测量凝血的方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了执行分析以测定血液样品凝结所需时间的装置和方法。装置包含涂有一种或多种凝血剂的反应室。将一滴血液或等同物放置在加样端口上，稀释，并与反应室中的凝血剂接触。稀释后的血样可以通过反应室前后移动，直到血液凝结。凝血过程形成的纤维蛋白架阻止了血样流入反应室。凝血时间是从样品进入反应室到反应室中的波形发生变化、或样品的运动或流动停止时的总时间，可以通过浊度来测量。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于执行分析以测定样品中一种或多种分析物的存在、具体为测量凝血的微流体系统。
技术介绍
凝血是一个复杂的过程，涉及三种相互作用的组分血管，凝血因子和血小板。存 在两种已被很好认识的凝血途径外源性或促凝血酶原激酶控制的、以及内源性或凝血酶 原/纤维蛋白原控制的凝血途径。外源性和内源性途径都导致凝血酶的产生，这是一种催 化纤维蛋白原向纤维蛋白转化的蛋白水解酶。可溶性血浆蛋白纤维蛋白原通过凝血酶的作 用转化成不溶性纤维蛋白，导致测试样品从液体变为凝结的形式。 在临床分析测试中，凝血分析测试测量纤维蛋白凝块形成所需的时间。有许多 类型的凝血分析。它们包括凝血酶原时间(PT)、部分促凝血酶原激酶时间(PTT)、活化的 部分促凝血酶原激酶时间(APTT)、纤维蛋白原分析、凝血酶凝血时间(TCT)、活化凝血时间 (ACT)和其它。两种最常用的凝血测试是PT和APTT分析。这两种测试都测量凝血时间，以 评估患者的基线止血状态或监测对抗凝剂疗法的反应，以及凝血系统的总体功能和状态。 PT测试用于评估外源性和共同途径凝血系统，并用于监测长期抗凝剂疗法。长期 抗凝剂疗法的常见药物是华法令异丙醇钠笼形包合物，通常所知的商标名为COUMADIN ,由 Bristol Myers Squibb销售。华法令及其类似物通过有效阻断维生素K依赖性凝血因子的 生物合成，来诱导抗凝作用。因为PT测试测量了凝血时间，因此可以测定血液中抗凝剂的 有效量。 第二种常规使用的分析是APTT测试，广泛用于监测肝素疗法，以筛查包含在源性 和共同凝血系统中的凝血因子的缺陷。肝素通过与被称为抗凝血酶III的血浆辅因子结合 并形成复合物，来发挥其抗凝作用。 除了上述之外，FDA已经批准了几种蛋白C分析进行临床应用，它们广义上可以分 成三种类型抗原性，发色性/酰胺水解性，和凝血测量。抗原性分析包括ELISA、EIA和RIA 类型的测试。这些分析不确定蛋白是否具有功能，因为抗体不针对与功能活性有关的表位。 发色性/酰胺水解活分析依靠酶的活性位点裂解小的合成底物以释放出色彩鲜 明的产物的能力。在活化的蛋白C对合成底物的活性与对天然生物学底物的活性之间可能 存在差异。此外，合成底物没有测试酶的其它功能特征(即辅因子相互作用)。 凝血测量分析需要在样品分析前产生标准曲线。样品需要首先稀释，进行温育以 活化蛋白C，然后启动凝血级联。使用凝血时间与蛋白C活性之间的标准曲线来内推未知样 品的蛋白C活性。尽管在实验室程序中存在差异，但当打开新的试剂批次、或当对照不在其 规定的范围内时，常规要对被测试的每组患者样品重复制作标准曲线。 在这些方法的使用中存在许多缺点。例如，试剂对热敏感，在使用前需要冷藏。一 旦将干燥的试剂复溶，它必须在几小时内使用，否则将丢弃。此外，实验室设备由于所用的 技术复杂而相对较大，昂贵，并且由于检测方法的复杂性，被设计成由经过训练的人员来使 用。此外，通常也需要大血样。因此，对于精确、方便和廉价地检测和测定凝血时间的分析 系统，存在着需求。 专利技术概述 本专利技术提供了用于执行分析以测定血样凝结所需时间的装置和方法。装置包含 涂有一种或多种凝血剂的反应室。将一滴血液或等同物放置在加样端口上，并与反应室中 的凝血剂接触。任选，样品可以被稀释。接触可以通过任何方式，例如通过将盒沿着x、 y 和z轴倾斜。血样可以通过反应室前后移动，直到血液凝结。凝血过程形成的纤维蛋白丛 (fibrin stands)，阻止了血液样品的流动。凝结时间是从样品进入反应室到样品的运动或 流动停止、或毛细管中产生的波幅从最初的无凝血状态发生改变时的总时间。 在参考了下面的详细描述后，本专利技术的这些以及其它方面将变得了然。