一种注射剂的指纹图谱鉴别方法技术

本发明专利技术公开一种由青蒿１０００～１４００重量份，金银花６００～９００重量份，栀子５００～７００重量份制成的中药注射剂的指纹图谱测定方法，该方法包括液相色谱法测定以栀子苷峰为参照物峰记录得指纹图谱和／或气相色谱法测定以与樟脑峰相对保留时间为０．７４～０．７５的色谱峰为参照物峰记录得供试品指纹图谱的检测方法。本发明专利技术指纹图谱的检测方法进一步加强了热毒宁注射剂的质量控制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药组合物的质量控制方法，特别涉及一种中药组合物的注射剂的指纹图谱鉴别方法。
技术介绍
目前中药的质量标准很不规范和完善，质量分析和评价的手段还很落后，无法准确的反映现有中药的质量状况，成为中药走出国门，走向世界的障碍。中成药指纹图谱是借鉴法医学中指纹鉴定的概念，将适当处理后的药材或药品，用一定的分析手段来得到能够反映该药材或药品特征的共有的峰图谱。通过对共有峰图谱的分析来辨别、鉴定药材或药品的质量，确保药品的质量稳定可控。为(具有解热作用的中药组合物及其制备方法和质量控制方法)(200410000134.X)公开了一种具有解热、抗病毒、抗菌作用的中药物组合物是由青蒿1000～1400重量份，金银花600～900重量份，栀子500～700重量份制成，本专利技术即是为了进一步加强该组合物注射剂质量管理，应用液相指纹图谱测定方法和气相指纹图谱测定方法控制该注射剂的质量，从而能够更全面、有效地控制制剂质量。
技术实现思路
本专利技术目的在于公开一种中药组合物的注射剂的指纹图谱鉴别方法，特别是一种青蒿、金银花和栀子制成具有解热作用中药组合物的指纹图谱鉴别方法。本专利技术通过如下技术方案实现的本专利技术指纹图谱鉴别方法包括下述液相色谱法和/或气相色谱法。液相色谱法测定取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得参照物溶液；取药物组合物注射剂1ml，置25ml量瓶中，加40-60％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，测定；其中色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液系统梯度洗脱，检测波长为225nm；理论板数按参照物栀子苷峰计算，应不低于6000，以栀子苷峰为参照物峰记录60分钟得供试品指纹图谱；流动相甲醇-0.1％磷酸水溶液系统的梯度洗脱程序为 ，流速为0.8ml/min。供试品指纹图谱与对照指纹图谱经计算软件计算，相似度大于0.8，或优选大于0.9，本专利技术指纹图谱的(峰号)相对保留时间和(峰号)峰面积比值如下(峰号)相对保留时间，(1)0.286±20％、(2)0.398±20％、(3)0.458±20％、(4)0.748±20％、(5)0.804±20％、(6)0.848±20％、(7)0.915±20％、(8)0.940±20％、(S)1、(9)1.372±20％、(10)1.592±20％、(11)1.625±20％、(12)1.890±20％、(13)1.941±20％；(峰号)峰面积比值(3)0.34-0.56、(4)0.83-1.24、(5)0.32-0.53、(S)1。(参见附图1)气相色谱法测定取樟脑对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.2-0.4mg的溶液，精密吸取1ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液10ml置20ml顶空瓶中，轧盖，即得对照品溶液；精密吸取本药物组合物注射液10ml，置20ml顶空瓶中，轧盖，即得供试品溶液；气相色谱顶空进样法测定；其中顶空恒温箱温度90-95℃，传输管温度105-115℃，进样环温度115-125℃，平衡时间50-80min；用5-10％二苯基90-95％二甲基硅烷共聚物为固定相的毛细管色谱柱；进样口温度200-250℃；检测器温度200-250℃；顶空进样测定，分流比1∶1；程序升温初始温度50℃，保持4-8分钟，以每分钟10℃升至80℃，保持8-12分钟，以每分钟10℃升至130℃，保持5-8分钟，再以每分钟5℃升至240℃，保持8-12分钟，测定；载气流速2.0ml/min；理论板数按对照品樟脑峰计算，应不低于30000；以与樟脑峰相对保留时间为0.74～0.75的色谱峰为参照物峰，记录60分钟得供试品指纹图谱。本专利技术供试品指纹图谱与对照指纹图谱经计算软件计算，相似度大于0.8，或优选大于0.9，本专利技术指纹图谱的(峰号)相对保留时间和(峰号)峰面积比值如下(峰号)相对保留时间，(1)0.199±20％、(2)0.650±20％、(3)0.818±20％、(4)0.898±20％、(S)1、(5)1.343±20％、(6)1.461±20％(7)1.572±20％；(峰号)峰面积比值，(3)0.09～0.22、(4)0.50～0.93、(S)1。