一种抗肠出血性大肠杆菌的格氏乳杆菌及制备的禽用复合益生菌制剂及应用制造技术

本发明专利技术涉及生物制剂技术领域，公开了一种抗肠出血性大肠杆菌的格氏乳杆菌及制备的禽用复合益生菌制剂及应用。本发明专利技术提供的格氏乳杆菌（Lactobacillus gasseri）YD2‑2，保藏编号为CCTCC NO：M 2019340，特别是对肠出血性大肠杆菌具备高效抑菌性，将其与其他菌株混配后，可制备成抗肠出血性禽用复合益生菌制剂，该制剂能够促进动物的生长，改善动物肠道微生态环境，促进肠粘膜的发育，增加肠粘膜可溶性IgA含量和血清IgG的含量，减少抗生素作为预防和治疗动物疾病的作用在饲料中的长期亚治疗剂量和超高剂量添加，避免饲用抗生素滥用导致的细菌耐药性、抗生素药物残留和食品安全等方面的危害。

A Lactobacillus Grignardii Anti-enterohemorrhagic Escherichia coli and Its Compound Probiotics for Poultry and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种抗肠出血性大肠杆菌的格氏乳杆菌及制备的禽用复合益生菌制剂及应用
本专利技术涉及生物制剂
，具体涉及一种抗肠出血性大肠杆菌的格氏乳杆菌及制备的禽用复合益生菌制剂及应用。
技术介绍
肠道微生物与宿主在长期的进化过程中形成了稳定的共生关系，肠道微生物数量巨大，种类众多，在机体健康的状态下，各种细菌相互影响，相互制衡，共同维持着肠道微生态的平衡。但是，随着畜禽养殖业集约化的发展及养殖过程中抗生素的滥用，对动物机体产生极大的应激反应；同时，由于养殖密度过高，养殖舍内有害气体蓄积和病原微生物的大量繁殖，导致动物机体内外微生态失衡、免疫性能和生产性能下降，造成严重经济损失，更危害食品安全。大肠杆菌是一类条件致病菌，也是动物及人体肠道内的正常细菌，肠道微生态平衡时不会对机体产生健康威胁。但是，肠出血性大肠杆菌等高致病性大肠杆菌对机体的伤害极大。肠出血性大肠杆菌是一种重要的人畜共患传染性病原菌，是典型的食源性致病菌，能够导致感染动物水样或血样腹泻、出血性肠炎等，人感染后可引起出血性肠炎并发溶血性尿毒症。牛、羊、猪、家禽是肠出血性大肠杆菌最主要的携带者。肠出血性大肠杆菌广泛分布于自然界，感染力强，在全世界大部分地区都有爆发流行和散发病例的报道，引起人们的广泛关注。肉鸡生长速度快，从雏鸡到商品肉鸡一般为42天，在42日龄出栏前有停药期，此时肉鸡的粪便排放量大，环境中的机会致病菌多，尤其是大肠杆菌等条件致病菌极易趁虚而入，很容易引起病原菌感染。肠道微生物参与了宿主的肠道形态组成和发育、营养物质吸收和免疫反应等生理生化过程，因此它对机体的健康起着至关重要的作用。益生菌是一类能通过调控机体微生态平衡进而有效促进宿主健康的活微生物制剂，作为一种活菌制剂，具有促进营养物质代谢吸收，刺激动物免疫系统，增强动物抗病能力，特别是肠道益生菌，可以促进动物肠道免疫系统的发生发展。与抗生素相比，益生菌具有无毒、无抗药性、无残留、绿色安全的优点。大肠杆菌血清型较多，具有地方流行血清型的特点，目前研制的疫苗通常血清型较单一，使用疫苗防制效果不佳；使用抗生素又会产生药物残留和耐药性。而益生菌用于预防畜禽大肠杆菌感染是目前研究的热点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种格氏乳杆菌，所述的格氏乳杆菌分离自鸡肠道样品，该菌株已于2019年5月9日保藏与中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，分类命名：格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)YD2-2，保藏编号为CCTCCNO：M2019340，地址：中国武汉武汉大学。本专利技术的另一个目的在于提供了一种格氏乳杆菌在制备细菌抑菌剂中的应用。本专利技术提供的格氏乳杆菌对肠出血性大肠杆菌对大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、表皮葡萄球菌或金黄色葡萄球菌都具有具有高效的抑制作用，特别是对肠出血性大肠杆菌的抑制作用良好，可用于制备抑菌剂。本专利技术还有一个目的在于公开了一种抗肠出血性大肠杆菌感染的禽用复合益生菌制剂，所述复合益生菌制剂包括枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、格氏乳杆菌、植物乳杆菌。本专利技术的最后一个目的在于提供了禽用复合益生菌制剂的应用，所述的禽用复合益生菌制剂可用于制备饲料添加剂或是预防或治疗抗肠出血性大肠杆菌的药物。所述的复合益生菌菌剂饲喂禽类后，能够促进动物的生长，改善动物肠道微生态环境，促进肠粘膜的发育，增加肠粘膜可溶性IgA含量和血清IgG的含量。为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：格氏乳杆菌分离自健康鸡肠道样品，经筛选后对多种细菌都具备抑制作用，特别是对肠出血性大肠杆菌高效抑制，该菌株已于2019年5月9日保藏与中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，分类命名：格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)YD2-2，保藏编号为CCTCCNO：M2019340，地址：中国武汉武汉大学。