溶液制备 取雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲三种对照品,分别用甲醇配成每体积份含·0.0001重量份雷公藤甲素、雷公藤红素或雷公藤内酯甲的溶液,作为对照品溶液; C、色谱条件 色谱仪Agilent 1200型高效液相色谱仪;色谱柱Symmetry C18 (250 X 4. 6mm, 5 u m);流动相乙腈-甲醇-0. 02%磷酸溶液梯度洗脱;柱温20°C ;流速1. Oml/分钟;检测波长·21 Onm ; D、测定法 吸取供试品溶液与对照品溶液各0. 00001体积份,注入液相色谱仪,测定,即得;昆明山海棠药材标准指纹图谱共有42个特征峰,共有特征峰按照出峰顺序为第5号峰、24号峰、32号峰、36号峰、37号峰五个峰,其中36号峰为参照峰雷公藤红素色谱峰,各峰号相对保留时间为5号峰0. 156,24号峰0. 569,32号峰0. 829,36号峰1、37号峰1. 044。3.如权利要求1所述的昆明山海棠药材的质量检测方法,其特征在于该方法包括如下步骤 A、供试品溶液制备 称取昆明山海棠药材经粉碎过2号筛后的粉末0. 8重量份,置锥形瓶中,加入甲醇90体积份,置45°C超声水浴中超声提取0. 8小时,室温放置0. 8小时,在4000转/...

【专利技术属性】
技术研发人员:莫国强谢培山郭忠慧颜玉贞何风雷谢琳
申请(专利权)人:广州陈李济药厂有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有1条评论
  • 来自[北京市电信互联网数据中心] 2015年01月08日 15:12
    海棠是苹果属Malus植物代表植物海棠花学名Malusspectabilis为中国著名观赏树种各地习见栽培园艺变种有粉红色重瓣者和白色重瓣者
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