本发明专利技术揭示了米邦塔仙人掌多糖可改善大鼠神经行为障碍，减少脑梗死体积和皮层及海马神经元丢失，可减少细胞内ROS的产生，具有很好的神经保护作用，可作为预防和治疗中枢神经系统慢性神经退行性疾病的药物，用于预防和治疗中枢神经系统慢性神经退行性疾病。本发明专利技术还提供了优化的米帮塔仙人掌多糖提取工艺，该提取工艺具有方便简捷、经济适用，得糖率较高和适合大批量提取等特点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于 医药领域，涉及防治中枢神经系统慢性神经退行性疾病的药物。。
技术介绍
人类多种中枢神经系统慢性疾病如脑缺血、癫痫、帕金森氏症、老年性痴呆等，其主要的病理改变即神经细胞的损伤、丢失、坏死和凋亡。近来越来越多的研究证明，导致神经细胞的损伤最终原因是氧化应激(oxidative stress, OS)，所谓氧化应激是机体在遭受各种有害刺激时，体内产生的大量活性氧(reactive oxygen species, R0S)超出体内抗氧化防御系统对氧自由基的清除能力，最终氧化系统和抗氧化系统失衡导致组织损伤。自由基导致的细胞DNA氧化性损伤引发细胞凋亡。由于神经系统具有代谢率高以及抗氧化防御机制相对缺乏的特点，产生活性氧簇(ROS)多且更容易遭受氧化损伤导致疾病。抗氧化治疗主要是应用抗氧化剂，目前抗氧化剂包括天然抗氧化剂(维生素E、维生素C、β胡萝卜素、谷胱甘肽等)和合成抗氧化药物，如普罗布考等。大量的实验证实，抗氧化剂能通过清除自由基、抑制脂质过氧化而发挥神经保护作用，临床研究已取得一些可喜结果。但是，一些研究结果仍然令人困惑，如同一抗氧化剂动物实验有效，而临床试验往往无效。目前有关此类药物治疗的研究主要集中在两个方面一是开发具有多重作用机制的自由基清除剂； 二是鉴于自由基清除剂与抗炎药联合使用时效果更好，因此寻找具有自由基清除作用同时具有抗炎成为一个热点。在这一领域的认识还有待进一步提高，研发新的抗氧化剂及其在临床上的应用将为神经细胞氧化应激损伤的治疗提供更广阔的前景。具有极其重要的社会意义和经济效益。多糖是生物体内普遍存在的一类大分子物质，作为生命物质的组成成分之一，广泛参与细胞的各种生理活动的调节，特别在细胞识别、细胞间物质运输、免疫调节等生物学功能方面新的认识广泛引起人们的重视。近年来大量研究证实，许多多糖具有抗肿瘤、降血糖、抗凝血、抗炎、抗衰老及抗氧化等重要药理活性，已引起药理学家的极大关注，所以多糖也逐渐成为当今新药开发的重要方向之一。因为多糖来源广泛，而生物活性显著，毒副作用小，所以在医药方面具有广阔的开发和利用前景。有人预言“21世纪将是多糖的世纪”。仙人掌(Opuntia dillenii Haw)作为地球上生命力最强盛的植物之一，已生存了两万多年。其药用价值在几千年前就被人类认识和利用，在我国作为药用首载于清代赵学敏所著的《本草纲目拾遗》。据该书记载，仙人掌味淡性寒，行气活血、清热解毒、消肿止痛、 健脾止泻、安神利尿，可内服外用治疗多种疾病。清代刘善术著的《草木便方》中记载，仙人掌苦涩性寒，五痔泻血治不难，小儿白秃麻油擦，虫疮疥癞洗安然。另有《本草求原》、《陆川本草》、《岭南采药录》、《闽南民间草药》、《闽东本草》、《湖南药物志》、《中@国药植图鉴》、《分类草药性》、《贵州民间方药集》、《广西中草药》等也有论述。从资料记载可以看出，仙人掌除用于痢疾、哮喘、胃痛、肠痔泻血外，还用于肾炎、糖尿病、心悸失眠、动脉硬化、高血压、月巴胖症及肝病的辅助治疗。进入21世纪后，医学界和食品科学研究部门又发现了它具有降血糖、降血脂和抗氧化等功效。随着近年深入研究，发现仙人掌可促进新陈代谢，提高人体免疫力，除对糖尿病、高血脂、高血压等有疗效外，特别是抗氧化作用，已作为一种天然抗氧化剂用于食品科学。米邦塔仙人掌(Opuntia ficus-indica Milpa Alta)，是20世纪40年代墨西哥专家从植物仙桃(Opuntia ficus-indica)中选育出来、可作为果蔬食用的少刺的仙人掌品种，1998年我国农业部从墨西哥引进，现已大面积栽培成功，该仙人掌具有耐旱、耐瘠薄、适应性广、抗逆性强、病虫害较少、栽培管理容易等特点。米邦塔仙人掌含有18种人体必需氨基酸、多种维生素、微量元素和玉芙蓉、果仙纤维素、角蒂仙、多糖、留醇、黄酮、亚油酸、SOD等降血脂、降血糖、免疫增强、抗衰老及防癌等药理活性成分。其中仙人掌多糖 (cactuspolysaccharides,CP)为仙人掌所含主要有效成分之一，其含量高，药理活性强，对生物体毒副作用小，因此受到医药研究者的高度关注。
