一种苦绳组织培养的繁育种植方法技术

本发明专利技术公开了一种苦绳组织培养的繁育种植方法，1)将苦绳的地上部分采回，除掉叶片，即获得了无菌材料；2)将无菌材料接入到培养基1/2 MS+IAA 0.2mg/L；3)将步骤2)中所述生长的无菌材料具有芽的茎切下来，接种于培养基MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+GA 0.5mg/L；4)将步骤3)分化丛生芽剪成具有顶芽或具有1～2个腋芽的茎段，将其接种于培养基1/3MS+IAA 0.5mg/L上进行生根培养，获得生根试管苗；5)将生根试管苗移栽到生长基质上，本发明专利技术的生苗方法操作简单、成本低廉，为苦绳的快速繁殖奠定了技术基础。

A Breeding and Planting Method for Tissue Culture of Sophora alopecuroides

【技术实现步骤摘要】
一种苦绳组织培养的繁育种植方法
本专利技术涉及中药种植
，尤其涉及一种苦绳组织培养的繁育种植方法。
技术介绍
苦绳(Dregeasinensis)别名：奶浆藤、小木通、白浆藤、白浆草、通关散、中华假夜来香、中华南山藤、野泡通；属萝藦科南山藤植物，是中国的特有植物。分布在中国大陆的广西、陕西、贵州、四川、浙江、云南、湖北、江苏、甘肃等地，生长于海拔500米至3,000米的地区，一般生长在山地疏林中或灌木丛中，目前尚未由人工引种栽培。攀援木质藤本；茎具皮孔；幼枝具褐色绒毛。叶纸质，卵状心形或近圆形，基部心形，长5-11厘米，宽4-6厘米，叶面被短柔毛，老渐无毛，叶背被绒毛；侧脉每边约5条；叶柄长1.5-4厘米，被绒毛，顶端具丛生小腺体。伞状聚伞花序腋生，着花多达20朵；萼片卵圆形至卵状长圆形，内面基部有腺体；花冠辐状，直径达1.6厘米，外面白色，内面紫红色，冠片卵圆形，长6-7毫米，宽4-6毫米，顶端钝而有微凹，有缘毛。内部形态副花冠裂片肉质肿胀，端部内角锐尖；花药顶端有膜片；花粉块长圆形，直立；子房无毛，心皮离生，柱头圆锥状，基部五角形，顶端2裂。蓇葖果狭披针形，长5-6厘米，直径约1.2厘米，外果皮具波纹，被短柔毛；种子扁平，卵状长圆形，长9毫米，宽5毫米，顶端种毛长2厘米。花期4-8月，果期7-10月。
技术实现思路
本专利技术的提供一种苦绳组织培养的繁育种植方法。本专利技术的方案是：一种苦绳组织培养的繁育种植方法，包括下列步骤：1)将苦绳的地上部分采回，除掉叶片，将具有较多生长点的上半部分剪段后，用无菌水振荡洗涤18～22min,接着用0.05％洗涤剂振荡洗涤2～3min,再用无菌水漂洗到无泡沫，随后加入70～75％的乙醇10～20秒灭菌，无菌水洗涤三次，加入0.05％氯化汞溶液振荡灭菌1～3min,再往里加入等体积的无菌水，继续振荡灭菌12～15min,接着用无菌水洗涤五次，即获得了无菌材料；2)将无菌材料接入到培养基1/2MS+IAA0.2mg/L，附加蔗糖15g/L,pH5.8～6.0，光照2500lx，温度22～24℃，光照时间12h/d；获得生长的无菌材料；3)将步骤2)中所述生长的无菌材料具有芽的茎切下来，接种于培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA0.5mg/L,在光照条件下进行芽分化培养，得到分化丛生芽；4)将步骤3)分化丛生芽剪成具有顶芽或具有1～2个腋芽的茎段，将其接种于培养基1/3MS+IAA0.5mg/L上进行生根培养，获得生根试管苗；5)将生根试管苗移栽到生长基质上，温度20～27℃，湿度75～90％，没有直射光条件下培养，培养三十天，获得的试管苗在四月末与五月上旬期间移栽到山坡状苗圃中，当苗圃的苦绳试管苗生长到28～32cm进行搭架。