甲状腺癌的分子诊治标志物制造技术

本发明专利技术公开了甲状腺癌的分子诊治标志物。本发明专利技术公开了LRRN4CL在甲状腺癌中表达下调，ZNF883在甲状腺癌中表达上调，通过检测LRRN4CL或ZNF883的表达水平，可以辅助诊断受试者是否患有甲状腺癌。本发明专利技术同时公开了LRRN4CL或ZNF883在构建预测甲状腺癌的计算模型中的应用，以及在治疗甲状腺癌中的应用。

Molecular markers for diagnosis and treatment of thyroid cancer

【技术实现步骤摘要】
甲状腺癌的分子诊治标志物
本专利技术属于生物医药领域，涉及甲状腺癌的分子诊治标志物，所述标志物为LRRN4CL或ZNF883。
技术介绍
甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤，且在世界范围内呈上升趋势，且在未来10年内将持续增长。其中甲状腺乳头状癌(papillarythyroidcancer,PTC)和滤泡状癌(follicularthyroidcancer,FTC)最常见(约占90％)且生物学行为良好，统称为分化型甲状腺癌(differentiatedthyroidcancer,DTC)，临床予以根治性手术和TSH抑制治疗，并对肿瘤侵袭转移者进行I131，放射治疗，十年生存率可达到90％以上。但是仍有一小部分患者早期出现进展转移、术后复发、对I131治疗不敏感、甚至死亡。因此，研究甲状腺癌分子致病机制、识别其发生发展和恶性转化相关的分子遗传学事件，将为临床早期诊断恶性程度较高、预后较差的病例提供分子标志物，并为治疗提供潜在的靶点。甲状腺癌的发生发展伴随着多种分子遗传学改变的发生和积累。近年来甲状腺癌的分子致病机制研究取得了重大进展，已证实BRAF,RAS,PIK3CA及PTEN等多种癌基因和抑癌基因参与甲状腺癌的发生与进展。研究证实60％-70％的甲状腺癌病例存在至少1种分子遗传学改变，并且在不同组织病理类型中各不相同，例如RET信号通路的异常激活与甲状腺髓样癌的发生密切相关，而BRAE突变激活的MAPK信号通路以及RAS,PTEN和PIK3CA突变激活的PI3K信号通路分别参与甲状腺乳头状癌和滤泡状癌的发生。研究基因在甲状腺癌及其分型中的作用，对于甲状腺癌的个性化诊断以及精准医疗具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供与甲状腺癌相关的分子诊断标志物，通过标志物进行诊断，可以实现患者的个性化诊疗。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测基因及其表达产物水平的试剂在制备诊断甲状腺癌的产品中的应用，所述基因选自LRRN4CL或ZNF883。进一步，所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术、蛋白免疫技术检测样本中LRRN4CL或ZNF883水平的试剂。进一步，所述试剂选自：特异性识别LRRN4CL或ZNF883基因的寡核苷酸探针；或特异性扩增LRRN4CL或ZNF883基因的引物；或特异性结合LRRN4CL或ZNF883基因编码的蛋白的抗体或配体。进一步，所述特异性扩增LRRN4CL的引物序列如SEQIDNO.1～2所示，特异性扩增ZNF883的引物序列如SEQIDNO.3～4所示。进一步，所述甲状腺癌为滤泡型甲状腺乳头状癌。本专利技术提供了一种诊断甲状腺癌的检测产品，所述产品包括检测样本中LRRN4CL或ZNF883基因及其表达产物水平的试剂。进一步，所述产品包括芯片、试剂盒或核酸膜条。进一步，所述芯片包括基因芯片、蛋白芯片，所述基因芯片包括用于检测LRRN4CL或ZNF883基因转录水平的针对LRRN4CL或ZNF883基因的寡核苷酸探针，所述蛋白芯片包括LRRN4CL或ZNF883蛋白的特异性结合剂；所述试剂盒包括基因检测试剂盒、蛋白检测试剂盒，所述基因检测试剂盒包括用于检测LRRN4CL或ZNF883基因转录水平的试剂、或芯片，所述蛋白检测试剂盒包括用于检测LRRN4CL或ZNF883蛋白表达水平的试剂、或芯片。本专利技术提供了LRRN4CL或ZNF883在构建预测甲状腺癌的计算模型中的应用。本专利技术提供了LRRN4CL或ZNF883在制备治疗甲状腺癌的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括LRRN4CL功能性促进剂或ZNF883的功能性抑制剂。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了在甲状腺癌中呈现差异表达的分子诊断标志物，通过检测标志物的水平，可以判断受试者是否患有甲状腺癌，利用标志物进行疾病的诊断，特异性更高，灵敏度更好，可以指导临床医师给收拾者提供精准化的治疗方案。