一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺制造技术

技术编号:22153586 阅读:34 留言:0更新日期:2019-09-21 05:44
本发明专利技术涉及一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺,包括以下步骤:预处理苦参叶,将苦参叶粉加入到柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲溶液中,并加入纤维素酶,进行酶解,二次提取离心得到残渣三和酸水,酸水合并至步骤D2中的滤液一中,将酸水和提取液一合并后,减压浓缩,浓缩至原体积的10%,获取总生物碱提取物,提纯分离生物碱。本发明专利技术从苦参叶中提取苦参生物总碱,且同时提纯黄酮类化合物,一次性提取分离两种有效物质,提高了苦参叶的利用率,而且先采用酶解法,将苦参叶中的细胞壁发生软化和膨胀等,改变,从而改变必报的通透性,有利于各种生物碱、黄酮类化合物最大限度的溶解出来,大大提高了其提纯效率。

Extraction, Separation and Purification of Total Alkaloids from Sophora flavescens

【技术实现步骤摘要】
一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺
本专利技术涉及苦参中生物总碱的提取
,具体涉及一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺。
技术介绍
苦参为豆科植物苦参(SoPHaraflavescensAit.)的干燥根,其性味苦,性寒,有小毒。作为传统的中药,临床上主要应用其根部,其主要成分含有苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐胺碱。在中医临床应用中,苦参与其他中草药配伍,可治疗多种疾病。通过现代医学对苦参药理毒性的全面分析和深入试验研究,使苦参的应用范围和领域扩大,苦参原料的用量也逐年增长。目前苦参中生物总碱的提取主要是从苦参干燥的根中提取,忽略了苦参总株的价值。苦参中各部位生物碱类型相似,含量差异明显,茎、叶均含有生物碱,茎叶中生物碱含量约为0.16%,且茎叶的纤维含量多,细胞壁厚,不容易提取,目前对于茎叶中生物碱的提取工艺研究较少,茎叶中还含有苦参总黄酮,苦参总黄酮提取物中主要包含降苦参酮、苦参酮、异苦参酮等二氢黄酮类化合物和三叶豆紫檀苷、黄腐醇、苦参啶等其他黄酮类化合物,两者均溶解于水或任意一种醇类、酮类及酯类溶剂,不易分离,且苦参总碱也不容易分离。
技术实现思路
为解决上述技术问题,本专利技术提供一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是:一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺,包括以下步骤:D1预处理苦参叶将采摘的苦参叶,经过磁选、色选去掉杂质后,晒干、研磨、过筛,苦参叶粉颗粒度在50-80目,备用;D2初步提取将苦参叶粉加入到柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中,并加入纤维素酶,混合均匀后常温浸泡,浸泡三次,每次1-4h,过滤后合并三次的残渣以及滤液,得到残渣一、提取液一,其中所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液的PH值为4.6-5.2,每1g苦参叶粉加入8-1.2mg纤维素酶;具体地,所述过滤采用离心、抽滤、超滤、压滤等方法,使用或者不使用以下任意一种澄清剂或其组合:醇沉剂,明胶,高岭土,各种树脂,聚乙二醇,聚乙三醇,壳聚糖以及天然澄清剂成品如101果汁澄清剂、ZTC+1天然澄清剂等。D3二次提取将残渣一中加入乙醇,超声溶解后离心,其中乙醇浓度为80-95%,离心后得到残渣二和乙醇溶解液,残渣二弃掉,乙醇溶解液回收溶剂至无醇味,加入体积为5-15倍量的0.3-1%hCl超声分散,离心得到残渣三和酸水,酸水合并至步骤D2中的滤液一中;具体地,所述残渣三水洗至中性,减压干燥,得到苦参总黄酮提取物。D4浓缩提取液将酸水和提取液一合并后,加入15%的石灰碱化,分层,取分层后的水层一,水层一中含有总生物碱,水层一中加入20%的NaOH,调节PH值至7.5,活性炭脱色,抽滤,得到提取液二,加入20%NaOH,调节PH值至9,减压浓缩,浓缩至原体积的10%;D5获取总生物碱提取物将浓缩液转入萃取罐中,采用氯仿萃取,分离后,弃掉水层,得到含有总生物碱的氯仿层;D6提纯分离生物碱将D5中得到的氯仿层加入乙醚振荡、静置,析出沉淀,抽滤后得到沉淀一和滤液一,将滤液一重复D5中上述操作两次,将其沉淀合并得到合并沉淀,以及合并后的滤液二,将合并沉淀用丙酮结晶,得到氧化苦参碱,将滤液二蒸发干燥,得到干燥物,干燥五种用石油醚回流提取,得到提取液,浓缩回收石油醚,放置抽滤,得到含有N-甲基金雀花碱的滤液,和苦参碱结晶。具体地,步骤D5中,将氯仿层减压、浓缩,干燥,得到生物总碱粗提取物。具体地,所述步骤D1中,将采摘的新鲜苦参叶放入阴凉地,防止曝晒失水和发热,用透气的竹篓或箩筐,防止挤压产生机械损伤和通气不良而红变;然后将鲜叶均匀摊放在竹帘或者竹筛上,置于空气流通,阴凉干燥处进行萎凋,萎凋时间为8-10h,脱水至苦参叶含水量至60-70%,避免苦参叶腐烂滋生细菌,影响提纯。