针对TIGIT的抗体制造技术

本发明专利技术提供结合人TIGIT(含Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)的抗体或其抗原结合片段，以及这些抗体或片段在治疗应用中，例如在治疗癌症或慢性病毒感染中的用途。这样的治疗方法包括与其它免疫调节受体相互作用，例如PD‑1/PD‑L1相互作用的抑制剂的组合疗法。本发明专利技术进一步提供编码所述抗体的重链和/或轻链可变区的多核苷酸，包含编码所述抗体的重链和/或轻链可变区的多核苷酸的表达载体，包含所述载体的细胞，和通过自细胞表达所述抗体或片段来制备它们的方法。

Antibody against TIGIT

【技术实现步骤摘要】
针对TIGIT的抗体本申请是申请日为2015年12月22日，申请号为201580070988.1，专利技术名称为“针对TIGIT的抗体”的专利技术专利的分案申请。背景TIGIT(含Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)是一种共-抑制性受体蛋白，亦称为WUCAM、Vstm3或Vsig9。TIGIT在对T细胞上特异性表达的蛋白的基因组研究中被发现，和具有免疫球蛋白可变结构域、跨膜结构域和免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)，和包含PVR蛋白家族的标记序列元件。其已知与脊髓灰质炎病毒受体(PVR;CD155)和与nectin2(CD112)相互作用。参见例如Stengeletal.(2012)Proc.Nat’lAcad.Sci.(USA)19:5399;WO2006/124667;WO2009/126688。尽管PVR可与共活化受体DNAM-1(CD226)相互作用以增强肿瘤杀伤，但高亲和力TIGIT/PVR相互作用会抑制这样的杀伤，可用于阻止也表达PVR的正常(自身)细胞的杀伤。Stanietskyetal.(2009)Proc.Nat’lAcad.Sci.(USA)106:17858。这种抑制性相互作用的优势可能在抑制抗-自身免疫反应中是重要的，但在肿瘤情况下其抑制肿瘤根除。同前。TIGIT通过促进成熟免疫调节性树突细胞的产生来抑制T细胞活化。Yuetal.(2009)Nat.Immunol.10:48。TIGIT和其它这样的共-抑制性分子(例如，CTLA-4、PD-1、Lag3和BTLA)可在肿瘤细胞逃脱免疫监视中起作用。实验表明，PVR/CD155在黑素瘤细胞上(Inozumeetal.(2014)J.Invest.Dermatol.134:S121-Abstract693)和在各种其它肿瘤上过表达。可能的是，TIGIT/PVR相互作用可通过抑制T和NK细胞的抗-肿瘤反应，保护这样的肿瘤细胞免于免疫介导的根除。Stanietskyetal.(2009)Proc.Nat’lAcad.Sci.(USA)106:17858和Lozanoetal.(2012)J.Immunol.188:3869。其它实验已鉴定了调节T细胞(Tregs)的TIGIT+亚组，其选择性抑制Th1和Th17反应(Jolleretal.(2014)Immunity40:569)，表明抗-TIGIT抗体可增强抗-肿瘤免疫反应的备选机制。类似于其它共-抑制性受体例如CTLA-4、PD-1和BTLA，TIGIT可起“关闭”免疫反应的作用。同前。靶向CTLA-4(ipilimumab)和PD-1(nivolumab、pembrolizumab)的抗体已被批准用于治疗人癌症，证实了这种治疗途径。结合人TIGIT的抗体也可用于治疗癌症。参见例如WO2006/124667。在小鼠模型中，PD-L1和TIGIT二者的抗体阻断导致协同提高CD8+T细胞介导的肿瘤排斥。Groganetal.(2014)J.Immunol.192(1)Suppl.203.15;Johnstonetal.(2014)CancerCell26:1-15。在黑素瘤的动物模型中得到类似结果。Inozumeetal.(2014)J.Invest.Dermatol.134:S121-Abstract693。一些实验表明，仅在与TIGIT竞争结合PVR/CD155的共活化受体DNAM-1/CD226的存在下，TIGIT阻断有效增强抗-肿瘤CD8+T细胞反应。Johnstonetal.(2014)CancerCell26:1-15。最近的实验证实了肿瘤内细菌表达的Fap2蛋白可通过结合TIGIT来抑制NK细胞介导的肿瘤杀伤(Guretal.(2015)Immunity42:344)，表明清除这样的细菌，阻断TIGIT与Fap2的相互作用，或总体上阻断TIGIT的活性，可用于治疗癌症，例如，结肠直肠癌。Hampton(2015)JAMA313:1305。对治疗癌症和慢性病毒感染的改进方法，和用于所述方法的药物例如治疗性单克隆抗体，存在需要。用于这样的改进的治疗方法的药物可包含特异性结合TIGIT和逆转或部分逆转TIGIT-介导的抗-肿瘤或抗-病毒免疫反应的抑制的抗体或抗体片段。专利技术简述本专利技术提供用于癌症和慢性病毒感染的改进的药物和治疗方法，其包含结合huTIGIT的抗体或其抗原-结合片段。本文提供了分离的抗体，例如单克隆抗体，特别是人单克隆抗体，其特异性结合huTIGIT和具有需要的功能性质，例如特异性结合huTIGIT、结合猴TIGIT(例如，食蟹猴TIGIT)的高亲和力，阻断TIGIT与PVR和/或Nectin-2的结合的能力，阻断TIGIT与DNAM的相互作用的能力，或这些性质的任何组合。本专利技术进一步提供治疗癌症的改进方法和用于所述方法的治疗性抗体，包括其中TIGIT-介导的信号传导抑制抗-肿瘤免疫反应的癌症、其中TIGIT与共活化受体DNAM-1/CD226相互作用抑制抗-肿瘤免疫反应的肿瘤、其中表达TIGIT的调节T细胞抑制抗-肿瘤免疫反应的肿瘤，或其中TIGIT否则会抑制抗-肿瘤免疫反应的肿瘤。本专利技术还提供用于治疗其中TIGIT抑制抗-病毒免疫反应的慢性病毒感染的方法和治疗性抗体。在另一个方面，本专利技术涉及与具有本文公开的重链和轻链可变结构域序列的抗体竞争结合huTIGIT和/或交叉阻断具有本文公开的重链和轻链可变结构域序列的抗体与huTIGIT结合的抗体。在某些实施方案中，本专利技术的抗-TIGIT抗体或其抗原结合片段增强抗-肿瘤免疫反应，例如，抗原-特异性T细胞反应。在其它实施方案中，本专利技术的抗-TIGIT抗体或其抗原结合片段阻断TIGIT介导的抑制性信号传导，允许PVR/DNAM共刺激NK细胞，以增加NK-介导的抗-肿瘤反应杀伤。在又一实施方案中，本专利技术的抗-TIGIT抗体或其抗原结合片段减少否则会抑制抗-肿瘤免疫反应的肿瘤内的调节T细胞群。在又一实施方案中，形式为IgG1的本专利技术的抗-TIGIT抗体减少CD8+耗尽的T细胞和Tregs，允许流入新的未耗尽CD8+T细胞。在其它实施方案中，本专利技术的抗-TIGIT抗体或其抗原结合片段通过一种或多种上述机制起作用，因为这些机制不必然互相排斥。在某些实施方案中，本专利技术的抗-TIGIT抗体或其抗原结合片段不结合活化Fcγ受体(FcγR)，例如，在依赖于提高TIGIT-表达细胞的抗-肿瘤活性的实施方案中。在备选的实施方案中，本专利技术的抗-TIGIT抗体或其抗原结合片段结合一种或多种活化FcγR，例如，在依赖于杀伤TIGIT-表达细胞，例如耗尽CD8+T细胞或Tregs的实施方案中。本专利技术还提供分离的单克隆抗体(15A6)或其抗原结合片段，其特异性结合huTIGIT和包含重链CDRH1、CDRH2和CDRH3序列(分别包含SEQIDNO:14、15和16)和/或轻链CDRL1、CDRL2和CDRL3序列(分别包含SEQIDNO:17、18和19)。本专利技术还提供分离的单克隆抗体(22G2)或其抗原结合片段，其特异性结合huTIGIT和包含重链CDRH1、CDRH2和CDRH3序列(分别包含SEQIDNO:20、21和22)和/或轻链C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的抗体或其抗原结合片段，其与一种或多种选自22G2、14B2、13E6、6F9、11G11、10C9、16F6、11C9、27A9、10D7、20G6、24E8、24G1、27F1、15A6、4E4、13D1、9B11、10B8、19H2、8C8、17G4、25E7、26D8和16A8的抗体竞争结合人TIGIT (含Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)。

