本发明专利技术属于基因检测技术领域，具体涉及一种用于高血压患者用药的检测试剂盒及检测方法。本发明专利技术所述的一种高血压患者用药基因位点组合总共包含了15基因位点，包括常用药物代谢酶基因位点、药物靶向基因位点以及H型高血压和其他高血压并发症常用药物的基因位点。其立足于荧光定量PCR技术，采用特异性的Taqman引物探针组极大提高了产品的准确性和特异性。位点覆盖合理，对药物的指导作用更加准确，为高血压患者的联合用药和个体化用药提供全面的参考，可以为患有高血压及其并发症的人群提供指导，使患者尽早得到最有效的治疗，整个检测过程从提取到结果判定只需要4小时即可。
A test kit and method for drug use in patients with hypertension
【技术实现步骤摘要】
一种用于高血压患者用药的检测试剂盒及检测方法
本专利技术属于基因检测
，具体涉及一种用于高血压患者用药的检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
据《中国居民营养与慢性病状况报告(2015年)》显示，2012年中国≥18岁居民高血压患病率为25.2％，中国高血压患病人数为2.7亿。高血压同时是心脑血管病最重要的危险因素，主要并发症如脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、动脉粥样硬化及慢性肾脏病等。目前药物治疗是控制血压最主要的措施。临床上主要的降压药物有利尿剂、钙离子拮抗剂(calciumchannelblocker，CCB)、血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensinconvertingenzymeinhibitor，ACEI)、β受体阻滞剂、血管紧张素II受体拮抗剂(angiotensinⅡreceptorblocker，ARB)五大类，涉及到具体的高血压及合并高血压并发症的治疗药物更是品种繁多，且大多需长期服用。但不同患者对药物的个体反应不同，药物疗效差、出现不良反应的情况时有发生，主要与患者参与药物转运、代谢、靶点的基因状态相关。因此对高血压患者进行用药基因检测，预测患者对药物的疗效及不良反应情况，指导对不同个体的精准化用药，尽可能避免用药的不良反应同时使用药更加有效、经济，具有十分重要的临床应用价值。目前市场上针对高血压用药指导的产品主要检测CYP2D6、ADRB1、CYP2C9、AGTR1、ACE五个基因，指导血管紧张素转换酶抑制剂、β受体阻滞剂、血管紧张素II受体拮抗剂三大类降压药用药。对于利尿剂和钙离子拮抗剂目前没有对应的用药基因检测，且药物在体内发挥药效受到人体吸收、转运、代谢、靶点等多种因素影响，只检测药效发挥过程中某一部分的基因往往会造成对药效及不良反应的预测不足。同时高血压患者中75％为H型高血压，且经常伴随脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、动脉粥样硬化等疾病，此类患者往往需要多种药物联合治疗，此时不仅要选择合适的降压药，也应关注联合用药中非降压药的药效作用，而目前市场中尚未有对高血压患者联合用药进行基因检测指导的产品。另外，目前市场上针对高血压用药指导的产品主要采用Sanger法、基因芯片法、PCR-熔解曲线法、荧光PCR法等。其中，sanger法操作复杂、成本较高，且检测时间长，检测位点少；基因芯片法检测成本高、操作复杂、检测时间长，且准确性低易污染；PCR-熔解曲线法操作简单、成本低，但是准确性较低；荧光PCR法操作简单、成本低、检测时间短，但特异性不足。目前市场上已有的与高血压用药基因相关的产品主要存在以下问题：(1)可指导药物种类不全，只针对一类或某几类甚至某一种降压药物。目前市场上产品主要指导血管紧张素转换酶抑制剂、β受体阻滞剂、血管紧张素II受体拮抗剂三大类降压药用药，而在高血压合理用药指南用药原则中第三条便是联合原则，第四条是个体化原则，指导药物种类不全直接影响了对患者的个体化联合用药。(2)检测的位点单一，评价不够精准。药物发挥作用受人体吸收、转运、代谢、靶点等多种因素影响，如果只对某一类代谢酶基因或者药物靶向位点基因进行检测，则对药物疗效及不良反应预测不够精确，影响患者治疗效果。(3)无高血压临床并发症常用药物相关基因位点检测。高血压患者中75％为H型高血压，且经常伴随脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、动脉粥样硬化等疾病，往往需要和阿司匹林、他汀类药物联合治疗，目前产品缺少对常用联合用药基因用药检测，对相应的患病人群则不能提供全面的用药指导。(4)检测方法多样，但均无明显优势。目前市场上针对高血压用药指导的产品主要采用Sanger法、基因芯片法、PCR-熔解曲线法、荧光PCR法等，以上方法或存在操作繁琐、成本高的问题，或存在准确度低、特异性不强的问题。
技术实现思路
本专利技术所述的一种高血压患者用药基因位点组合总共包含了15基因位点，包括常用药物代谢酶基因位点、药物靶向基因位点以及H型高血压和其他高血压并发症常用药物的基因位点。其立足于荧光定量PCR技术，采用特异性的Taqman引物探针组极大提高了产品的准确性和特异性。位点覆盖合理，对药物的指导作用更加准确，为高血压患者的联合用药和个体化用药提供全面的参考，可以为患有高血压及其并发症的人群提供指导，使患者尽早得到最有效的治疗，整个检测过程从提取到结果判定只需要4小时即可。本专利技术通过下述技术方案实现上述技术效果：一种高血压用药指导的基因位点检测方法，其包括对CYP2D6、ADRB1、CYP2C9、AGTR1、ACE、CYP11B2、CACNA1C、ADD1、CYP3A5、MTHFR、PTGS1、SLCO1B1、APOE、ABCB1基因的检测，确定突变的基因位点。