技术实现思路
本专利技术的任务是提供米邦塔仙人掌多糖在防治慢性神经退行性疾病中的应用。本专利技术对我国栽培的米帮塔仙人掌茎进行提取，将米邦塔仙人掌茎用水浸醇沉法进行多糖的粗提，用乙醇，丙酮，乙醚除杂及除蛋白质后，用苯酚一硫酸法检测多糖的含量，进一步纯化得到米帮塔仙人掌多糖，新鲜植物得糖率约7. 3 %。所得米帮塔仙人掌多糖， 主要含半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖以及阿拉伯糖，与国外文献报道一致。药效研究发现 在整体大鼠局灶性脑缺血及缺血复灌实验，米邦塔仙人掌多糖可改善大鼠神经行为障碍， 减少脑梗死体积和皮层及海马神经元丢失。在离体培养脑片及培养PC12细胞以及原代培养大鼠皮层、海马神经细胞，经多种方式氧糖剥夺损伤，米邦塔仙人掌多糖均可减少细胞内 ROS的产生，具有很好的神经保护作用。本专利技术整体实验结果显示米邦塔仙人掌多糖经消化道给予可以缓解大鼠局灶性脑缺血，及缺血复灌后神经症状，减少脑梗死体积；病理组织切片显示可显著减少脑缺血-再灌注皮层及海马神经元组织形态学损伤。离体脑片实验结果显示米邦塔仙人掌多糖对物理性氧糖剥夺损伤、过氧化物H2O2诱导的大鼠海马及皮层神经元损伤，具有明显的保护作用。离体细胞培养实验结果显示(1)离体培养PC12细胞以过氧化氢诱导的氧化应激损伤，米帮塔仙人掌多糖可明显减少细胞死亡，并对细胞凋亡具有明显抑制作用。(2)原代培养大鼠皮层、海马神经元，用化学物质对细胞进行氧糖剥夺损伤；米帮塔仙人掌多糖可保护细胞免遭其损伤，明显减少细胞死亡。本专利技术揭示米帮塔仙人掌多糖无论对整体动物，还是离体培养脑片或神经细胞，对物理和化学性所致神经细胞氧化应激损伤均具有良好的保护作用，其作用机制可能与抑制细胞内活性氧及自由基的生成，增强体内抗氧化酶活性，加速活性氧与自由基的清除等作用有关，米帮塔仙人掌多糖可以作为预防和治疗慢性神经退行性疾病如脑缺血_再灌注损伤，老年性痴呆、帕金森氏症等神经退行性变的药物。本专利技术实施例提供了一种优化的米帮塔仙人掌多糖的提取、分离与纯化方法。本专利技术提供的优化的米帮塔仙人掌多糖提取工艺，方便简捷、经济适用，得糖率较高，适合火批量提取。本专利技术实验资料一、整体动物实验米邦塔仙人掌多糖对整体大鼠脑缺血损伤的保护作用研究实验动物雄性Sprague & Dawley大鼠，体重200_250g，华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。实验仪器高速冷冻离心机(HITACHI)Hitachi Koki Co,Ltd. Tokyo JapanDYY-SC型电泳仪(北京市六一仪器厂出产)。大鼠脑缺血模型制备采用Zea Longa方法并予改良的大脑中动脉线栓法 (middle cerebralartery occlusion, MCA0)制备大鼠持续性局灶性脑缺血模型。大鼠水合氯醛麻醉(350mg/kg，IP)，依次分离右侧颈总、颈外、颈内动脉，结扎右侧颈外动脉，在靠近颈外、颈内动脉分叉处由颈总动脉沿颈内动脉缓慢插入预 先被多聚酪氨酸包被的直径 0. 26-0. 28mm的尼龙栓线，深度约为1. 8-2. 2cm本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郭莲军，陈扬，陈建国，黄先菊，湛进进，赵博，徐旭林，吕青，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：
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