一种激肽释放酶KLK7抑制物、制备方法和用途技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体是涉及到一种激肽释放酶KLK7抑制物、制备方法和用途，结构式如下：

A KLK7 inhibitor of kallikrein, its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种激肽释放酶KLK7抑制物、制备方法和用途
本专利技术属于医药
，具体是涉及到一种激肽释放酶KLK7抑制物、制备方法和用途。
技术介绍
激肽释放酶(Kallikrein,KLK)是丝氨酸蛋白酶家族的一员，多种KLK，尤其是KLK7在人类表皮中大量表达，为维持皮肤的正常生理活动发挥着重要作用。研究表明，特应性皮炎(atopicdermatitis,AD)作为一种与遗传有密切关系的炎性皮肤类疾病，与表皮中KLK7的活性的增加有着紧密的联系。特应性皮炎目前尚无根治的办法，KLK7是一种潜在的治疗特应性皮炎的药物靶标，因此研发KLK7的抑制剂将有助于为特应性皮炎等炎性皮肤病的临床治疗提供新的思路。用外源分子来抑制KLK7的活性将有助于控制皮肤脱屑的速度，减少炎症的发生，从而达到治疗特应性皮炎等皮肤病的目的，但至今尚未见有关KLK7抑制剂类药物用于临床治疗特应性皮炎的报道。目前国际上针对KLK抑制剂的研究大致可以分为四类：(1)蛋白质类大分子抑制剂。这类抑制剂以丝氨酸蛋白酶抑制剂SERPIN和KLK的天然抑制剂LETKI等为代表，这类抑制剂在体外实验中通常具有良好的抑制效果(Kd可达pM数量级)与特应性，但由于自身分子量过大，其生物利用度很低。同时它们自身的蛋白质属性也导致其稳定性较差；(2)多肽类抑制剂。以亮太素(leupeptin)、向日葵胰蛋白酶抑制剂(sunflowertrypsininhibitor,SFTI)、抗痛素(antipain)等为代表。这类抑制剂与蛋白质类抑制剂类似，其生物利用度较低；(3)通用型抑制剂。这类抑制剂以DFP、PSMF、CMK等小分子化合物为代表，其抑制效果与特应性通常都不够理想，因此这类抑制剂常作为研究丝氨酸蛋白酶分子结构的工具化合物，用于解析丝氨酸蛋白酶的晶体结构。(4)特应性有机小分子化合物类抑制剂。通常这类抑制剂相对分子质量小(<500000),具有良好的生物利用度与成药性，其自身化学性质也相对稳定。具有潜在成为药物治疗相关疾病的能力。在有机小分子化合物类抑制剂中，关于靶向KLK7的特应性抑制剂的研发只有零星的报道。如诺华制药于2009年公开的专利(WO2009/000878A1)中描述了其发现的KLK7小分子抑制剂。该专利中诺华制药采用不同化学试剂处理小鼠表皮(S-Sqame○RR、TPA、DNFB)模拟特应性皮炎使其蜕皮并发生炎症，从而验证KLK7抑制剂对于小鼠皮肤的修复作用，抗炎以及抗过敏作用，事实证明均为有效。随后巴西科学家Puzer研究组从天然化合物中得到的异香豆素类抑制剂，以及我们在前面研究中所开发的KLK7的可逆抑制剂、三氮唑类共价可逆抑制剂，以及香豆素类自杀式底物抑制剂。随着KLK7活性异常在特应性皮炎发生与发展过程中的重要作用及其机制被逐渐阐明，人们也相继将目光投向了靶向KLK7抑制剂的开发用于治疗特应性皮炎。CN106518868B-激肽释放酶7小分子抑制剂及其制备方法、用途，公开了一种有机小分子抑制剂，结构式如下：具有一定的抑制效果。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种激肽释放酶KLK7抑制物、制备方法和用途，其可以有效抑制KLK7，特异(应)性强，能有效的治疗特应性皮炎。本专利技术的内容包括一种激肽释放酶KLK7抑制物，结构式如下：本专利技术提供一种激肽释放酶KLK7抑制物的制备方法，包括如下步骤：化合物1的制备包括如下步骤：将1-氨基-2,4-二溴蒽醌、碳酸铜、醋酸钾、邻氨基笨甲酸混合，于130-150℃反应，然后冷却到75-85℃，加入甲醇；过滤，用甲醇清洗，干燥；将粗固体从乙酸中重结晶，得到化合物1。化合物2的制备包括如下步骤：化合物1加入乙酸重，并加入亚硝酸戊酯，搅拌，过滤，将叠氮化钠加入到过滤后的溶液中，反应后稀释，沉淀，过滤，干燥，在甲苯中回流，得到化合物2。化合物3的制备包括如下步骤：将无水哌嗪、碘化钾、甲苯和乙醇混合，搅拌，控制温度在18-12℃，向其中滴加化合物2和乙醇，滴毕，升温至50℃保温，TLC跟踪反应至结束；搅拌降温，抽滤，向滤液中加入冰水去除未反应的哌嗪，用二氯乙烷萃取，得到化合物3。