复方肾保护氨基酸组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种新型复方肾保护氨基酸组合物及其应用，该组合物包含甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、丝氨酸、吉氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸等支链氨基酸。本发明专利技术提供的组合物适用于制备预防和／或治疗由顺铂类和缺血导致的急性肾功能障碍的药物，包括注射剂，粉剂，片剂，胶囊等多种剂型。本发明专利技术对接受顺铂类肿瘤化疗药物治疗的病人以及各种原因引起急性肾脏缺血再灌注损伤的病人，具有良好预防和／或治疗急性肾功能障碍的，可用于预防和／或治疗由顺铂类和缺血引起的肾功能障碍等疾病。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属涉及一种新型复方氨基酸组合物，尤其涉及肾保护支链氨基酸组合物，及该组合物在治疗肾功能障碍的制药领域中的应用。近年来关于应用药物预防和治疗急性肾功能障碍时的细胞损伤和促进细胞修复与再生的报道日益增多。常见有腺嘌呤核苷酸类药物、氧自由基清除剂、钙离子阻滞剂、钙镁锌等两价阳离子、血管紧张素转换酶抑制剂、前列腺素。氨基酸对肾功能保护作用的机理尚未阐明。若甘氨酸、丙氨酸用量过高(125umol/kg·min)，GFR下降32％，说明甘氨酸、丙氨酸用量过高有潜在肾毒性。低至中剂量的氨基酸可引起肾血管扩张及GFR的增加。Weinberg JM等发现存在甘氨酸和L-丙氨酸增加肾近端小管细胞耐受缺氧损伤，保护作用不依赖细胞内的ATP的水平，和氨基酸的代谢无关。认为高度的特异受体和配体的作用在维持细胞的完整性起关键作用。Paller Ms等发现甘氨酸和丙氨酸对培养肾近端小管细胞的缺氧再供氧有保护作用。Silva p等2mM的甘氨酸加入离体灌注大鼠肾模型中，甘氨酸能保护髓攀粗升支的缺氧损伤，丙氨酸也有同样作用，与NO和降低细胞活动无关。Baines AD等发现在离体灌注肾模型中检查氨基酸的保护作用发现甘氨酸和丙氨酸等中性氨基酸的保护不需代谢，和它们稳定膜蛋白的三级结构有关。现临床使用的复方肾病用氨基酸，主要通过给予必需氨基酸以纠正慢性肾时必需氨基酸血浓度下降，同时作为急性和慢性肾功能衰竭时营养支持。有高含量的赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、组氨酸等非支链氨基酸，对急性肾功能障碍无保护作用。如剂量过大具有潜在地肾毒性。本专利技术的目的是通过下述方案实现的一种新型复方肾保护氨基酸组合物，其组合物及各组分的重量比为 本专利技术优选的各组分的重量比为 本专利技术最优选的各组分的重量比为 本专利技术的另一个目的是该组合物应用于制备预防和/或治疗由属于顺铂类和缺血导致的急性肾功能障碍的药物，包括注射剂，粉剂，片剂，胶囊等多种剂型。本专利技术由于采用上述方案，因而具有以下优点1.本专利技术的组合物对顺铂类所致急性肾功能衰竭具有保护作用。实验研究表明本专利技术的氨基酸组合物能增加顺铂所致急性肾功能衰竭时肾小球滤过率；保护肾小管细胞中线粒体的氧化磷酸化，改善线粒体呼吸障碍；保护肾小管细胞中溶酶体和线粒体等多种细胞器损伤，改善Na，K的排泄异常。2.本专利技术的组合物对肾缺血再灌注损伤具有保护作用。实验研究表明本专利技术的氨基酸组合物能增加缺血性肾功能障碍时的肾小球滤过率，尿流率；减缓血肌酐和尿素氮升高；减轻肾小管细胞损伤程度；减少肾小管细胞的凋亡；促进肾小管细胞热休克蛋白HSP70和Bcl-2蛋白表达；减低肾脏内皮素水平。3.本专利技术的组合物可以避免单种甘氨酸或丙氨酸用于预防和/或治疗急性肾功能障碍时甘氨酸、丙氨酸用量过高存在潜在肾毒性。4.本专利技术的组合物的氨基酸可以为肾脏损伤修复与再生提供所需的各种氨基酸，同时也为肾衰病人提供营养支持和能量代谢保证。5.本专利技术使用的各种支链氨基酸是人体组成天然氨基酸，来源丰富，价格实惠。6.本专利技术的氨基酸组合模式合理。实施例1本专利技术的组合物配制称取甘氨酸5.5克，L-丙氨酸7.5克，L-苏氨酸0克，L-丝氨酸7.5克，L-缬氨酸5克，L-亮氨酸5克，L-异亮氨酸2克，L-脯氨酸5克，用500ml 0.45％NaCl溶解，用NaOH和HCl调节溶液PH值6.5。