作为优选的技术方案，所述生长基质包括炉灰渣、腐殖土、草木灰、发酵半年以上的灭菌鸡粪、活性炭与蔗糖。作为优选的技术方案，所述炉灰渣、腐殖土、草木灰、发酵半年以上的灭菌鸡粉、活性炭与蔗糖之间的投料比为1:1:1:0.5:0.02:0.3，高压高温灭菌处理、灭虫处理，处理后常温下搅拌均匀。作为优选的技术方案，所述步骤5)生根试管苗生长3cm以上时，每隔7～10d喷洒营养水，并保持2～5h的通风作为优选的技术方案，所述发酵半年以上的灭菌鸡粪、磷酸二氢钾、生物甲壳素与水。作为优选的技术方案，所述发酵半年以上的灭菌鸡粪、磷酸二氢钾、生物甲壳素与水的投料比1：0.05：2.2:10。作为优选的技术方案，所述步骤5)中所述生长基质要保持手抓取可捏成团、手松后可以散开的状态。作为优选的技术方案，所述步骤5)中苗圃中土壤的含水量为14～18％。由于采用了上述技术方案，一种苦绳组织培养的繁育种植方法，1)将苦绳的地上部分采回，除掉叶片，将具有较多生长点的上半部分剪段后，用无菌水振荡洗涤18～22min,接着用0.05％洗涤剂振荡洗涤2～3min,再用无菌水漂洗到无泡沫，随后加入70～75％的乙醇10～20秒灭菌，无菌水洗涤三次，加入0.05％氯化汞溶液振荡灭菌1～3min,再往里加入等体积的无菌水，继续振荡灭菌12～15min,接着用无菌水洗涤五次，即获得了无菌材料；2)将无菌材料接入到培养基1/2MS+IAA0.2mg/L，附加蔗糖15g/L,pH5.8～6.0，光照2500lx，温度22～24℃，光照时间12h/d；获得生长的无菌材料；3)将步骤2)中所述生长的无菌材料具有芽的茎切下来，接种于培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA0.5mg/L,在光照条件下进行芽分化培养，得到分化丛生芽；4)将步骤3)分化丛生芽剪成具有顶芽或具有1～2个腋芽的茎段，将其接种于培养基1/3MS+IAA0.5mg/L上进行生根培养，获得生根试管苗；5)将生根试管苗移栽到生长基质上，温度20～27℃，湿度75～90％，没有直射光条件下培养，培养三十天，获得的试管苗在四月末与五月上旬期间移栽到山坡状苗圃中，当苗圃的苦绳试管苗生长到28～32cm进行搭架。本专利技术的优点：本专利技术通过苦绳进行组织培养，说明苦绳的组织培养已经实现，通过本法发诱导生根率达到了100％，使其苗成活率达到了99％，无效苗出现率极低，不仅都可以正常生长，而且都生长旺盛，株体更显粗壮，移栽后的成活率也达到了99％，本专利技术的生苗方法操作简单、成本低廉，为苦绳的快速繁殖奠定了技术基础。具体实施方式为了弥补以上不足，本专利技术提供了一种苦绳组织培养的繁育种植方法以解决上述
技术介绍
中的问题。一种苦绳组织培养的繁育种植方法，包括下列步骤：1)将苦绳的地上部分采回，除掉叶片，将具有较多生长点的上半部分剪段后，用无菌水振荡洗涤18～22min,接着用0.05％洗涤剂振荡洗涤2～3min,再用无菌水漂洗到无泡沫，随后加入70～75％的乙醇10～20秒灭菌，无菌水洗涤三次，加入0.05％氯化汞溶液振荡灭菌1～3min,再往里加入等体积的无菌水，继续振荡灭菌12～15min,接着用无菌水洗涤五次，即获得了无菌材料；2)将无菌材料接入到培养基1/2MS+IAA0.2mg/L，附加蔗糖15g/L,pH5.8～6.0，光照2500lx，温度22～24℃，光照时间12h/d；获得生长的无菌材料；3)将步骤2)中所述生长的无菌材料具有芽的茎切下来，接种于培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA0.5mg/L,在光照条件下进行芽分化培养，得到分化丛生芽；4)将步骤3)分化丛生芽剪成具有顶芽或具有1～2个腋芽的茎段，将其接种于培养基1/3MS+IAA0.5mg/L上进行生根培养，获得生根试管苗；5)将生根试管苗移栽到生长基质上，温度20～27℃，湿度75～90％，没有直射光条件下培养，培养三十天，获得的试管苗在四月末与五月上旬期间移栽到山坡状苗圃中，当苗圃的苦绳试管苗生长到28～32cm进行搭架。