(参见附图2)本专利技术上述所用的计算软件可以选用药典会推荐的″中药指纹图谱计算机辅助相似度评价软件″计算。本专利技术药物组合物注射剂是按照200410000134.X中的技术方案制备的，其中方法一包括如下步骤取青蒿1000-1400重量份 金银花600-900重量份 栀子500-700重量份。上述本专利技术药物组合物的原料药优选配比为青蒿1250重量份、金银花750重量份、栀子600重量份或青蒿1100重量份 金银花800重量份栀子700重量份；以上三味，金银花、青蒿加13-18倍量水浸泡2-4小时，加热煎煮蒸馏1-3次，每次1-3小时，同时收集挥发油，备用。取青蒿、金银花挥发油，加入5-7重量份波洛沙姆108研磨混匀后，加入900体积份(本文中重量份/体积份为g/ml)注射用水中，搅拌使澄明，再加入上述工艺中金银花、青蒿干膏粉，栀子干膏粉搅拌使溶解，用氢氧化钠溶液调PH值为7.5～8.0，加注射用水至1000体积份。用G4垂熔漏斗滤过，灌封，100℃流通蒸汽灭菌，即得注射液，每支10ml；还可以在灌封、灭菌后通过冷冻干燥法制成冻干粉针剂；或在注射用水中加入金银花、青蒿干膏粉，栀子干膏粉时，再加入总干膏粉的0.2～5倍的支架剂，如葡萄糖或甘露醇或氯化钠等，溶解，调PH值为7.5～8.0，过滤、灭菌，分装，冷冻干燥，制成粉针剂。或通过常规工艺，制成其他注射剂型如混悬液型注射剂、输液剂等。其中方法二包括如下步骤金银花、青蒿干膏粉的制备金银花加水提取1-3次(80-100℃)，每次1-2小时，加水量为9-16倍，提取液另置；青蒿加3-6倍量水润透后，水蒸气蒸馏5-8小时提取挥发油，挥发油另置，提取金银花与青蒿提取液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10(60℃)，加入乙醇使含醇量为70-80％，静置20-36小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20(60℃)，用盐酸调PH值为1.8-2.3左右，用等量乙酸乙酯萃取9-12次，取萃取液，减压浓缩至无乙酸乙酯味，倾出浓缩液，真空干燥，得金银花、青蒿干膏粉；栀子干膏粉的制备栀子粉碎成粗粉，用5-8倍量70-90％乙醇加热回流1-3次，每次1-2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至1∶1，用盐酸调Ph为2.5-3.5，100℃加热1-2小时，加入1％药材量的固体石蜡，搅匀，冷藏10-14小时，滤过，滤液用等量的正丁醇萃取5-7次，减压浓缩到无正丁醇味，真空干燥，得栀子干膏粉。取注射用水800-1200体积份煮沸，投入上述制得两中间体，搅匀，沸腾3-7分钟后，冷却至室温，冷藏20-36小时，滤过，滤液调PH为2-3，加入1％活性炭，煮沸8-14分钟，冷藏20-36小时后过滤，滤液，加热至沸腾，加热过程中调PH为5.05，沸腾9-13分钟冷却到室温，冷藏40-58小时，滤过，加入0.3-0.8本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种由青蒿１０００～１４００重量份，金银花６００～９００重量份，栀子５００～７００重量份制成的中药注射剂的指纹图谱测定方法，其特征在于该方法为：　　　　液相色谱法测定，取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每１ｍｌ含５０μｇ的溶液，即得参照物溶液；取药物组合物注射剂１ｍｌ，置２５ｍｌ量瓶中，加４０～６０％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；精密吸取参照物溶液与供试品溶液各１０μｌ，分别注入液相色谱仪，测定；其中色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相为甲醇－０．１％磷酸水溶液系统梯度洗脱，检测波长为２２５ｎｍ；理论板数按参照物栀子苷峰计算，应不低于６０００，以栀子苷峰为参照物峰记录６０分钟得指纹图谱；　　　　其中流动相为甲醇－０．１％磷酸水溶液系统进行梯度洗脱，０到５０分钟时甲醇体积比由２０％线性上升到６０％∶０．１％磷酸体积比由８０％线性下降下降到４０％；５０分钟到６０分钟时按甲醇与０．１％磷酸溶液体积比维持６０％∶４０％的比例关系进行洗脱，总洗脱时间为６０分钟；流速为０．８ｍｌ／ｍｉｎ。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：肖伟，戴翔翎，凌娅，王振中，毕宇安，刘涛，梁慧，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]