一种木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物制造技术

一种木兰脂素，英文名称：magnolin，和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物，本发明专利技术联合组合物能有效治疗肝癌，效果明显优于木兰脂素和SB590885单药使用。两者联用能促进肝癌细胞凋亡和造成肝癌细胞的细胞周期阻滞，通过抑制Raf/ERK/MAPK通路和PI3K/AKT/mTOR通路来实现抑制肝癌细胞增殖的目的，说明二者在本发明专利技术中具有协同增效的作用，该联合用药组合物为肝癌的临床治疗提供了新的治疗药物，临床应用前景良好。

【技术实现步骤摘要】
一种木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物
本专利技术属于医药
，具体而言，涉及一种木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物及应用。
技术介绍
癌症，随着其发病率和死亡率的上升，是导致死亡的主要原因，已成为全球关注的问题。其中肝细胞癌是世界第五大常见肿瘤，第二大肿瘤相关死亡原因。传统治疗方法主要有：手术、放疗、化疗、肝移植等。虽然已有研究报道了肝细胞癌的分子表征，但是肝细胞癌的晚期诊断预后仍然很差。到目前为止，FDA批准的抗肝癌药物极少，仅见索拉非尼(2007年)和瑞戈非尼(2017年)，而且临床疗效仍很有限，目前肝癌患者5年生存率不到20％。另外，随着药物治疗期的延长，临床耐药性的也发展为常态，单药治疗已受限。因此，采用联合用药抑制肿瘤生长在临床上具有重要意义。联合用药能更有效地抑制癌症，从而更有效地治疗癌症患者。从肿瘤细胞信号通路的角度上讲，当一种药物长期抑制某一信号通路的靶点蛋白后，肿瘤细胞可能会通过调节增强其它促进生长信号通路，使药物的疗效降低。如：Raf/MEK/ERK信号通路上的某一靶点蛋白被抑制后，肿瘤细胞常常会调节PI3K/AKT/mTOR信号通路的增强，降低药效。因此，在抑制Raf/MEK/ERK信号通路时，如果能同时抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活，有可能取得非常好的联用效果。但是肿瘤发生发展的内在机制非常复杂，信号通路的强弱调节仅是抑制或促进肿瘤细胞生长的因素之一。简单的选用具有抑制Raf/MEK/ERK信号通路和PI3K/AKT/mTOR信号通路的药物，几乎很难达到预期目的。因此，需要做大量的筛选实验，才能发现具有联合增效潜力的药物组合。另外，不同药物之间的用药比例选择，也是联合用药是否有成效的关键因素之一，同样需要大量的实验摸索。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有治疗药物的缺陷和不足，特别是针对与肝癌有效药物不多的现状，提供一种癌症治疗的药物组合物，该药物组合为木兰脂素和SB590885，能够显著提高SB590885治疗癌症的效果，尤其是治疗肝癌的效果。本专利技术的第一个目的在于提供木兰脂素和SB590885联用在制备癌症治疗药物方面的应用。本专利技术的第二个目的是提供一种包含木兰脂素和SB590885的治疗癌症的药物。木兰脂素和SB590885联用在制备癌症治疗药物方面的应用。优选地，所述癌症为肝癌。木兰脂素和SB590885联用在制备抑制癌细胞的药物方面的应用。优选地，所述癌细胞为肝癌细胞。优选地，上述抑制癌细胞的药物为抑制癌细胞的生长的药物。更优选地，所述肝癌细胞为肝癌细胞种BEL-7402、SK-Hep-1。的治疗癌症的药物。一种癌症治疗药物，所述药物包含木兰脂素和SB590885。优选地，所述癌症为肝癌。优选地，所述木兰脂素和SB590885的摩尔比为：木兰脂素25～125份，SB5908853～15份。更优选地，所述木兰脂素和SB590885的摩尔比为：125:15。更优选地，所述药物是抑制肝癌细胞生长。为了寻找能够产生协同抗癌作用的药物组合。我们通过文献检索和研读，调研并购买了对Raf/MEK/ERK信号通路有抑制作用报道的化合物共15个；以及对PI3K/AKT/mTOR信号通路有抑制作用报道的化合物共17个。利用购买到的化合物设置了32个单药组，每个单药组包含至少5个浓度，作为对照实验；利用这些化合物设计了15×17＝255种药物联合配对方式，每种配对方式包含至少5种浓度组合。以肝癌BEL-7402细胞株为测试细胞株，利用CCK-8法检测各种单药、药物组合抑制细胞增殖的效果。