盐红菌Halorubrum sp.HRM-150及其发酵生产类胡萝卜素的方法技术

本发明专利技术涉及一株盐红菌Halorubrum sp.HRM‑150菌株及利用所述菌株发酵生产类胡萝卜素的方法，属于天然类胡萝卜素生产技术领域。本发明专利技术所述盐红菌Halorubrum sp.HRM‑150菌株的保藏编号为CGMCC No.17350。本发明专利技术提供的盐红菌Halorubrum sp.HRM‑150菌株为极端嗜盐古菌，将所述盐红菌Halorubrum sp.HRM‑150菌株采用连续发酵的方式进行发酵，得到的发酵菌体湿重高达20g/L，色素含量高达1.25％ww。

Halorubrum sp. HRM-150 and its fermentation method for carotenoid production

【技术实现步骤摘要】
盐红菌Halorubrumsp.HRM-150及其发酵生产类胡萝卜素的方法
本专利技术涉及天然类胡萝卜素生产
，具体涉及一株盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株及利用盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株发酵生产类胡萝卜素的方法。
技术介绍
类胡萝卜素(Carotenoids)是碳氢类胡萝卜素(carotenes)和含氧类胡萝卜素(xanthophylls)两大类色素的总称，一般由8个类异戊二烯单位组成，呈现黄色、橙红色或者红色。天然类胡萝卜素的主要来源于植物、动物和微生物，可用作着色剂、和抗氧化剂，在提高机体免疫力、抑制肿瘤细胞生长等方面具有广阔的应用前景。菌红素作为类胡萝卜素中的一类少见的羟基化C50类胡萝卜素，属于高碳类胡萝卜素。菌红素较β-胡萝卜素清除羟自由基的能力更强，且其抗氧化能力比β-胡萝卜素高出50％。但目前未见一种利用微生物发酵生产类胡萝卜素的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株及其发酵生产类胡萝卜素的方法。本专利技术提供的菌株能够生产类胡萝卜素。本专利技术提供了一株盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株，保藏编号为CGMCCNo.17350。本专利技术还提供了上述技术方案所述菌株在生产类胡萝卜素中的应用。优选的是，所述类胡萝卜素包括菌红素、单脱水菌红素、番茄红素和β-胡萝卜素。本专利技术还提供了上述技术方案所述菌株生产类胡萝卜素的方法，包括以下步骤：1)将盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株接种到发酵培养基中进行连续发酵培养；所述发酵培养基含质量分数为1％的氮源和质量分数为1％的碳源，盐度为150～250；所述发酵培养的条件为：起始转速200rpm，至对数生长期转速升高至400rpm，发酵至50～54h时补加碳源，80～84h结束发酵；2)收集菌体，加入蒸馏水，得到细胞裂解液；3)将细胞裂解液、三氯甲烷和甲醇以1:1:2的体积比混合，震荡，静置4h以上，收集下层有机相，将所述有机相进行旋蒸浓缩，利用氮气去除残余溶剂。优选的是，步骤1)所述氮源包括酵母提取物和酸水解酪蛋白。优选的是，步骤1)所述碳源包括可溶性淀粉。优选的是，步骤1)所述补加为补加发酵培养基的质量分数为1％的碳源。优选的是，步骤2)所述收集菌体的条件为：在4℃下8000rpm离心10min，取沉淀。优选的是，步骤3)所述旋蒸浓缩的水浴温度为30～35℃，转速为100rpm。本专利技术提供了一株盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株。本专利技术提供的HRM-150菌株为极端嗜盐菌，将所述盐红菌属古菌HRM-150菌株采用连续发酵的方式进行发酵，得到的发酵菌体湿重高达20g/L，色素含量高达1.25％ww。附图说明图1为本专利技术提供的HRM-150菌落形态；图2为本专利技术提供的HRM-150菌株电子显微镜图片；图3为本专利技术提供的基于16SrRNA片段序列的HRM-150系统育树分析；图4为本专利技术是实施例1提供的HRM-150菌株在不同培养条件下的生长曲线；图5为本专利技术是实施例1提供的HRM-150菌株在不同培养条件下的菌体湿重情况；图6为本专利技术是实施例1提供的HRM-150菌体色素粗提物的TLC以及硅胶柱层析分离结果；图7为本专利技术是实施例1提供的色素组分抗氧化水平测试结果。生物保藏信息盐红菌Halorubrumsp.，菌株编号为HRM-150，保藏地点为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏时间为2019年3月18日，保藏编号为CGMCCNo.17350。