用于早期诊断骨科疾病的分子标志物制造技术

本发明专利技术公开了用于早期诊断骨科疾病的分子标志物，该分子标志物是LOC105373465。男性骨质疏松症患者的血液中LOC105373465含量与正常人之间存在显著差异，根据差异可以区分骨质疏松症患者和非骨质疏松症患者。本发明专利技术还公开了男性骨质疏松症的诊断产品，该诊断产品可以通过检测血液中LOC105373465来实现骨质疏松症的诊断目的。

Molecular markers for early diagnosis of orthopaedic diseases

【技术实现步骤摘要】
用于早期诊断骨科疾病的分子标志物
本专利技术属于生物医学领域，涉及早期诊断骨科疾病的分子标志物，具体涉及LOC105373465在诊断男性骨质疏松症中的用途。
技术介绍
骨质疏松症是以骨量减少及骨组织微结构退变为特征的一种全身性骨骼疾病，伴有骨脆性增加、易发生骨折，常"静悄悄"发病。一旦被发现，多已发展到一定程度。原发性骨质疏松最主要的两个类型为：女性绝经期后骨质疏松和老年性骨质疏松。而与颇受重视的女性骨质疏松不同，男性骨质疏松发病原因多样、骨折发生率及骨折后相关的死亡率往往更高。原发性骨质疏松主要是随年龄增加，体内性激素突然减少及生理性退行性变所致。由于雌激素不仅可以抑制破骨细胞对骨质的吸收，而且可促进胶原合成并有利于骨的形成，所以随着绝经期后性激素水平的下降，骨质疏松的发病率女性远高于男性(女男＝61)。与女性绝经期后50～70岁的发病高峰相比，男性骨质疏松常晚于女性10年左右，这主要是由于男性对雌激素的依赖水平较低，且全身骨量较女性多8％～10％有关。美国患有骨质疏松症的男性占总人口的3％～6％，我国没有确切数据报告，但发病率应不低于这一比例，并将随着人口老龄化逐年增高。与女性骨质疏松相同，普通x线仍是诊断男性骨质疏松和相关骨折的必要手段。首要表现为脊柱和骨盆的骨质密度减低。椎体骨皮质变薄，横行骨小梁减少或消失，纵行骨小梁相对明显，严重时椎体内结构消失；椎体变扁，其上下缘内凹、椎间隙增宽，椎体呈双凹状，常因轻微外伤而压缩呈楔形。在长骨上可见骨小梁变细、数量减少、骨皮质变薄和出现分层现象。严重时可在弥漫性骨质密度减低的基础上出现散在分布的数毫米大小的点状透亮区，其边界清楚或模糊，易误诊为骨质破坏。但X线平片对诊断骨质疏松的敏感性和准确性低，对骨质疏松的早期诊断帮助不大。因此亟待开发一种在骨质疏松症早期即可诊断骨质疏松症的方法。在分子水平上对骨质疏松症进行诊断已成为未来的发展趋势，越来越多的专利技术人在该领域进行了专利布局，如专利：201510725408.X201711476456.5201510629348.1201610115194.9201610116151.2等。上述专利研究方向为基因与骨质疏松症诊断的关系，但还未见研究非编码RNA与骨质疏松症诊断的关系。自1939年Waddington提出表观遗传学(Epigenetics)的概念以来，其已逐渐成为生命科学研究领域的前沿。表观遗传学是指不依赖于DNA序列改变的可遗传的基因表达变化的学科。表观遗传学包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA调控的范畴。近年来，越来越多的研究表明，非编码RNA调控在肿瘤发生发展中具有重要的作用。人类基因组中研究最多最好的是编码蛋白的基因，但这部分基因只占据了人类基因组的1.5-2％。基因组中约70-90％的基因组DNA被转录但是不编码蛋白质，其转录产物被认为是“暗物质”或“垃圾”。(JohnnyT.Y.Kung,DavidColognori,JeannieT.Lee.LongNoncodingRNAs:Past,Present,andFuture.Genetics.2013.193:651–669.ManelEsteller.Non-codingRNAsinhumandisease.NATUREREVIEWS|GENETICS.2011.12:861-874.)近些年越来越多的研究发现这些转录产物可以参与到细胞分裂、分化等生命活动，具有重要的生物学功能。这些不编码蛋白的转录本被称为非编码RNA。非编码RNA包括小非编码RNA和长链非编码RNA两大部分。根据长度和生源分类，小非编码RNA包括miRNA、siRNA、piRNA等。长链非编码RNA是长度大于200nt并且不能编码功能性蛋白的一类转录本。大多数的非编码RNA具有poly(A)尾。