一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物及其应用制造技术

一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物及其应用，其特征在于该标志物为miR‑126‑5p或BCAR3。所述的BCAR3在制备用于诊断和/或预后评估内异症的试剂盒中的应用。所述的BCAR3为子宫内膜异位症疾病风险评估的生物标志物。所述的miR‑126‑5p或BCAR3的重组病毒载体制备具有抑制内异症功能的产品中的应用。所述的miR‑126‑5p或BCAR3的重组病毒载体，用于制备预防和/或治疗内异症的药物。本发明专利技术提供的miR‑126‑5p和BCAR3可以作为一种新的生物标志物，应用于内异症的诊断和/或预后评估；而与之相应的miR‑126‑5p agomir和BCAR3的重组慢病毒载体，可以作为一种新型的药物，对内异症具有潜在的预防和治疗价值。

A Diagnostic and Prognostic Marker of Endometriosis and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物及其应用
本专利技术属于医学领域和生物
，具体涉及BCAR3基因作为子宫内膜异位症诊断、预后以及标志物及治疗药物的应用，可根据个体BCAR3基因在子宫在位内膜中表达水平进行子宫内膜异位症的诊断及病情发展的判断。
技术介绍
子宫内膜异位症(endometriosis，EMs，简称内异症)是妇科常见病及难治病，它虽为雌激素依赖的良性疾病，但有病灶分布广泛、形态多样、局部侵袭、远处转移及复发等多种类似恶性肿瘤的生物学行为。内异症发病机制众说纷纭，其中“经血逆流学说”是解释其发病机制的经典学说，但无法解释的是，经血逆流是生育年龄女性常见生理现象，发生率为90％左右，而内异症发生率仅为10％-15％，说明内异症在位内膜基因表达谱与正常内膜相比存在显著差异，细胞粘附、侵袭等相关基因表达紊乱导致在位细胞功能改变，形成异位种植的基本条件。同时，自身免疫功能异常及异位内膜雌激素代谢增强等同样在内异症发生中起重要作用。近年来，microRNA作为调控基因表达的小RNA，在疾病发生机理中的源头作用受到关注，microRNA可通过与靶mRNA3’非编码区(3’UTRs)不完全互补配对，负向调控靶基因表达。本课题组前期研究证明：miR-126-3p在内异症在位内膜间质细胞中低表达导致其侵袭性增强。miR-126-5p及miR-126-3p来自同一前体pre-miR-126，在多种组织及细胞中表达水平相当，变化趋势相同，发挥相似的功能。miR-126-5p在多种癌症中低表达，其本身可作为抑癌基因抑制肿瘤细胞迁移及侵袭。生物信息学预测软件结果显示BCAR3基因是miR-126-5p下游靶标之一。本研究证实低表达可促进内异症在位内膜间质细胞迁移及侵袭能力；miR-126-5p可以负向调控BCAR3表达及对间质细胞的迁移及侵袭的影响。BCAR3(Breastcanceranti-estrogenresistance3)基因，又称AND-34或NSP2，属NSP(novelSrchomology2(SH2)-containingprotein)家族。BCAR3蛋白能在活体外诱导雌激素依赖性乳腺癌细胞对抗雌激素药物产生耐药，是导致雌激素受体阳性乳腺癌患者抗雌激素药物耐药而使内分泌治疗失败的重要原因之一。异位内膜局部抗雌激素作用是避免内异症发生的保护因素，而局部抗雌激素作用被抑制将促进异位病灶形成，那么，BCAR3作为候选基因之一值得探讨。BCAR3异常高表达还可诱导细胞骨架重排，促进细胞粘附、迁移及侵袭，BCAR3已被报道高表达于乳腺癌、卵巢癌及多数内膜癌细胞中，但BCAR3在内异症中的作用尚无报道，本次研究证实BCAR3高表达可促进内异症在位内膜间质细胞迁移及侵袭能力。子宫内膜异位症是具有侵袭、种植、复发及广泛生长等类似于恶性肿瘤生物学行为的疑难病及常见病，且具有恶变倾向。主要临床症状表现为继发性痛经进行性加重、慢性盆腔疼痛、不孕等。并且，因其特有的生物学发展特性，造成临床手术后复发风险大，不孕率增加。因此急需获得新的标志物在内异症的诊断及预后过程中为临床提供参考，在相同高危因素作用下，在位内膜与异位内膜存在一致的病理性增殖变化趋势，甚至异位内膜较在位内膜对高危因素更敏感。因此miR-126-5p和BCAR3在内异症在位内膜中的表达情况可以作为预测内异症风险及诊断的标志物，miR-126-5p和BCAR3的干扰物可以作为药物在内异症治疗中发挥作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物，miR-126-5p和BCAR3在内异症中均为差异表达基因，二者在内异症异位内膜及在位内膜中的表达与正常内膜中均存在显著差异，因此，miR-126-5p和BCAR3参与内异症发生。