载脂蛋白A-I激动剂及其在异常脂血相关病症的治疗中的应用制造技术

技术编号:477310 阅读:171 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供模拟人ApoA-I的结构和药理特性的肽和肽类似物。这样的肽和肽类似物可用于治疗多种异常脂血症相关性疾病。(*该技术在2018年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
载脂蛋白a-i激动剂及其在异常脂血相关病症的治疗中的应用的制作方法1.前言本专利技术涉及载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)激动剂组合物,此类组合物可用来治疗异常脂蛋白血症相关疾病,其中包括高胆固醇血症、心血管疾病、动脉粥样硬化、再狭窄,和诸如脓毒性休克等其它病症。2.专利技术背景负责循环胆固醇运输的是血浆脂蛋白--复合脂和在血液内运输脂类的蛋白组合物组成的微粒。胆固醇的主要载体为低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。一般认为,LDL负责在体内将胆固醇从肝脏(合成或从食物中摄取胆固醇的场所)运输到肝外组织。“反向胆固醇转运”是指胆固醇从肝外组织向肝脏转运,并在肝脏中分解和去除。血浆HDL颗粒则被认为在反向转运过程中作为组织胆固醇的清除剂而发挥重要作用。很多证据表明,血清胆固醇的升高与冠心病相关。例如,动脉粥样硬化是一种进行性慢性疾病,其特征为胆固醇在动脉管壁内的逐渐积累。动脉粥样硬化性疾病中沉积的脂类主要来自于血浆LDL,这一观点得到众多证据的支持;因此,LDLs一般被称为“坏”胆固醇。相比之下,血清中HDL的水平与冠心病呈负相关--事实上,高水平的血清HDL被认为是一种负危险因子。据推测,高水平的血浆HDL不仅能够预防冠心病,而且实际上还能够诱导动脉粥样硬化性斑块的减退(例如,见Badimon et al.,1992,Circulation 86(Suppl.Ⅲ):86-94)。因此,HDL一般被称为“好”胆固醇。2.1.胆固醇转运脂肪转运系统可划分为两条途径外源途径转运由肠道吸收的胆固醇和甘油三酯,内源途径转运由肝脏和其他非肝性组织进入血液的胆固醇和甘油三酯。在外源途径中,摄入的脂肪被包装成脂蛋白颗粒,称为乳糜微粒,乳糜微粒进入血液,并将其中的甘油三酯提供给脂肪组织(用于贮存)和肌肉(用于氧化供能)。包含有胆固醇酯的乳糜微粒残余物被仅在肝细胞上发现的一种特异受体从循环中清除。此后,该胆固醇还可用于细胞代谢,或作为血浆脂蛋白再循环到肝外组织中。在内源途径中,肝脏将一种体积较大的极低密度脂蛋白颗粒(VLDL)分泌入血液。VLDLs的核心主要含有肝脏合成的甘油三酯,和少量胆固醇酯(在肝脏内合成或由乳糜微粒再循环而来)。载脂蛋白B-100和载脂蛋白E这两种主要蛋白分布于VLDLs表面。当VLDL到达脂肪组织或肌肉的毛细血管时,其中的甘油三酯被吸取,导致形成一种新的颗粒,该颗粒体积减小、胆固醇酯含量更高,但仍保留其两种载脂蛋白,此类颗粒被称为中间密度脂蛋白(IDL)。在人体内约有一半的IDL颗粒被迅速从循环中清除(在其形成后2-6小时内),这是由于它们紧紧结合于能够吸取其胆固醇以制造新VLDL和胆汁酸的肝细胞上。没有被肝细胞吸收的IDL颗粒则可在循环中保留较长的时间。此时,载脂蛋白E从循环颗粒上解离下来,使颗粒转变为只含有载脂蛋白B-100的LDL。首先,肝脏将大部分胆固醇摄取并降解为胆汁酸,胆汁酸是胆固醇代谢的终产物。肝实质细胞上存在高浓度的LDL受体,这些受体可介导含胆固醇颗粒的吸收。LDL受体能够与载脂蛋白E和载脂蛋白B-100结合,并负责与IDLs和LDLs结合并将其从循环中清除。但载脂蛋白E与LDL受体的亲和力要比载脂蛋白B-100大得多。因此,LDL颗粒在循环中的寿命要比IDL颗粒长得多--在与肝脏或其他组织上的LDL受体结合之前,LDLs可平均循环2.5天。血清中较高的LDL(“坏”胆固醇)水平与冠心病呈正相关。例如在动脉粥样硬化中,来源于循环LDLs的胆固醇在动脉管壁上聚集而导致大斑块形成,从而抑制血液流动,并最终形成血凝块而阻塞动脉,导致心脏病发作。从根本上讲,细胞胆固醇代谢受LDLs释放的胞内胆固醇量的控制。来源于VLDLs和LDLs的细胞胆固醇的积累可调节三个过程首先,通过关闭HMGCoA还原酶--胆固醇生物合成途径中的一种关键酶--的合成来减少细胞的胆固醇合成。