本发明专利技术公开了多聚赖氨酸的一种新用途。该用途是Ｌ－多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐在制备预防和／或治疗肿瘤药物中的应用，特别是在制备预防和／或治疗人肝癌和人结肠癌药物中的应用；所述的Ｌ－多聚赖氨酸，其结构如式（Ⅰ）所示。抗癌活性实验结果表明Ｌ－多聚赖氨酸对癌细胞有较好的抑制作用。Ｌ－多聚赖氨酸对人肝癌细胞Ｂｅｌ－７４０２和人结肠癌细胞ＨＣＴ－８的ＩＣ↓［５０］分别为０．７６μｇ／ｍｌ、１．３５μｇ／ｍｌ。实验中采用５－氟尿嘧啶为阳性对照药物，它对人肝癌细胞Ｂｅｌ－７４０２和人结肠癌细胞ＨＣＴ－８的ＩＣ↓［５０］分别为０．６２μｇ／ｍｌ、１．７９μｇ／ｍｌ。Ｌ－多聚赖氨酸的抗癌活性与５－氟尿嘧啶相当。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多聚赖氨酸的新用途。技术背景端粒DNA是位于染色体末端并对染色体具有保护作用的富含鸟嘌呤(G)的 DNA序列，它由一段双链重复区域和一段单链重复区域构成，人类和哺乳动物的 重复序列单元为TTAGGG。富含G的DNA单链在阳离子的诱导下可以通过G碱 基间Hoogsteen氢键形成四链体(G4)。研究表明，85~90%恶性肿瘤的发病都与 端粒酶的活性有关，而DNAG4结构的形成可以有效抑制端粒酶的活性，进而达到 抑制肿瘤细胞生长的目的。因此，能够诱导DNAG4形成并使之稳定的化合物有望 成为抗肿瘤的先导化合物，成为目前研究的热点。大量研究表明，单链DNA (序列为TTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG， 简称为Hum24)在Na+溶液中形成反平行结构G4，在K+溶液中形成平行和反平行 共存的G4混合结构。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供L-多聚赖氨酸的一种新用途。本专利技术所提供的L-多聚赖氨酸的用途是L-多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐 在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用，所述L-多聚赖氨酸的结构式如下<formula>formula see original document page 3</formula>所述L-多聚赖氨酸药学上可接受的盐具体可为溴盐。所述L-多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐，特别适合于制备预防和/或治疗人 肝癌和人结肠癌药物。所述的L-多聚赖氨酸，其分子量为15000-30000。本专利技术的另一目的是提供一种预防和/或治疗肿瘤的药物。本专利技术所提供的预防和/或治疗肿瘤的药物，它的有效成分为下述式(I)所示 的L-多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐所述L-多聚赖氨酸药学上可接受的盐具体可为溴盐。所述预防和/或治疗肿瘤药物特别适合于制备预防和/或治疗人肝癌和人结肠癌 的药物。其中，所述药物中的L-多聚赖氨酸，其分子量为15000-30000。所述预防和/或治疗肿瘤药物可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物 理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；或是被其他 物质混合或包裹后导入机体。以L-多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐为活性成分的抗肿瘤药物，需要的时 候，在上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学 领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表 面活性剂、吸附载体、润滑剂等。用L-多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐制备的预防和/或治疗肿瘤药物可以制 成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式。上述各 种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。L-多聚赖氨酸体外抗癌活性实验结果表明多聚赖氨酸对癌细胞有较好的抑制 作用。L-多聚赖氨酸对人肝癌细胞Bel-7402的IQo为0.76 pg/ml ，对人结肠癌细胞 HCT-8的ICs。为1.35pg/ml。实验中采用的阳性对照药物为5-氟尿嘧啶，它对人肝 癌细胞Bel-7402和结肠癌细胞HCT-8的IC5o分别为0.62吗/ml、 1.79吗/ml。 L-多 聚赖氨酸的抗癌活性与5-氟尿嘧啶相当。L-多聚赖氨酸抑瘤机理实验结果表明L-多聚赖氨酸通过诱导人和哺乳动物端 粒DNA形成平行G4结构来抑制肿瘤细胞生长。