具体地,所述步骤D6中石油醚回流提取的条件为,石油醚加热到30-60℃,40℃的水浴回流提取4次。本专利技术的有益效果:本专利技术从苦参叶中提取苦参生物总碱,且同时提纯黄酮类化合物,一次性提取分离两种有效物质,提高了苦参叶的利用率,而且先采用酶解法,将苦参叶中的细胞壁发生软化和膨胀等,改变,从而改变必报的通透性,有利于各种生物碱、黄酮类化合物最大限度的溶解出来,大大提高了其提纯效率,并利用溶剂提取法,提出总生物碱,利用总生物碱中各种生物碱在石油醚中不同的溶解度,分离提纯,减少氯仿的使用次数和用量。附图说明图1为本专利技术的一实施例的流程示意图。具体实施方式现在对本专利技术作进一步详细的说明。实施例1如图1所示的一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺,包括以下步骤:D1预处理苦参叶将采摘的苦参叶,经过磁选、色选去掉杂质后,晒干、研磨、过筛,苦参叶粉颗粒度在50-80目,备用;D2初步提取将1000g苦参叶粉加入到5L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中,并加入8g纤维素酶,混合均匀后常温浸泡,浸泡三次,每次1h,过滤后合并三次的残渣以及滤液,得到残渣一、提取液一,其中所述柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液的PH值为4.6;具体地,所述步骤D2中,使用或者不使用以下任意一种澄清剂或其组合:醇沉剂,明胶,高岭土,各种树脂,聚乙二醇,聚乙三醇,壳聚糖等。D3二次提取将残渣一中加入乙醇,超声溶解后离心,其中乙醇浓度为95%,离心后得到残渣二和乙醇溶解液,残渣二弃掉,乙醇溶解液回收溶剂至无醇味,加入体积为5倍量的0.3%hCl超声分散,离心得到残渣三和酸水,酸水合并至步骤D2中的滤液一中;具体地,所述残渣三水洗至中性,减压干燥,得到苦参总黄酮提取物。D4浓缩提取液将酸水和提取液一合并后,加入15%的石灰碱化,分层,取分层后的水层一,水层一中含有总生物碱,水层一中加入20%的NaOH,调节PH值至7.5,活性炭脱色,抽滤,得到提取液二,加入20%NaOH,调节PH值至9,减压浓缩,浓缩至原体积的10%;D5获取总生物碱提取物将浓缩液转入萃取罐中,采用氯仿萃取,分离后,弃掉水层,得到含有总生物碱的氯仿层;D6提纯分离生物碱将D5中得到的氯仿层加入5体积倍量的乙醚振荡、静置,析出沉淀,抽滤后得到沉淀一和滤液一,将滤液一重复D5中上述操作两次,将其沉淀合并得到合并沉淀,以及合并后的滤液二,将合并沉淀用丙酮结晶,得到氧化苦参碱,将滤液二蒸发干燥,得到干燥物,干燥物用石油醚回流提取,得到提取液,浓缩回收石油醚,放置抽滤,得到含有N-甲基金雀花碱的滤液和苦参碱结晶,其中氧化苦参碱得到1.491g,苦参碱得到0.098g。具体地,步骤D5中,将氯仿层减压、浓缩,干燥,得到生物总碱粗提取物。具体地,选用溶剂萃取法,将浓缩液转入萃取罐中,采用氯仿萃取,分离后,弃掉水层,将氯仿层减压、浓缩,干燥,得到生物总碱粗提取物。具体地,所述步骤D1中,将采摘的新鲜苦参叶放入阴凉地,防止曝晒失水和发热,用透气的竹篓或箩筐,防止挤压产生机械损伤和通气不良而红变;然后将鲜叶均匀摊放在竹帘或者竹筛上,置于空气流通,阴凉干燥处进行萎凋,萎凋时间为8-10h,脱水至苦参叶含水量至60-70%,避免苦参叶腐烂滋生细菌,影响提纯。具体地,所述步骤D6中石油醚回流提取的条件为,石油醚加热到30-60℃,40℃的水浴回流提取4次。实施例2如图1所示的一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺,包括以下步骤:D1预处理苦本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺,其特征在于:包括以下步骤:D1预处理苦参叶将采摘的苦参叶,经过磁选、色选去掉杂质后,晒干、研磨、过筛,苦参叶粉颗粒度在50‑80目,备用;D2初步提取将苦参叶粉加入到柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲溶液中,并加入纤维素酶,混合均匀后常温浸泡,浸泡三次,每次1‑4h,过滤后合并三次的残渣以及滤液,得到残渣一、提取液一;D3二次提取将残渣一中加入乙醇,超声溶解后离心,其中乙醇浓度为80‑95%,离心后得到残渣二和乙醇溶解液,残渣二弃掉,乙醇溶解液回收溶剂至无醇味,加入体积为5‑15倍量的0.3‑1%HCl超声分散,离心得到残渣三和酸水,酸水合并至步骤D2中的滤液一中;D4浓缩提取液将酸水和提取液一合并后,加入15%的石灰碱化,分层,取分层后的水层一,水层一中含有总生物碱,水层一中加入20%的NaOH,调节PH值至7.5,活性炭脱色,抽滤,得到提取液二,加入20%NaOH,调节PH值至9,减压浓缩,浓缩至原体积的10%;D5获取总生物碱提取物将浓缩液转入萃取罐中,采用氯仿萃取,分离后,弃掉水层,得到含有总生物碱的氯仿层;D6提纯分离生物碱将D5中得到的氯仿层加入乙醚振荡、静置,析出沉淀,抽滤后得到沉淀一和滤液一,将滤液一重复D5中上述操作两次,将其沉淀合并得到合并沉淀,以及合并后的滤液二,将合并沉淀用丙酮结晶,得到氧化苦参碱,将滤液二蒸发干燥,得到干燥物,干燥五种用石油醚回流提取,得到提取液,浓缩回收石油醚,放置抽滤,得到含有N‑甲基金雀花碱的滤液,和苦参碱结晶。...