其次,来源于LDL的胆固醇的进入可通过激活ACAT--细胞中将胆固醇转化为沉积于贮存微滴中的胆固醇酯的酶--来促进胆固醇的储存。再次,胞内胆固醇的积累可驱动一种反馈机制,使细胞内新LDL受体的合成受到抑制。因此,细胞可调节其LDL受体的补充,以此来摄入足以满足其代谢需要但又不会过量的胆固醇。(综述见Brown & Goldstein,In,The量的胆固醇。(综述见Brown & Goldstein,In,The PharmacologicalBasis of Therapeutics,8th Ed.,Goodman & Gilman,Pergamon Press,NY,1990,Ch.36,pp.874-896)。2.2.反向胆固醇转运从总体上而言,外周(非肝性)细胞是通过就地合成和从VLDLs和LDLs摄取现成固醇相结合的途径来获得胆固醇。相比之下,外周细胞的胆固醇则可通过反向胆固醇转运(RCT)途径返回肝脏,以再循环至肝外组织,或在胆汁中以胆汁酸修饰形式或氧化形式排泄到肠道内。RCT途径是从大多数肝外组织中去除胆固醇的唯一方法,它对体内大多数细胞的结构和功能维持至关重要。RCT主要包括三个步骤(a)胆固醇外流,将胆固醇从各种外周细胞库中去除;(b)利用卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的作用将胆固醇酯化,防止流出的胆固醇再次进入细胞;以及(c)将HDL胆固醇酯摄取/转运至肝细胞。RCT途径由HDLs介导。HDL是具有高密度特点的脂蛋白颗粒的通称。HDL复合物的主要脂类成分为各种磷脂、胆固醇(酯)和甘油三酯。最主要的载脂蛋白成分为A-Ⅰ和A-Ⅱ,它们决定了HDL的功能特性;此外还观测到少量的载脂蛋白C-Ⅰ、C-Ⅱ、C-Ⅲ、D、E、J,等。HDL能够以很多种不同大小的形式,以及与上述成分的不同混合物的形式存在,这取决于它们在RCT级联代谢中的重塑情况。LCAT是参与RCT途径的关键酶。LCAT主要在肝脏中产生并伴随HDL级分在血浆中循环。LCAT将来源于细胞的胆固醇转化为胆固醇酯,胆固醇酯由HDL捕获并最终被清除。胆固醇酯转运蛋白(CETP)和磷脂转运蛋白(PLTP)可在循环HDL群体的进一步重塑中发挥作用。CETP能够将LCAT产生的胆固醇酯转移至诸如VLDL和LDL等其它脂蛋白,尤其是含Apo-B的脂蛋白。PLTP则为HDL提供卵磷脂。HDL中的甘油三酯可被细胞外的肝甘油三酯酶分解,而脂蛋白胆固醇则通过某些机制由肝脏清除。每个HDL颗粒中至少包含一分子(通常为2-4分子)的ApoA-Ⅰ。ApoA-Ⅰ在肝脏和小肠中以前载脂蛋白原形式合成,以蛋白原形式分泌,蛋白原则被迅速分解,产生一段含243个氨基酸残基的成熟多肽。ApoA-Ⅰ主要包含6-8个不同的22氨基酸重复区,彼此由衔接部分隔开,衔接部分通常为脯氨酸,在某些情况下也可由若干残基组成。ApoA-Ⅰ衔接部分通常为脯氨酸,在某些情况下也可由若干残基组成。ApoA-Ⅰ可与脂类形成三种类型的稳定复合物低脂小复合物,称为前-β-1HDL;含有极性脂类(磷脂和胆固醇)的扁平盘状颗粒,称为前-β-2HDL;含有极性脂类和非极性脂类的球状颗粒,称为球形HDL或成熟HDL(HDL3和HDL2)。循环HDL群体中大多都既含有Apo本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ApoA-Ⅰ激动剂,包括: (i)一种含15-29个残基的肽或肽类似物,该肽或肽类似物在脂类参与情况下可形成两亲性α-螺旋,并且包含结构式(Ⅰ): Z↓[1]-X↓[1]-X↓[2]-X↓[3]-X↓[4]-X↓[5]-X↓[6]-X↓[7]-X↓[8]-X↓[9]-X↓[10]-X↓[11]-X↓[12]-X↓[13]-X↓[14]-X↓[15]-X↓[16]-X↓[17]-X↓[18]-X↓[19]-X↓[20]-X↓[21]-X↓[22]-X↓[23]-Z↓[2] 或其药学上容许的盐,其中: X↓[1]为Pro(P)、Ala(A)、Gly(G)、Gln(Q)、Asn(N)、Asp(D)或D-Pro(p); X↓[2]为一种脂肪族氨基酸; X↓[3]为Leu(L)或Phe(F); X↓[4]为Glu(E); X↓[5]为一种脂肪族氨基酸; X↓[6]为Leu(L)或Phe(F); X↓[7]为Glu(E)或Leu(L); X↓[8]为Asn(N)或Gln(Q); X↓[9]为Leu(L); X↓[10]为Leu(L)、Trp(W)或Gly(G); X↓[11]为一种酸性氨基酸; X↓[12]为Arg(R); X↓[13]为Leu(L)或Gly(G); X↓[14]为Leu(L)、Phe(F)或Gly(G); X↓[15]为Asp(D); X↓[16]为Ala(A); X↓[17]为Leu(L); X↓[18]为Asn(N)或Gln(Q); X↓[19]为一种碱性氨基酸; X↓[20]为一种碱性氨基酸; X↓[21]为Leu(L); X↓[22]为一种碱性氨基酸。 