实施例2氨基酸合剂对顺铂所致大鼠急性肾功能衰竭的保护作用实验模型选用体重250-350g雄性SD大鼠，分4组，对照组(n＝16)静滴0.9％氯化钠2ml，以后2ml/h速度维持；顺铂组(n＝12)静滴0.9％氯化钠2ml以后接受10mg/kg顺铂(10mg/ml)，氯化钠溶液继续2ml/h静滴；顺铂+氨基酸组(n＝10)静脉滴注8种L-氨基酸合剂2ml后，给予10mg/kg顺铂，继以氨基酸2ml/h；氨基酸组(n＝16)静脉滴注8种L-氨基酸合剂2ml后，以2ml/h维持。以戊巴比妥钠60mg/kg腹腔注射麻醉，体温维持在37C.一侧股静脉插入双通道静脉输液器，用于注射液体。切开腹中线进入腹腔，于肾血管平面下插动脉导管进入腹主动脉，与描记器相连，记录平均动脉压，实验中维持在100-120mmHg。经膀胱壁插入硅胶导管，每30分钟收集尿一次用于测尿流率，尿肌酐及钠钾浓度。体内实验完成时从门静脉抽血2ml测定血肌酐浓度；分离结扎肠系膜上动脉及肾血管平面上下的主动脉，经动脉导管用4度灌注液冲洗一侧肾脏后取下。对侧肾脏作形态学研究。肾小管线粒体呼吸功能的测定先分离肾小管线粒体，以极谱法在25度测定呼吸功能，极谱仪反应池容积为0.45ml，通过Clark氧电极与描记器相连。测定时反应池中加入0.45ml含5mmol/l苹果酸及5mmol/l谷氨酸的线粒体混悬液，加0.5mmol/lADP后测定的氧耗率称为状态3呼吸，ADP耗尽时的氧耗率称为状态4呼吸。线粒体悬液中加入2nmol/l对三氟甲氧基腙羰基氰化物(FCCP)以测定FCCP解偶联呼吸。结果如下1.增加肾脏的肾小球滤过率，氨基酸合剂静脉滴注3小时，与对照组(1.87±0.08)ml/min相比，GFR增加85％(3.45±0.21)ml/min，p＜0.01。2.改善尿钠钾排泄异常。顺铂作用30min，肾小管细胞功能受损，尿钠浓度增加56％，尿钾浓度增加2.6倍，氨基酸合剂注射后尿钠浓度迅速恢复正常，甚至低于对照组62％-71％，p＜0.01；尿钾浓度恢复至对照组水平。3.氨基酸改善肾小管细胞线粒体呼吸功能。顺铂作用后3小时，鼠肾小管细胞线粒体电子传递及ADP磷酸化和ATP功能均受抑制，状态4呼吸增加1倍。状态3呼吸、呼吸控制率(RCR)及FCCP解偶联呼吸分别减少46％、74％及47％。同时应用氨基酸合剂使状态4呼吸恢复至正常水平；受抑状态3呼吸、RCR及FCCP解偶联呼吸明显改善，受抑百分比分别降为对照组的16％(p＜0.05)，22％(p＜0.01)，21％(p＜0.01)。氨基酸对鼠肾小管正常线粒体呼吸功能无影响。实验结果可知，本专利技术的组合物能增加顺铂所致急性肾功能衰竭时肾小球滤过率；保护肾小管细胞中线粒体的氧化磷酸化，改善线粒体呼吸障碍；保护肾小管细胞中线粒体损伤，改善Na，K的排泄异常。对顺铂类所致急性肾功能衰竭具有保护作用。实施例3氨基酸合剂对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用。1.本专利技术的组合物配制称取甘氨酸7.5克，L-丙氨酸5.5克，L-苏氨酸2.0克，L-丝氨酸7.5克，L-缬氨酸5克，L-亮氨酸2克，L-异亮氨酸0克，L-脯氨酸6.5克，用500ml 0.45％NaCl溶解，用NaOH和HCl调节溶液PH值6.5。2.实验方案健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠24只，体重(230±18)g。随机分A组假手术组，B组对照组，C组治疗组。每组8只。2％戊巴比妥钠60mg/kg腹腔注射麻醉。左股静脉插管，接微泵持续输注生理盐水(A、B组)或氨基酸合剂(C组) 液体输注速度1ml·100g-1·h-1。膀胱造瘘，接以预先称重1.5ml微量离心管，收集尿标本，计算尿流率。输注液体60min后，行腹部正中切口，无损伤动脉夹阻断双肾蒂45min。假手术组不上夹。于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新型复方肾保护氨基酸组合物及其应用，其特征是：组合物及各组分的重量比为： ＊＊＊。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谢立平，
申请(专利权)人：浙江大学，浙江巨泰药业有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]