附图说明图1显示利用QPCR检测LRRN4CL或ZNF883基因在甲状腺癌组织中的表达情况图；其中，图A是LRRN4CL基因在甲状腺癌组织中的表达情况图；图B是ZNF883基因在甲状腺癌组织中的表达情况图。专利技术详述本专利技术利用高通量测序的方法结合生物信息学分析，通过检测甲状腺癌患者和正常人中的差异表达的基因，寻找可用于表征甲状腺癌的标志物。本专利技术通过分析，首次发现了LRRN4CL或ZNF883在甲状腺癌患者中呈现差异性表达，提示LRRN4CL或ZNF883可作为检测指标应用于甲状腺癌的临床诊断。LRRN4CL或ZNF883在本专利技术中，LRRN4CL(geneID：221091)包括人LRRN4CL基因及其所编码的蛋白，其位于人11号染色体长臂1区2带上。一种代表性的LRRN4CL的核酸序列如NM_203422.4所示，相对应的氨基酸序列如NP_981967.1所示。ZNF883(geneID：169834)包括人ZNF883基因及其所编码的蛋白，其位于人9号染色体长臂3区2带上。一种代表性的ZNF883的核苷酸序列如目前国际公共核酸数据库GeneBank中NM_001101338.1所示，其所编码的蛋白序列如NP_001094808.1所示。本专利技术的实用性并不局限于对本专利技术的靶标基因的任何特定变体的基因表达进行定量。本领域技术人员知道，进行生物信息学分析时，通常会将测序序列和已知的基因进行比对，只要有关序列可以比对到相关基因上，就可以看做是该基因的表达，因此，在提及差异表达的基因时，该基因的不同的转录本、突变型或其片段也包含在本专利技术中。本领域技术人员应当理解，测定基因表达的手段不是本专利技术的重要方面。本专利技术可以利用本领域内已知的任何方法测定基因的表达水平。本专利技术的LRRN4CL或ZNF883使用本领域普通技术人员已知的多种核酸以及蛋白技术进行检测，这些技术包括但不限于：核酸测序、核酸杂交、核酸扩增技术、蛋白免疫技术。核酸测序技术的示例性非限制性实例包括但不限于链终止子(Sanger)测序和染料终止子测序。本领域的普通技术人员将认识到，由于RNA在细胞中不太稳定并且在实验中更易受到核酸酶攻击，因此在测序前通常将RNA逆转录成DNA。核酸测序技术的另一示例性非限制性实例包括下一代测序(深度测序/高通量测序)，高通量测序技术是一种基于单分子簇的边合成边测序技术，基于专有的可逆终止化学反应原理。测序时将基因组的DNA的随机片段附着到光学透明的玻璃表面，这些DNA片段经过延伸和桥式扩增后，在玻璃表面形成数以亿计的簇，每个簇是具有数千份相同模板的单分子簇，然后利用带荧光基团的四种特殊脱氧核糖核苷酸，通过可逆性的边合成边测序技术对待测的模板DNA进行测序。核酸杂交技术的示例性非限制性实例包括但不限于原位杂交(ISH)、微阵列和Southern或Northern印迹。原位杂交(ISH)是一种使用标记的互补DNA或RNA链作为探针以定位组织一部分或切片(原位)或者如果组织足够小则为整个组织(全组织包埋ISH)中的特异性DNA或RNA序列的杂交。DNAISH可用于确定染色体的结构。RNAISH用于测量和定位组织切片或全组织包埋内的mRNA和其他转录本(例如，ncRNA)。通常对样本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测基因及其表达产物水平的试剂在制备诊断甲状腺癌的产品中的应用，其特征在于，所述基因选自LRRN4CL或ZNF883。

【技术特征摘要】
1.检测基因及其表达产物水平的试剂在制备诊断甲状腺癌的产品中的应用，其特征在于，所述基因选自LRRN4CL或ZNF883。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术、蛋白免疫技术检测样本中LRRN4CL或ZNF883水平的试剂。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别LRRN4CL或ZNF883基因的寡核苷酸探针；或特异性扩增LRRN4CL或ZNF883基因的引物；或特异性结合LRRN4CL或ZNF883基因编码的蛋白的抗体或配体。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述特异性扩增LRRN4CL的引物序列如SEQIDNO.1～2所示，特异性扩增ZNF883的引物序列如SEQIDNO.3～4所示。5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述甲状腺癌为滤泡型甲状腺乳头状癌。6.一种诊断甲状腺癌的...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛国亮，李美晔，张聪，
申请(专利权)人：中国人民解放军联勤保障部队第九六零医院，
类型：发明
国别省市：山东,37