X↓[23]可不存在或为一种碱性残基; Z↓[1]为H↓[2]N-或RC(O)NH-; Z↓[2]为-C(O)NRR、-C(O)OR或-C(O)OH或其盐; 每个R各自独立地为-H、(C↓[1]-C↓[6])烷基、(C↓[1]-C↓[6])烯基、(C↓[1]-C↓[6])炔基、(C↓[5]-C↓[20])芳基、(C↓[6]-C↓[26])烷芳基、5-20元杂芳基或6-26元烷杂芳基或一种含1-7个残基的肽或肽类似物; 残基X↓[n]间的每个“-”各自独立地指一种酰胺键、取代的酰胺键、酰胺等排体或一种酰胺模拟物;或 (ii)结构式(Ⅰ)的缺失形式,其中残基X↓[1]、X↓[2]、X↓[...

【技术特征摘要】
US 1997-9-29 08/9400961.一种ApoA-Ⅰ激动剂,包括(ⅰ)一种含15-29个残基的肽或肽类似物,该肽或肽类似物在脂类参与情况下可形成两亲性α-螺旋,并且包含结构式(Ⅰ)Z1-X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-X21-X22-X23-Z2或其药学上容许的盐,其中X1为Pro(P)、Ala(A)、Gly(G)、Gln(Q)、Asn(N)、Asp(D)或D-Pro(p);X2为一种脂肪族氨基酸;X3为Leu(L)或Phe(F);X4为Glu(E);X5为一种脂肪族氨基酸;X6为Leu(L)或Phe(F);X7为Glu(E)或Leu(L);X8为Asn(N)或Gln(Q);X9为Leu(L);X10为Leu(L)、Trp(W)或Gly(G);X11为一种酸性氨基酸;X12为Arg(R);X13为Leu(L)或Gly(G);X14为Leu(L)、Phe(F)或Gly(G);X15为Asp(D);X16为Ala(A);X17为Leu(L);X18为Asn(N)或Gln(Q);X19为一种碱性氨基酸;X20为一种碱性氨基酸;X21为Leu(L);X22为一种碱性氨基酸。X23可不存在或为一种碱性残基;Z1为H2N-或RC(O)NH-;Z2为-C(O)NRR、-C(O)OR或-C(O)OH或其盐;每个R各自独立地为-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基、5-20元杂芳基或6-26元烷杂芳基或一种含1-7个残基的肽或肽类似物;残基Xn间的每个“-”各自独立地指一种酰胺键、取代的酰胺键、酰胺等排体或一种酰胺模拟物;或(ⅱ)结构式(Ⅰ)的缺失形式,其中残基X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、X8、X9、X10、X11、X12、X13、X14、X16、X17、X18、X19、X20、X21和X22中至少有一个并且可多至8个残基缺失;或(ⅱ)结构式(Ⅰ)的变化形式,其中残基X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、X8、X9、X10、X11、X12、X13、X14、X16、X17、X18、X19、X20、X21、X22或X23中至少有一个残基被另一种残基保守地替代。2.权利要求1的ApoA-Ⅰ激动剂,该激动剂与人类APoA-Ⅰ相比至少可显示出约38%的LCAT-激活活性。3.权利要求1的ApoA-Ⅰ激动剂,该激动剂为结构式(Ⅰ)的变化形式。4.权利要求3的ApoA-Ⅰ激动剂,其中结构式(Ⅰ)的疏水性残基为确定的,并且至少有一个非确定的残基被另一种残基保守地替代。5.