(TimR.Mercer,MarcelE.DingerandJohnS.Mattick.Longnon-codingRNAs:insightsintofunctions.NATUREREVIEWS|GENETICS.2009.10(3):155-159.ManelEsteller.Non-codingRNAsinhumandisease.NATUREEVIEWS|GENETICS.2011.12:861-874.CarlErnst.CynthiaC.Morton.Identificationandfunctionoflongnon-codingRNA.FrontiersinCellularNeuroscience.2013.7(168):1-9.)越来越多的研究显示，长链非编码RNA参与到了染色体的修饰、转录调控、转录后调控等重要的生物学过程，同时对于疾病的发生发展有着重要的调控作用。(TimR.Mercer,MarcelE.DingerandJohnS.Mattick.Longnon-codingRNAs:insightsintounctions.NATUREREVIEWS|GENETICS.2009.10(3):155-159.)随着研究技术的发展，尤其是二代测序技术和芯片技术的日臻成熟。越来越多的长链非编码RNA被发现，但是其功能的研究仍不是很清楚。(JohnRPrensner,MatthewKIyer,OAlejandroBalbinetal.transcriptomesequencingacrossaprostatecancercohortidentifiesPCAT-1,anunannotatedlincRNAimplicatedindiseaseprogression.2011.29(8):742-750.JiagenLi,1ZhaoliChen,LiqingTian.LncRNAprofilestudyrevealsathree-lncRNAsignatureassociatedwiththesurvivalofpatientswithoesophagealsquamouscellcarcinoma.Gut2014.0:1–11.)有研究显示，长链非编码RNA参与到了细胞的增殖、细胞周期、细胞衰老和凋亡等生物学过程。(Maruyama,R.andH.Suzuki,LongnoncodingRNAinvolvementincancer.BMBRep.2012.45(11):604-611.)在疾病的发生发展过程中具有重要的作用。本申请的专利技术人为了填补目前的技术空白，利用芯片筛选与骨质疏松症相关的非编码RNA，并进行了相关验证，为临床上进行分子诊断提供了一种新的策略和方法。
技术实现思路
本专利技术所要解决的一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种与男性骨质疏松症诊断相关的长链非编码RNA标志物。本专利技术所要解决的另一个技术问题是提供一种上述lncRNA标志物的检测方法，该检测方法不直接用于疾病的诊断与治疗。本专利技术所要解决的又一个技术问题是提供一种上述lncRNA标志物在制备诊断男性骨质疏松症的产品中的应用。本专利技术为解决上述技术问题，采用了如下技术方案：本专利技术一方面，提供了一种与男性骨质疏松症诊断相关的分离的长链非编码RNA，所述长链非编码RNA是LOC1053734本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的长链非编码RNA，其特征在于，所述长链非编码RNA是LOC105373465。

【技术特征摘要】
1.一种分离的长链非编码RNA，其特征在于，所述长链非编码RNA是LOC105373465。2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸能被人细胞转录成权利要求1所述的长链非编码RNA。3.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸，或表达权利要求1所述的长链非编码RNA。4.一种试剂，其特征在于，所述试剂是能够检测权利要求1所述的长链非编码RNA表达量的试剂。5.一种诊断骨质疏松症的芯片，其特征在于，所述芯片包括固相载体以及以及有序固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针特异性地对应于权利要求1所述的长链非编码RNA。6.权利要求5所述的芯片...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴韦强，田清松，邢光杰，
申请(专利权)人：昌乐县人民医院，
类型：发明
国别省市：山东,37