一种温肾调经的中药制剂的检验方法技术

本发明专利技术涉及一种温肾调经的中药制剂的检验方法，其特征在于：检验方法中制定了当归、茜草、肉苁蓉和菟丝子的薄层色谱鉴别；采用高效液相色谱法，测定这种温肾调经的中药制剂中阿魏酸的含量。其优点是专属性高，检验方法稳定，通过对药物中的有效成分的精确检验和测定，能够有效的控制产品的质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于中药制剂的质量控制检验方法领域。
技术介绍
所述一种温肾调经的中药制剂其组方来源本组方系由实践中来，是经过多年验证的经验方。国家级妇科主任医师柴嵩岩自1959年以来，在临床工作中主攻闭经、月经量少、月经稀发、不孕等病。经过近50年的治疗与研究，确已取得了良好的经验。尤其在近 10年中看到门诊病例中多囊卵巢综合征(PC0Q发病比例明显增多，结合现代科学检查，如盆腔B超、女性激素、基础体温等结合主要征象，在临床治疗工作中，已重点侧重于PCOS病的有关资料的积累，相关资料的参照，加以对脾肾不足、湿浊蕴结证的病机所引起的临床证型，做重点研究。在1997年已做为专题研究，并经过查新，尚无我们所提出通利法的有关记载，应该说是属于创新的。如1998年北京中医研究所硕士研究生黄玉华的毕业论文中写到，名老中医柴嵩岩根据多年经验，认为本病属脾肾不足、痰湿阻遏而发病，本研究意在探讨其经验方，健脾益肾，养血通利，对脾肾阳虚型PCOS的治疗效果，并通过动物实验初步研究其作用机理，并对31例PCOS患者治疗3-6个月后，本研究实验结果显示疗后患者血清LH 和T水平明显下降，糖耐量实验恢复正常范围，排卵率为17%，总有效率为84%。动物实验结果表明，本方具有降低血清胰岛素和LGF-I水平，减轻体重，促进排卵。病理组织学和电镜结果提示，本方对卵巢的微循环有改善作用。在以上研究的基础临床工作中更加重了观察和研究力度，也有深入观察项目认真参阅现代医学及阶段性的反复总结，并对确诊为PCOS患者63例的中医诊断，如舌、脉象的重点观察及积累资料，已经明显地看出，无论其症状如何，或月经稀发、闭经，或出血，或肥胖，或多毛、痤疮等不同临床表现，而其脉象均为沉滑或沉细滑。中医学认为脉之应病，所以徵气血之盛衰，因为五脏六腑之气，无不通于血脉，不同疾病在很大程度上，脉象可以支持认证。但是脉象又是相当复杂的，只有在大量的同一病种中找出规律，对诊断有参考意义的客观所见。如对PCOS患者的脉象做了初步的归纳，曾对较典型的PCOS病例的脉象如何，无论出血、闭经、肥胖、消瘦等，其脉象均呈现为沉滑无力或细滑。其中年龄20-35岁55人，35 岁以上或25岁以下者8人，患稀发8人，闭经37人，淋漓出血3人，其他症状者12人。其组方为当归6份、杜仲4份、肉苁蓉2. 5份、川弯1.5份、薏苡仁5份、茜草3份、 车前子5份、菟丝子6份、桂枝1份采用颗粒剂制法制成。功能主治为温肾养血，利温化浊， 祛瘀调经。用于肾阳不足，冲任血虚，湿浊瘀阻所致之月经后期，经量稀少，甚或经闭不通； 多囊卵巢综合征见上述证候者。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，检验方法中制定了当归、茜草、肉苁蓉和菟丝子的薄层色谱鉴别；采用高效液相色谱法，测定这种温肾调经的中药制剂中阿魏酸的含量，以克服现有技术的弊端，提高产品的质量、疗效、生物利用度，更好地满足医疗的需要。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的，其特征在于检验方法中包含有a鉴别方法和b含量测定方法a 鉴别当归薄层色谱鉴别取这种温肾调经的中药制剂10_50g，研碎，加乙醇lO-lOOml， 超声处理10-50分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇I-IOml溶解，作为供试品溶液，另取当归对照药材l-10g，加乙醇10-50ml，超声处理10-50分钟，同法制成对照药材溶液，按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10-30 μ 1、对照药材溶液10-30 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比1-10 5-15 0.5-5的甲苯-三氯甲烷-无水乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；菟丝子薄层色谱鉴别取这种温肾调经的中药制剂5-20g，研细，加甲醇 lO-lOOml，超声处理10-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇I-IOml溶解，滤过，滤液浓缩至I-IOml，作为供试品溶液，另取菟丝子对照药材l-10g，研碎，加甲醇l-50ml，超声处理1-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇溶解，滤过，滤液浓缩至l_15ml，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-20 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比1-10 1-10 1-10的甲苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；肉苁蓉薄层色谱鉴别取这种温肾养血、利温化浊，祛瘀调经的中药制剂10-30g， 研细，加甲醇lO-lOOml，超声处理10-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇I-IOml溶解，作为供试品溶液，另取麦角甾苷对照品，加乙醇制成每Iml含l-5mg的溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1_50μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以体积比5-50 1-10 1-5的乙酸乙酯-甲醇-体积比浓度9%醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以l-10wt%三氯化铁乙醇溶液，在90-150°C加热至斑点显色清晰， 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；茜草薄层色谱鉴别取这种温肾养血、利温化浊，祛瘀调经的中药制剂10_30g，研细，加甲醇lO-lOOml，超声处理10-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，滤过，滤液浓缩至l_5ml，作为供试品溶液，另取茜草对照药材0. 