式(I)附图说明图1为人体端粒DNAHum24在未加入L-多聚赖氨酸和加入L-多聚赖氨酸的条 件下构象变化的园二色谱图(a) Hum24; (b)加入L-多聚赖氨酸，使Hum24 与L-多聚赖氨酸的摩尔比为6 : 1;每个谱图的摩尔椭圆度为-6—8 (mdeg)。图2为L-多聚赖氨酸诱导单链Hum24形成平行G4结构的熔点曲线图。具体实施方式实施例l、 MTT还原法检测L-多聚赖氨酸体外抗肿瘤活性实验 MTT法的基本原理为四甲基偶氮唑盐[MTT，3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide](购自北京化学试剂公司)是一种能接受氢原子的 染料。活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不 溶性的蓝紫色的formazon，而死细胞则无此功能。用DMSO溶解formazon后，在 一定波长下用酶标仪测定光密度值，即可定量测出细胞的存活率。按照公式可计算 肿瘤细胞生长抑制率(％) = (OD对照-OD錢)/OD对照x 100%，进而计算得到半数抑 制浓度(IC50)。具体操作步骤如下1) 选用对数生长期的贴壁人肝癌细胞Bd-7402与人结肠癌细胞HCT-8，用0.25 %胰酶消化后，用含10 %小牛血清的RPMI 1640培养液配制成5000个/ml的细胞 悬液，分别接种在96孔培养板中，每孔接种100W， 37°C， 5n/。C02培养24h。2) 按4个质量浓度梯度设L-多聚赖氨酸组，第1-3行的第1-4列孔按浓度从低 到高依次加入L-多聚赖氨酸(分子量15000-30000， Sigma)各10^1，用RPMI 1640 培养液补充至每孔终体积为200W，使每孔中L-多聚赖氨酸终浓度依次为 0.005ng/ml、 0.05吗/ml、 0.5吗/ml、 5吗/ml。阳性对照药5 —氟尿嘧啶同样也设4个 质量浓度梯度，各浓度同L-多聚赖氨酸组，第1-3行第5-8列孔按浓度从低到高依 次加入5 —氟尿嘧啶各10^1，用RPMI 1640培养液补充至每孔终体积为200 ^d，使 每孔中5 —氟尿嘧啶终浓度依次为0.005吗/ml、 0.05|ng/ml、 0.5|ig/ml、 5吗/ml。第 1-3行第9列孔为对照组，加入200^1 RPMI 1640培养液。第1-3行第10列孔为空 白组，每孔未接种细胞，只加入200 ulRPMI 1640培养液。37°C， 5。/。C02培养3d。3) 弃上清液，每孔加入10(^1新鲜配制的0.5 mg/ml MTT的无血清培养液，37 °C 继续培养4h。小心弃上清，并加入200^1 DMSO溶解MTT formazon沉淀，用微型 超声振荡器混匀，在酶标仪上测定波长544nm处的光密度值。按照下述公式计算肿瘤细胞生长抑制率，肿瘤细胞生长抑制率(％) = (OD对照-OD实验)/OD对照x 100%(其中OD对照、OD实验为已经扣除OD加的实验数值)，通过计算求得IC5o值。实验结果如表l所示。实验结果表明L-多聚赖氨酸对人肝癌细胞Bel-7402和人结肠癌细胞HCT-8的IC5。分别为0.76ng/ml、 1.35 pg/ml。实验中采用的阳性对照药物5-氟尿嘧啶，对人肝癌细胞Bel-7402和人结肠癌细胞HCT-8的1<35。分别为0.62ug/ml、 1.79ug/ml。说明L-多聚赖氨酸的抗癌活性与5-氟尿嘧啶相当。表1丄-多聚赖氨酸细胞毒性测试结果<table>table see original document page 6</column></row><table>实施例2、 L-多聚赖氨酸抑瘤机理在无金属离子存在的条件下，溶液中Hum24呈单链构型存在，这种构型在园 二色谱(CD)中有本文档来自技高网...
【技术保护点】
式（Ⅰ）所示的Ｌ－多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐在制备预防和／或治疗肿瘤药物中的应用，所述多聚赖氨酸的结构式如下：＊＊＊式（Ⅰ）。
【技术特征摘要】
1、式(I)所示的L-多聚赖氨酸或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用，所述多聚赖氨酸的结构式如下式(I)2、 根据权利要求l所述的应用，其特征在于所述L-多聚赖氨酸药学上可接受 的盐为溴盐。3、 根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述肿瘤为人肝癌。4、 根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述肿瘤为人结肠癌。5、 根据权利要求1至4任一所述的应用，其特征在于所述L-多聚赖氨酸的分 子量为15000-30000。6、 一种预防和/或治疗肿瘤的药物，它的有效成分为下述式(I...
【专利技术属性】
技术研发人员：张秀凤，唐亚林，向俊峰，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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