如上所述的高血压用药指导的基因位点检测方法，所述的基因检测对应的位点分别为：CYP2D6基因的检测位点为c.100C>T，ADRB1基因的检测位点为c.1165G>C，CYP2C9基因的检测位点为c.1075A>C，AGTR1基因的检测位点为c.1166A>C，ACE基因的检测位点为c.584-109_584-108ins289，CYP11B2基因的检测位点为c.-344T>C，CACNA1C基因的检测位点为c.50-1658T＞G，ADD1基因的检测位点为c.1378G>T，CYP3A5基因的检测位点为c.219-237G>A，MTHFR基因的检测位点为c.677C>T，PTGS1基因的检测位点为c.842A>G，SLCO1B1基因的检测位点为c.521T>C，APOE基因的检测位点为c.526C>T、c.388T>C，ABCB1基因的检测位点为c.2677T>G。所述的基因检测位点和rs号的对应关系如下所示：一种高血压用药指导的基因位点检测试剂盒，其包括检测反应液、野生型质控品、纯合突变型质控品、杂合突变型质控品和空白质控品，其中检测反应液包括：10×Buffer、10×Solution、dNTP、MgSO4、引物mix、探针mix、KCl、Taq酶、灭菌纯化水；所述的野生型质控品为各位点野生型质粒混合液；所述的纯合突变型质控品为各位点突变型质粒混合液；所述的杂合突变型质控品为各位点野生型和突变型质粒混合液，所述的空白质控品为灭菌纯化水。其中所述的引物mix包括检测15种基因位点的正向引物和反向引物，具体地，所述的CYP2D6的引物如SEQNO1和SEQNO2所示、ADRB1的引物如SEQNO5和SEQNO6所示、CYP2C9的引物如SEQNO9和SEQNO10所示、AGTR1的引物如SEQNO13和SEQNO14所示、ACE的引物如SEQNO17和SEQNO18所示、CYP11B2的引物如SEQNO21和SEQNO22所示、CACNA1C的引物如SEQNO25和SEQNO26所示、ADD1的引物如SEQNO29和SEQNO30所示、CYP3A5的引物如SEQNO33和SEQNO34所示、MTHFR的引物如SEQNO37和SEQNO38所示、PTGS1的引物如SEQNO41和SEQNO42所示、SLCO1B1的引物如SEQNO45和SEQNO46所示、APOE的引物如SEQNO49和SE本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种高血压用药指导的基因位点检测方法，其包括对CYP2D6、ADRB1、CYP2C9、AGTR1、ACE、CYP11B2、CACNA1C、ADD1、CYP3A5、MTHFR、PTGS1、SLCO1B1、APOE、ABCB1基因的检测，确定突变的基因位点。
【技术特征摘要】
1.一种高血压用药指导的基因位点检测方法，其包括对CYP2D6、ADRB1、CYP2C9、AGTR1、ACE、CYP11B2、CACNA1C、ADD1、CYP3A5、MTHFR、PTGS1、SLCO1B1、APOE、ABCB1基因的检测，确定突变的基因位点。2.根据权利要求1所述的高血压用药指导的基因位点检测方法，其特征在于，所述的基因检测对应的位点分别为：CYP2D6基因的检测位点为c.100C>T，ADRB1基因的检测位点为c.1165G>C，CYP2C9基因的检测位点为c.1075A>C，AGTR1基因的检测位点为c.1166A>C，ACE基因的检测位点为c.584-109_584-108ins289，CYP11B2基因的检测位点为c.-344T>C，CACNA1C基因的检测位点为c.50-1658T＞G，ADD1基因的检测位点为c.1378G>T，CYP3A5基因的检测位点为c.219-237G>A，MTHFR基因的检测位点为c.677C>T，PTGS1基因的检测位点为c.842A>G，SLCO1B1基因的检测位点为c.521T>C，APOE基因的检测位点为c.526C>T、c.388T>C，ABCB1基因的检测位点为c.2677T>G。3.一种高血压用药指导的基因位点检测试剂盒，其包括检测反应液、野生型质控品、纯合突变型质控品、杂合突变型质控品和空白质控品，其中检测反应液包括：10×Buffer、10×Solution、dNTP、MgSO4、引物mix、探针mix、KCl、Taq酶、灭菌纯化水；所述的野生型质控品为各位点野生型质粒混合液；所述的纯合突变型质控品为各位点突变型质粒混合液；所述的杂合突变型质控品为各位点野生型和突变型质粒混合液，所述的空白质控品为灭菌纯化水。4.根据权利要求3所述的高血压用药指导的基因位点检测试剂盒，其特征在于，所述的引物mix包括检测15种基因位点的正向引物和反向引物，具体地，所述的CYP2D6的引物如SEQNO1和SEQNO2所示、ADRB1的引物如SEQNO5和SEQNO6所示、CYP2C9的引物如SEQNO9和SEQNO10所示、AGTR1的引物如SEQNO13和SEQNO14所示、ACE的引物如SEQNO17和SEQNO18所示、CYP11B2的引物如SEQNO21和SEQNO22所示、CACNA1C的引物如SEQNO25和SEQNO26所示、ADD1的引物如SEQNO29和SEQNO30所示、CYP3A5的引物如SEQNO33和SEQNO34所示、MTHFR的引物如SEQNO37和SEQNO38所示、PTGS1的引物如SEQNO41和SEQNO42所示、SLCO1B1的引物如SEQNO45...
【专利技术属性】
技术研发人员：夏昊强，周煌凯，王芳，刘倩，陆嫚云，曹治家，姚啟聪，李洁莹，
申请(专利权)人：广州海思医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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