【技术特征摘要】
1.一种苦参中生物总碱的提取及分离纯化工艺,其特征在于:包括以下步骤:D1预处理苦参叶将采摘的苦参叶,经过磁选、色选去掉杂质后,晒干、研磨、过筛,苦参叶粉颗粒度在50-80目,备用;D2初步提取将苦参叶粉加入到柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中,并加入纤维素酶,混合均匀后常温浸泡,浸泡三次,每次1-4h,过滤后合并三次的残渣以及滤液,得到残渣一、提取液一;D3二次提取将残渣一中加入乙醇,超声溶解后离心,其中乙醇浓度为80-95%,离心后得到残渣二和乙醇溶解液,残渣二弃掉,乙醇溶解液回收溶剂至无醇味,加入体积为5-15倍量的0.3-1%HCl超声分散,离心得到残渣三和酸水,酸水合并至步骤D2中的滤液一中;D4浓缩提取液将酸水和提取液一合并后,加入15%的石灰碱化,分层,取分层后的水层一,水层一中含有总生物碱,水层一中加入20%的NaOH,调节PH值至7.5,活性炭脱色,抽滤,得到提取液二,加入20%NaOH,调节PH值至9,减压浓缩,浓缩至原体积的10%;D5获取总生物碱提取物将浓缩液转入萃取罐中,采用氯仿萃取,分离后,弃掉水层,得到含有总生物碱的氯仿层;D6提纯分离生物碱将D5中得到的氯仿层加入乙醚振荡、静置,析出沉淀,抽滤后得到沉淀一和滤液一,将滤液一重复D5中上述操作两次,将其沉淀合并...

【专利技术属性】
技术研发人员:亓云吉
申请(专利权)人:山东花物堂生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:山东,37

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