【技术特征摘要】
2014.12.23 US 62/0962671.分离的抗体或其抗原结合片段，其与一种或多种选自22G2、14B2、13E6、6F9、11G11、10C9、16F6、11C9、27A9、10D7、20G6、24E8、24G1、27F1、15A6、4E4、13D1、9B11、10B8、19H2、8C8、17G4、25E7、26D8和16A8的抗体竞争结合人TIGIT(含Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)。2.分离的抗体或其抗原结合片段，其在以下表位结合TIGIT(含Ig和ITIM结构域的人T细胞免疫受体)：a.包含序列NWEQQDQLLAICNADLGWH(SEQIDNO:38)和/或FCIYHTYPDGT(SEQIDNO:39)的表位(抗体22G2)；b.包含序列QVNWEQQDQLLAICNADLGWH(SEQIDNO:40)和/或HTYP(SEQIDNO:41)的表位(抗体11G11)；或c.包含序列NWEQQDQLLAICNADLGWH(SEQIDNO:38)、FCI和/或AEHGARFQ(SEQIDNO:43)的表位(抗体15A6)。3.分离的抗体或其抗原结合片段，其在包含序列LLAICNADLGWH(SEQIDNO:44)的表位结合TIGIT(含Ig和ITIM结构域的人T细胞免疫受体)。4.分离的抗体或其抗原结合片段，其结合TIGIT(含Ig和ITIM结构域的人T细胞免疫受体)，其中抗体重链和轻链可变结构域源自人重链和轻链V区种系序列组合V4-39/VA27、V4-61/VL6、V4-39/VL6或V1-69/VL15。5.分离的抗体或其抗原结合片段，其结合TIGIT(含Ig和ITIM结构域的人T细胞免疫受体)，其包含重链和轻链可变结构域，所述重链和轻链可变结构域包含选自以下的CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2和CDRL3序列：i)SEQIDNO:20–25;ii)SEQIDNO:14–...

【专利技术属性】
技术研发人员：MF毛雷尔，陈正辉提摩西，B德沃瓦，M斯里尼瓦桑，SH朱利恩，PO谢泼德，DF阿杜雷尔，I查克拉博尔蒂，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：美国,US