5-5g，研碎，加甲醇l_30ml，超声处理10-50分钟，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1-20 μ 1， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比1-20 1-10的 60 90°C石油醚-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；b含量测定照高效液相色谱法测定色谱条件和系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以 10-50 10-100的甲醇-体积比浓度5% HAC为流动相；流速1-lOml/min ；检测波长为 300-400nm，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取阿魏酸对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加体积比 1-5 1-10的甲醇体积比浓度5% HAC的溶液制成每Iml含阿魏酸1-20. OOyg的溶液， 作为对照品溶液；供试品溶液的制备取这种温肾养血，利温化浊，祛瘀调经的中药制剂，研细，取 l_5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加体积比1-10 5-20的甲醇体积比浓度5% HAC 混合溶液10-50ml，称重，超声处理10-60分钟，放冷，再称重，用以上溶剂补充减失的重量， 滤过，取续滤液经微孔滤膜滤过，即得；测定法精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10-20 μ 1，分别注入液相色谱仪， 测定，即得；每袋含当归与川芎以阿魏酸CiqHiqO4计，暂定不得少于0. 5-1. Omg0本专利技术的有益效果本专利技术经过多次试验，检验方法中制定了当归、肉苁蓉、菟丝子和茜草的薄层色谱鉴别；采用高效相色本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种温肾调经的中药制剂的检验方法，其特征在于：检验方法中包含有ａ鉴别方法和ｂ含量测定方法：ａ鉴别：当归薄层色谱鉴别：取这种温肾调经的中药制剂１０－５０ｇ，研碎，加乙醇１０－１００ｍｌ，超声处理１０－５０分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇１－１０ｍｌ溶解，作为供试品溶液，另取当归对照药材１－１０ｇ，加乙醇１０－５０ｍｌ，超声处理１０－５０分钟，同法制成对照药材溶液，按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液１０－３０μｌ、对照药材溶液１０－３０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以体积比１－１０∶５－１５∶０．５－５的甲苯－三氯甲烷－无水乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯３６５ｎｍ下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；菟丝子薄层色谱鉴别：取这种温肾调经的中药制剂５－２０ｇ，研细，加甲醇１０－１００ｍｌ，超声处理１０－５０分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇１－１０ｍｌ溶解，滤过，滤液浓缩至１－１０ｍｌ，作为供试品溶液，另取菟丝子对照药材１－１０ｇ，研碎，加甲醇１－５０ｍｌ，超声处理１－５０分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇溶解，滤过，滤液浓缩至１－１５ｍｌ，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各５－２０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以体积比１－１０∶１－１０∶１－１０的甲苯－乙酸乙酯－甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯３６５ｎｍ下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；肉苁蓉薄层色谱鉴别：取这种温肾养血、利温化浊，祛瘀调经的中药制剂１０－３０ｇ，研细，加甲醇１０－１００ｍｌ，超声处理１０－５０分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇１－１０ｍｌ溶解，作为供试品溶液，另取麦角甾苷对照品，加乙醇制成每１ｍｌ含１－５ｍｇ的溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各１－５０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以体积比５－５０∶１－１０∶１－５的乙酸乙酯－甲醇－体积比浓度９％醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以１－１０ｗｔ％三氯化铁乙醇溶液，在９０－１５０℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；茜草薄层色谱鉴别：取这种温肾养血、利温化浊，祛瘀调经的中药制剂１０－３０ｇ，研细，加甲醇１０－１００ｍｌ，超声处理１０－５０分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，滤过，滤液浓缩至１－５ｍｌ，作为供试品溶液，另取茜草对照药材０．５－５ｇ，研碎，加甲醇１－３０ｍｌ，超声处理１０－５０分钟，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各１－２０μｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｇ薄层板上，以体积比１－２０∶１－１０的６０～９０℃石油醚－丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯３６５ｎｍ下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；ｂ含量测定：照高效液相色谱法测定色谱条件和系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以１０－５０∶１０－１００的甲醇－体积比浓度５％ＨＡＣ为流动相；流速１－１０ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长为３００－４００ｎｍ，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于３０００；对照品溶液的制备：取阿魏酸对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加体积比１－５∶１－１０的甲醇∶体积比浓度５％ＨＡＣ的溶液制成每１ｍｌ含阿魏酸１－２０．００μｇ的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备：取这种温肾养血，利温化浊，祛瘀调经的中药制剂，研细，取１－５ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加体积比１－１０∶５－２０的甲醇∶体积比浓度５％ＨＡＣ混合溶液１０－５０ｍｌ，称重，超声处理１０－６０分钟，放冷，再称重，用以上溶剂补充减失的重量，滤过，取续滤液经微孔滤膜滤过，即得；测定法：精密吸取供试品溶液与对照品溶液各１０－２０μｌ，分别注入液相色谱仪，测定，即得。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丽，贾金良，
申请(专利权)人：包头中药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：15