权利要求4的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X1为Pro(P)、D-Pro(p)、Gly(G)、Asn(N)或Ala(A);X2为Ala(A)、Leu(L)或Val(V);X3为Leu(L)或Phe(F);X5为Leu(L);X6为Phe(F);X9为Leu(L);X10为Leu(L)、Trp(W)或Gly(G);X12为Leu(L)或Gly(G);X14为Leu(L)、Phe(F)或Gly(G);X16为Ala(A);X17为Leu(L);X21为Leu(L);并且X4、X7、X8、X11、X12、X15、X18、X19、X22和X23中至少有一个被另一种残基保守地替代。6.权利要求3的ApoA-Ⅰ激动剂,其中符合结构式(Ⅰ)的亲水性残基是确定的,并且至少有一个非确定的残基被另一种残基保守地替代。7.权利要求6的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X4为Glu(E);X7为Glu(E);X8为Asn(N)或Gln(Q);X11为Asp(D)或Glu(E);X12为Arg(R);X15为Asp(D);X18为Asn(N)或Gln(Q);X19为Lys(K);X20为Lys(K);X22为Lys(K);X23可不存在或为Lys(K);并且X1、X2、X3、X5、X6、X9、X10、X13、X14、X16、X17和X21中至少有一个被另一种残基保守地替代。8.权利要求6的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X3为Leu(L)或Phe(F),X6为Phe(F),X9为Leu(L),X10为Leu(L)、Trp(W)或Gly(G),并且X1、X2、X5、X13、X14、X16、X17和X21中至少有一个被另一种残基保守地替代。9.权利要求5或权利要求7的ApoA-Ⅰ激动剂,其中替代残基与被替代残基属于同一亚类。10.权利要求1的ApoA-Ⅰ激动剂,该激动剂为结构式(Ⅰ)的缺失形式。11.权利要求10的ApoA-Ⅰ激动剂,其中肽或肽类似物的一个螺旋圈缺失。12.权利要求1的ApoA-Ⅰ激动剂,该激动剂为结构式(Ⅰ)的含22-23个残基的肽或肽类似物。13.权利要求12的ApoA-Ⅰ激动剂,其中残基间的“-”指-C(O)NH-;Z1为H2N-;并且Z2为-C(O)OH或其盐。14.权利要求13的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X1为Pro(P)、Ala(A)、Gly(G)、Asn(N)、Asp(D)、Gln(Q)或D-Pro(p);X2为Ala(A)、Val(V)或Leu(L);X3为Leu(L)或Phe(F);X4为Glu(E);X5为Leu(L);X6为Phe(F);X7为Leu(L)或Glu(E);X8为Asn(N)或Gln(Q);X9为Leu(L);X10为Leu(L)、Trp(W)或Gly(G);X11为Glu(E);X12为Arg(R);X13为Leu(L)或Gly(G);X14为Leu(L)、Phe(F)或Gly(G);X15为Asp(D);X16为Ala(A);X17为Leu(L);X18为Asn(N)或Gln(Q);X19为Lys(K);X20为Lys(K);X21为Leu(L);X22为Lys(K);并且X23可不存在或为Lys(K)。15.权利要求14的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X23不存在。16.权利要求14的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X10、X13和X14各自为除Gly(G)以外的残基。17.权利要求14的ApoA-Ⅰ激动剂,其中X10、X13和X14中的一个为Gly(G),其余为除Gly(G)以外的残基。18.权利要求l的ApoA-Ⅰ激动剂,该激动剂选自以下组合(序列识别号144)pVLELFENLLERLLDALQKKLK;(序列识别号145)GVLELFENLLERLLDALQKKLK;(序列识别号146)PVLELFENLLERLLDALQKKLK;(序列识别号147)PVLELFENLLERLFDALQKKLK;(序列识别号148)PVLELFENLLERLGDALQKKLK;...

【专利技术属性】
技术研发人员:琼路易斯达索克斯雷纳特塞库尔克劳斯巴特纳伊莎贝尔康纳特冈瑟梅茨
申请(专利权)人:琼路易斯达索克斯雷纳特塞库尔克劳斯巴特纳伊莎贝尔康纳特冈瑟梅茨
类型:发明
国别省市:US[美国]

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1