化合物4的制备包括如下步骤：将化合物3和胡椒醛混合，加无水甲醇搅拌溶解，加热回流后，冷却至室温，得到黄色Schiff碱溶液；室温下，分批加入还原剂硼氢化钠；加浓盐酸中和多余的还原剂，反应后产生白色固体，过滤；溶液用氯仿萃取，取氯仿层；往氯仿层中加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸馏，得到化合物4。本专利技术还提供一种激肽释放酶KLK7抑制物在用于制备激肽释放酶KLK7抑制剂或者特应性皮炎药物方面的用途。本专利技术的有益效果是，本专利技术化合物中包含有蒽醌、哌嗪、苯基等结构，相对于现有的有机小分子化合物类抑制剂来说，具有一定的区别和特色，本专利技术化合物对KLK7的IC50值达到了28.955μM，具有很好的前景，为进一步开发治疗特应性皮炎药物奠定基础。附图说明图1为本专利技术的化合物的核磁共振氢谱图。图2为本专利技术化合物对KLK7的抑制曲线。具体实施方式实施例11、1-氨基-2,4-二溴蒽醌(0.13mol,50g)、碳酸铜(0.03mol,4g)、醋酸钾(0.46mol,45g)、及邻氨基笨甲酸(0.14mol,19g)在140℃下被还原为12H。反应冷却到80℃，加入甲醇。蓝色的固体被过滤掉，用甲醇清洗，空气干燥。将粗固体从乙酸中重结晶，得到蓝色固体(46g，81％)。2、0.1mol物质1(C21H9O4N2Br)加入到500毫升乙酸中，并加入0.12摩尔亚硝酸戊酯在室温下搅拌，过滤，0.12mol的NaN3加入到过滤后的溶液中，混合物反应30分钟，然后用1升水稀释，沉淀再通过过滤、干燥和在100-120mL的甲苯中回流1.5-2h得到物质2。3、向250mL四口烧瓶中加入无水哌嗪(36.7g，0.43mol)，KI(38.4g，0.23mol)，甲苯(60g，0.65mol)和乙醇(30g，0.65mol)，搅拌冰浴下降温至10℃，向烧瓶中缓慢滴加物质2(C21H11O4N2Br)(43.5g，0.10mol)和乙醇(30g，0.65mol)，30min滴毕，升温至50℃保温，TLC(展开剂石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)跟踪反应至结束。搅拌降温，抽滤，向滤液中加入100mL冰水去除未反应的哌嗪，用40mL×2二氯乙烷萃取。4、合成方法：在500ml的圆底烧瓶中加物质3(C25H20O4N4)4.40mg(10mmol)和胡椒醛(C8H6O3)0.15mg(10mmol)，加150ml无水甲醇搅拌溶解，加热回流3h后，冷却至室温，得到黄色Schiff碱溶液。室温下，在烧瓶中分批加入还原剂硼氢化钠1.52g(40mmol)，黄色Schiff碱溶液慢慢变为无色；加浓HCl中和多余的还原剂，反应后产生大量白色固体，过滤；溶液用100ml氯仿，萃取3次，取氯仿层；往氯仿层中加入无水Na2SO4干燥，充分干燥2h后过滤；减压蒸馏，得到物质4(C33H27O6N4))。1HNMR(DMSO-d6,500MHz)δ12.30(s,1H),10.98(s,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),8.18(d,J＝7.5Hz,1H),8.02(d本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种激肽释放酶KLK7抑制物，其特征是，结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种激肽释放酶KLK7抑制物，其特征是，结构式如下：2.一种如权利要求1所述的激肽释放酶KLK7抑制物的制备方法，其特征是，包括如下步骤：3.如权利要求2所述的激肽释放酶KLK7抑制物的制备方法，其特征是，化合物1的制备包括如下步骤：将1-氨基-2,4-二溴蒽醌、碳酸铜、醋酸钾、邻氨基笨甲酸混合，于130-150℃反应，然后冷却到75-85℃，加入甲醇；过滤，用甲醇清洗，干燥；将粗固体从乙酸中重结晶，得到化合物1。4.如权利要求2所述的激肽释放酶KLK7抑制物的制备方法，其特征是，化合物2的制备包括如下步骤：化合物1加入乙酸重，并加入亚硝酸戊酯，搅拌，过滤，将叠氮化钠加入到过滤后的溶液中，反应后稀释，沉淀，过滤，干燥，在甲苯中回流，得到化合物2。5.如权利要求2所述的激肽释放酶KLK7抑制物的制备方法，其特征是...

【专利技术属性】
技术研发人员：何丽芳，王芳宇，杨海，唐青海，贺楚华，王均匀，严加林，
申请(专利权)人：衡阳师范学院，
类型：发明
国别省市：湖南,43