阐明miR-126-5p和BCAR3在内异症中的作用和机理对开发以miR-126-5p和BCAR3为策略的内异症的诊断、预后具有及其重要的意义和应用前景。本专利技术的另一目的在于提供了miR-126-5p和BCAR3作为子宫内膜异位症治疗药物的应用。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案。一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物及其应用，其特征在于该标志物为miR-126-5p或BCAR3。所述的BCAR3在制备用于诊断和/或预后评估内异症的试剂盒中的应用。所述的BCAR3为子宫内膜异位症疾病风险评估的生物标志物。所述的miR-126-5p或BCAR3的重组病毒载体制备具有抑制内异症功能的产品中的应用。所述的miR-126-5p或BCAR3的重组病毒载体，用于制备预防和/或治疗内异症的药物。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下。本专利技术提供的BCAR3基因在内异症异位内膜及在位内膜中均高表达，其中III-IV期患者表达水平高于I-II期患者；同时发现BCAR3在上皮细胞及间质细胞中的表达模式存在差异：上皮细胞中，BCAR3在异位内膜上皮细胞中高表达，在在位内膜上皮细胞与正常对照相比无明显差异；间质细胞中，BCAR3表达量依次为：异位内膜最高，在位内膜次之，而正常内膜最低，三者差异明显。BCAR3检测试剂盒对BCAR3在子宫内膜中表达水平进行特异性的检测能达到到诊断和/或预后评估内异症的目的，此外，可以评估子宫内膜异位症的风险；体外细胞实验显示，miR-126-5p低表达、BCAR3高表达可促进内异症在位内膜间质细胞迁移及侵袭能力；miR-126-5p可以负向调控BCAR3表达及对间质细胞的迁移及侵袭的影响。miR-126-5pagomir和靶向敲低BCAR3的重组慢病毒载体通过抑制BCAR3的表达，能够起到抑制内异症细胞侵袭和迀移，以及促进细胞凋亡起到抗肿瘤作用；将miR-126-5pagomir和BCAR3的重组慢病毒载体作为药物，导入体内，对内异症将具有预防及治疗作用。因此，miR-126-5p和BCAR3可以作为一种新的生物标志物，应用于内异症的诊断和/或预后评估；而与之相应的miR-126-5pagomir和BCAR3的重组慢病毒载体，可以作为一种新型的药物，对内异症具有潜在的预防和治疗价值。附图说明图1是内异症异位内膜及在位内膜BCAR3蛋白同时表达于内膜上皮及间质细胞。上皮细胞中：异位内膜表达量明显高于在位内膜(p<0.05)，在位内膜和正常子宫内膜比较无显著差别；而在间质细胞中，异位内膜表达量最高，在位内膜组次之，正常子宫内膜组最低，三者间差别有统计学意义(p<0.01)。图2是异位内膜、在位内膜、正常内膜组BCAR3蛋白相对表达水平分别为1.09±0.10、0.82±0.07、0.40±0.05，有非常显著统计学差异，p<0.01。III-IV期内异症患者在位内膜及异位内膜中，BCAR3蛋白表达水平较I-II期患者增高，p<0.05。图3是异位内膜、在位内膜、正常内膜组BCAR3mRNA相对表达水平分别为1.75±0.09、1.53±0.07、1.16±0.14,有显著统计学差异，p<0.05。III-IV期与I-II期内异症患者在位内膜及异位内膜中，BCAR3mRNA表达水平相似。图4是内异症异位内膜及在位内膜中miR-126-5p的表达情况，异位内膜组(0.36±本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物，其特征在于该标志物为miR‑126‑5p或BCAR3。

【技术特征摘要】
1.一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物，其特征在于该标志物为miR-126-5p或BCAR3。2.根据权利要求1所述的一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物，其特征在于所述的BCAR3为子宫内膜异位症疾病风险评估的生物标志物。3.根据权利要求1所述的一种子宫内膜异位症诊断、预后标志物，其特征在于所述的BCAR3在制备用于诊断和/或预后评估内异...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丹波，
申请(专利权)人：辽宁省肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：辽宁,21