具体实施方式本专利技术提供了一株盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株，保藏编号为CGMCCNo.17350。在本专利技术中，所述盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株的菌落形态图如图1所示，菌落为红色，圆形，光滑；菌株电子显微镜图片如图2所示，细胞为短棒状。在本专利技术中，所述盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株的16SrRNA序列如SEQIDNO.1所示，其16SrRNA基因序列全长如下：GATTCGACGTTCGTGGAACGCCTCATCCGGACCTCACTCGGGTGCTTTGACGGGCGGTGTGTGCAAGGAGCAGGGACGTATTCACCGCGCGCTTGTGACACGCGATTACTACCGAATCCAGCTTCATGTGGGCGAGTTGCAGCCCACAATCCGAACTACGATCGAGTTTCTGAGATTACCGTCTCCTTTCGGAGTTGGAACCCTTTGTCTCGACCATTGTAGCCCGCGTGTTGCCCAGCACATTCGGGGCATACTGACCTACCGTTGCCCGTTCCTTCCTCCGTGTTAGCCACGGCGGTCCCCCTACTGTCCCCAGCTACCTCGCGGTACTGCTGGCAAGTAAGGGTGCGGGTCTCGCTCGTTGCCTGACTTAACAGGACGCCTCACGGTACGAGCTGACGGCGGCCATGCACCTCCTCTCTGAAACTCGGACAAGGTCATCAACCTGGTCGTCATTATTACAGTCGATGCTGGTGAGATGTCCGGCGTTGAGTCCAATTAAACCGCAGGCTCCTCCGGTTGTAGTGCTCCCCCGCCAATTCCTTTAAGTTTCATCCTTGCGGACGTACTTCCCAGGCGGTCTGCTTAGCGGCTTCCCTACGGCACAGCACCCACTCGTAGTGGGAGCCACACCTAGCAGACATTGTTTACGGCCAGGACTACCCGGGTATCTAATCCGGTTCGAGACCCTGGCTTTCGTCCCTCACTGTCGGATCCGTCCTCGCGACGTGCTTTCGCCATCGGCGGTCCGTCCAGGATTACGGGATTTCACTCCTACCCCGGACGTACCCGTCGCGCCTTCCGGTCCCAAGCCACGCAGTTTCTACCGGGCGCCCACCTGTTGGGCAGGTGGATTTCCCGATGGACTTGCGCGGCCAGCTACGGACGCTTTAGGCCCAATAAGATCGGCCATCACTTGGGCTGCCGGTATTACCGCGGCGGCTGGCACCGGTCTTGCCCAGCCCTTATTCTGGTACCACCTTACGGTACCGAAAAGCACAGGCGCTATGCCTGTGCACTTGGGATCCCCCTATCGCACTGTCGTGCAGTGTAAAGGTTTCGCGCCTGCTGCGCCCCGTAGGGCCCGGAATCTTGTCTCAGATTCCGTCTCTGGGTTCTCACTCTCATGACCCATACCGATTATTGGCACGGTGGGCCGTTACCCCACCGTCTACCTAATCGGCCGCAGCCACATCCTTCGGCGCCGGAGCGTTTGGCATACCACTCATTCCAGTGGTGGTATGGTATACACTATTAGCCTCA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株盐红菌Halorubrumsp.HRM‑150菌株，保藏编号为CGMCC No.17350。

【技术特征摘要】
1.一株盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株，保藏编号为CGMCCNo.17350。2.权利要求1所述菌株在生产类胡萝卜素中的应用。3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述类胡萝卜素包括菌红素、单脱水菌红素、番茄红素和β-胡萝卜素。4.权利要求1所述菌株生产类胡萝卜素的方法，包括以下步骤：1)将盐红菌Halorubrumsp.HRM-150菌株接种到发酵培养基中进行连续发酵培养；所述发酵培养基含质量分数为1％的氮源和质量分数为1％的碳源，盐度为150～250；所述发酵培养的条件为：起始转速200rpm，至对数生长期转速升高至400rpm，发酵至50～54h时补加碳源，80～84h结束发酵；2)收集菌体，加入蒸馏水，得...

【专利技术属性】
技术研发人员：隋丽英，解伟，王振乾，高美荣，路万龙，任北妮，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津,12