此外，在本 文中提出的各种参考文献更详细地描述了某些程序或组合物，因此以其全文引为参考。 附图简述 附图说明图1显示了用后即可丢弃条的透视图，其具有一组互连反应室和在一个室中的可移动元件。 详细描述 所有在本文中引用的出版物、专利和专利申请，不论是在上文还是下文中的，在此 以其全文引为参考。 除非另有指明，在本申请、包括说明书和权利要求书中使用的下列术语，具有下面 给出的定义。必须指出，当用在说明书和随附的权利要求书中时，不带数量的指称物包括了 复数形式，除非上下文明确有另外的表示。 本文中使用的术语"对象"包括哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物的例子包括但 不限于哺乳动物纲的任何成员人类，非人类灵长动物例如黑猩猩，以及其它猿和猴物种； 农场动物例如牛、马、绵羊、山羊、猪；家养动物例如兔、狗和猫；实验室动物包括啮齿动物， 例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳动物的例子包括但不限于鸟、鱼等。该术语不指定具体的 年龄或性别。 本文使用的"固体支持物"是指固体表面，例如塑料板、磁珠、乳胶珠、微孔板的孔、 玻璃板、尼龙、琼脂糖、丙烯酰胺等。 本专利技术涉及测量凝血时间的方法和微流体装置。典型的微流体装置显示在图1 中。装置含有盒100，盒100具有涂有一种或多种凝血剂例如组织因子或其它凝血剂的反 应室110和120。反应室110和120可以通过一个或多个毛细管通道与血液储存槽(blood reservoir) 130、不凝血参比端口 140和加样端口 150流体连通。将一滴血液或等同物放置 在加样端口 150上。任选，可以将稀释剂放置在储存槽150中，由此血样与稀释剂的混合可 以任选提供稀释的血样。然后可以将血样与凝血剂在反应室110和/或120中接触。接触 可以通过任何方式，例如通过机械移动储存槽130的薄膜，使得毛细管复合体中的样品可 以以给定的频率和幅度，与薄膜致动器同步移位，或者通过将盒沿着x、y和z轴倾斜。血样 可以通过反应室110和120前后移动，直到血液凝结。凝血过程形成的纤维蛋白架阻止了血液样品的流动，也改变了由薄膜动作产生的波形的幅度。凝血时间是从样品进入反应室 110和120到波形的幅度改变、和/或样品的运动或流动停止时的总时间。 盒100可以是长方形、圆形、椭圆形或任何形状，并可以由适合的材料制成，所 述材料根据其性质进行选择，例如良好的导热性、适于光透射的透明性、易于焊接的机械 性质、允许均匀涂层和试剂稳定性的表面性质、以及对液体介质中性以防止对分析的干 扰。为此，适合的塑料包括具有高的自由表面能和低的水吸附性的塑料，包括PETG、聚酯 (Mylar )、聚碳酸酯(Lexan⑧)、聚氯乙烯、聚苯乙烯、SAN、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯 (ABS)，特别是由Borg Warner在商标名Cycolac下提供的ABS，等等。可选地或等价地，可 商购的模制盒可用于实施本专利技术。 盒100可以具有涂有一种或多种凝血剂例如组织因子的反应室110和120。每个 反应室可以优选暴露于大气。在本专利技术的一个方面，反应室110和120可以具有遍布的障 碍物128。障碍物128可以是任何形状，例如圆筒或柱形，在它们之间具有空隙，允许血样前 后流动，直到凝结。在本专利技术的另一方面，反应室110和120不具有障碍物128。 血样可以通过传统方式从患者获得，例如静脉穿剌或扎手指。样品可以通过加样 端口 150施加到盒100上。在本专利技术的一个方面，从患者获得的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种盒，其含有两个反应室、血液储存槽、参比端口和加样端口，其中两个反应室通过毛细管通道与血液储存槽流体连通，血液储存槽通过毛细管通道与参比端口流体连通，参比端口通过毛细管通道与加样端口流体连通，并且其中储存槽包括用于移动毛细管通道内样品的薄膜。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊曼纽尔C埃姆帕克，威尔玛曼甘，
申请(专利权)人：MEC戴内米克公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]