所述生长基质包括炉灰渣、腐殖土、草木灰、发酵半年以上的灭菌鸡粪、活性炭与蔗糖。所述炉灰渣、腐殖土、草木灰、发酵半年以上的灭菌鸡粉、活性炭与蔗糖之间的投料比为1:1:1:0.5:0.02:0.3，高压高温灭菌处理、灭虫处理，处理后常温下搅拌均匀。所述步骤5)生根试管苗生长3cm以上时，每隔7～10d喷洒本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苦绳组织培养的繁育种植方法，其特征在于，包括下列步骤：1)将苦绳的地上部分采回，除掉叶片，将具有较多生长点的上半部分剪段后，用无菌水振荡洗涤18～22min,接着用0.05％洗涤剂振荡洗涤2～3min,再用无菌水漂洗到无泡沫，随后加入70～75％的乙醇10～20秒灭菌，无菌水洗涤三次，加入0.05％氯化汞溶液振荡灭菌1～3min,再往里加入等体积的无菌水，继续振荡灭菌12～15min,接着用无菌水洗涤五次，即获得了无菌材料；2)将无菌材料接入到培养基1/2MS+IAA0.2mg/L，附加蔗糖15g/L,pH5.8～6.0，光照2500lx，温度22～24℃，光照时间12h/d；获得生长的无菌材料；3)将步骤2)中所述生长的无菌材料具有芽的茎切下来，接种于培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA0.5mg/L,在光照条件下进行芽分化培养，得到分化丛生芽；4)将步骤3)分化丛生芽剪成具有顶芽或具有1～2个腋芽的茎段，将其接种于培养基1/3MS+IAA0.5mg/L上进行生根培养，获得生根试管苗；5)将生根试管苗移栽到生长基质上，温度20～27℃，湿度75～90％，没有直射光条件下培养，培养三十天，获得的试管苗在四月末与五月上旬期间移栽到山坡状苗圃中，当苗圃的苦绳试管苗生长到28～32cm进行搭架。...

【技术特征摘要】
1.一种苦绳组织培养的繁育种植方法，其特征在于，包括下列步骤：1)将苦绳的地上部分采回，除掉叶片，将具有较多生长点的上半部分剪段后，用无菌水振荡洗涤18～22min,接着用0.05％洗涤剂振荡洗涤2～3min,再用无菌水漂洗到无泡沫，随后加入70～75％的乙醇10～20秒灭菌，无菌水洗涤三次，加入0.05％氯化汞溶液振荡灭菌1～3min,再往里加入等体积的无菌水，继续振荡灭菌12～15min,接着用无菌水洗涤五次，即获得了无菌材料；2)将无菌材料接入到培养基1/2MS+IAA0.2mg/L，附加蔗糖15g/L,pH5.8～6.0，光照2500lx，温度22～24℃，光照时间12h/d；获得生长的无菌材料；3)将步骤2)中所述生长的无菌材料具有芽的茎切下来，接种于培养基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA0.5mg/L,在光照条件下进行芽分化培养，得到分化丛生芽；4)将步骤3)分化丛生芽剪成具有顶芽或具有1～2个腋芽的茎段，将其接种于培养基1/3MS+IAA0.5mg/L上进行生根培养，获得生根试管苗；5)将生根试管苗移栽到生长基质上，温度20～27℃，湿度75～90％，没有直射光条件下培养，培养三十天，获得的试管苗在四月末与五月上旬期间移栽到山坡状苗圃中，当苗圃的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李才有，
申请(专利权)人：华宁鑫梨泉实业有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53