一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白的制备方法及其用途技术

技术编号:6999387 阅读:651 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白,按如下方法制备:步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后,克隆至原核表达载体pET28a(+)中,得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP;步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置,即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间,插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT,并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中,得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1;步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌,诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。使用异双功能交联剂将短肽抗原耦联至Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白,按如下方法制备:  步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后,克隆至原核表达载体pET28a(+)中,得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP;  步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置,即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间,插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT,并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中,得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1;  步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌,诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈霄周子华廖玉华陈芬王敏刘祖霞邱志华张晓丽
申请(专利权)人:华中科技大学同济医学院附属协和医院
类型:发明
国别省市:83

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