所述的格氏乳杆菌具有如下生物学特性：在MRS琼脂培养基上菌落直径0.1-1mm，乳白色，呈圆形凸起，表明光滑，兼性厌氧。该菌株为革兰氏阳性，圆端直杆状、单个、成对或短链状，不产生芽孢、不运动。最适生长温度30-37℃，最适生长pH6-6.5。本专利技术中所述的格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)YD2-2能够产生细菌素类抑菌杀菌物质，杀灭大肠杆菌等致病性病原菌；本专利技术中所述的格氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)YD2-2还能够产生一些酸类物质，能够调节肠道微酸环境，利于肠道有益微生物的增殖，抑制大肠杆菌类在中性pH值下生长旺盛的病原菌的繁殖。格氏乳杆菌在制备细菌抑菌剂中的应用，包括以格氏乳杆菌YD2-2为唯一有效成分或有效成分之一，制备成细菌抑菌剂，所述的细菌为大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、表皮葡萄球菌或金黄色葡萄球菌。一种抗肠出血性大肠杆菌感染的禽用复合益生菌制剂，包括：枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、格氏乳杆菌、植物乳杆菌。以上所述的禽用复合益生菌制剂，优选的，枯草芽孢杆菌活菌数为108～109CFU/g、凝结芽孢杆菌活菌数为107～108CFU/g、解淀粉芽孢杆菌活菌数为107～108CFU/g、格氏乳杆菌活菌数为108～109CFU/g、植物乳杆菌活菌数为108～109CFU/g。以上所述的禽用复合益生菌制剂，优选的，所述的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌H6，CCTCCNO:M2013249；植物乳杆菌为植物乳杆菌ZN-3，CCTCCNO：M2017286。一种抗肠出血性大肠杆菌感染的禽用复合益生菌制剂的应用，包括利用该制剂制备成禽用饲料添加剂或是制备成预防或治疗肠炎性大肠杆菌感染的药物。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：1.本专利技术所提供的格氏乳杆菌具有宿主同源性，能够在鸡肠道更好的发挥抑制病原菌调节肠道微环境的作用。2.本专利技术中的复合益生菌制剂不仅能够提高动物的生长性能，还能够增强机体对病原菌的抵抗力，刺激机体免疫应答的产生，并维持机体较高水平的免疫应答。3.给动物饲喂本专利技术中的复合益生菌制剂，在大肠杆菌感染的情况下能够显著改善机体肠道微生态环境，提高机体对病原菌的抵抗力。4.本专利技术所述的复合益生菌制剂能够抑制有害病原菌的定植和繁育，减少抗生素作为预防和治疗动物疾病的作用在饲料中的长期亚治疗剂量和超高剂量添加，避免饲用抗生素滥用导致的细菌耐药性、抗生素药物残留和食品安全等方面的危害。5.本专利技术中的复合益生菌制剂能够显著提高肠粘膜免疫水平，减少或避免肠道疾病的发生，维持肠道的微生态平衡。附图说明图1为格氏乳杆菌YD2-2光学显微图及对肠出血性大肠杆菌的抑制作用示意图。图2为动物实验设计流程图。图3为添加复合益生菌制剂对肠出血性大肠杆菌感染试验肉鸡生长性能的影响。图4为添加复合益生菌制剂对肠出血性大肠杆菌感染试验肉鸡肠粘膜组织结构形态的影响。图5为添加复合益生菌制剂对肠出血性大肠杆菌感染试验肉鸡盲肠微生物种类花瓣图。图6为添加复合益生菌制剂对肠出血性大肠杆菌感染试验肉鸡盲肠微生物群落结构组成的影响。图7为添加复合益生菌制剂对肠出血性大肠杆菌感染试验肉鸡盲肠微生物组间群落显著差异物种分析图。具体实施方式本专利技术实施例中试验方法和条件如无特别说明，均为常规方法。这些实施例仅用于说明本专利技术，本专利技术的保护本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株分离的格氏乳杆菌，所述的格氏乳杆菌为格氏乳杆菌（

【技术特征摘要】
1.一株分离的格氏乳杆菌，所述的格氏乳杆菌为格氏乳杆菌（Lactobacillusgasseri）YD2-2，保藏编号为CCTCCNO：M2019340。2.权利要求1所述的格氏乳杆菌在制备细菌抑菌剂中的应用，所述的细菌为大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、表皮葡萄球菌或金黄色葡萄球菌。3.一种抗肠出血性大肠杆菌感染的禽用复合益生菌制剂，包括：枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、格氏乳杆菌、植物乳杆菌。4.根据权利要求3所述的禽用复合益生菌制剂，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌活菌数为108~109CF...

【专利技术属性】
技术研发人员：金梅林，杨丽，康超，孙小美，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42