经过长期大量的筛选实验和分析研究后发现，其中的一个配对组合能够产生协同作用，显著增强抗癌效率。这对组合药物为：木兰脂素与SB590885。木兰脂素，英文名称：magnolin，CAS为31008-18-1，分子式C23H28O7，分子量416.47,结构式为：SB590885，CAS405554-55-4，分子式C27H27N5O2，分子量453.54，结构式为：紧接着，我们对木兰脂素与SB590885联合抑制肝癌BEL-7402细胞进行了3次重复实验，三次实验均发现两种药物的确能够产生协同作用，显著增强抗癌效率。进一步地，我们又在肝癌SK-Hep-1细胞株上，对木兰脂素和SB590885联合方案进行了进一步验证，三次重复实验均发现木兰脂素与SB590885对肝癌SK-Hep-1细胞的增殖，的确能够产生协同作用，显著增强抗癌效率。除了增殖实验以外，我们还开展了克隆形成实验。实验结果显示：木兰脂素和SB590885两者单用时对肿瘤细胞克隆形成的抑制作用不明显；但当木兰脂素与SB590885联用后肿瘤细胞的克隆形成率大大低于木兰脂素和SB590885单独使用，协同效果良好。细胞凋亡实验也是评价药物疗效的指标之一。接下来我们又利用流式细胞凋亡检测的方法，检测了木兰脂素和SB590885联合用药对肝癌细胞凋亡的影响，结果发现木兰脂素与SB590885联用组的细胞凋亡率明显优于木兰脂素和SB590885单独使用，协同诱发凋亡的效果良好。为了确认流式细胞凋亡的检测结果，我们从细胞凋亡关键蛋白表达变化的角度进一步进行了确认。实验结果表明：相比于木兰脂素或SB590885单独用药，联合用药能明显降低抗凋亡蛋白BCL2的表达量，增加促凋亡蛋白BAX的表达量；以及上调C-caspase-9和C-PARP的表达量(注：C-caspase-9和C-PARP为细胞发生凋亡的标志蛋白)。为了确定木兰脂素和SB590885联合增效的分子机制是否与我们的猜想一致，即该配对组合能同时协同抑制B-Raf/ERK/MAPK和PI3K/AKT/mTOR两条信号通路。我们利用westernblot技术对这两条信号通路开展了蛋白水平的机制研究。首先，我们开展了木兰脂素和SB590885联合用药调控B-Raf/ERK/MAPK通路实验。实验结果显示，相比于木兰脂素和SB590885单药组，联合用药组的确能够显著抑制肝癌细胞MEK和ERK蛋白的磷酸化水平。具体表现为：在联合用药组中p-MEK和p-ERK两个蛋白的表达量明显低于单药组。该结果表明，木兰脂素和SB590885联合增效的机制之一是通过增强对B-Raf/ERK/MAPK信号通路的抑制作用来实现的。接下来，我们开展了木兰脂素和SB590885联合用药调控PI3K/AKT/mTOR信号通路的实验。实验结果显示，相比于木兰脂素和SB590885单药组，联合用药组能够显著抑制肝癌细胞AKT和其下游蛋白P70S6K、S6的磷酸化水平。具体表现为：在联合用药组中p-AKT，p-P70S6K，p-S6三个蛋白的表达量明显低于单药组。这些结果表明，木兰脂素和SB590885联合增效的机制之二是通过增强对PI3K/AKT/mTOR信号通路的抑制作用来实现的。与现有技术相比，本专利技术的有益效果例如包括：本专利技术联用药物可以显著提升抑制肝癌细胞生长的效果；而且抑制效果明显优于木兰脂素和SB590885单独使用，且疗效明确，机制清楚，说明二者在本专利技术特定配比下配合实验后具有协同增效的作用，有很好的临床应用前景。此外，由于木兰脂素是来源于中药辛夷的天然本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，木兰脂素，英文名称：magnolin，CAS为31008‑18‑1，分子式C23H28O7，分子量416.47,结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，木兰脂素，英文名称：magnolin，CAS为31008-18-1，分子式C23H28O7，分子量416.47,结构式为：SB590885，CAS405554-55-4，分子式C27H27N5O2，分子量453.54，结构式为：所述癌症为肝癌细胞；所述抑制为抑制癌细胞的生长；所述的肝癌细胞为肝癌细胞种Bel-7402或SK-Hep-1；所述抑制为通过协同抑制B-Raf/ERK/MAPK和PI3K/AKT/mTOR两条信号通路来实现抑制癌细胞的生长。2.根据权利要求1所述的木兰脂素和SB590885联合组合物制备抗肝癌的药物，其特征在于，所述药物包含木兰脂素和SB590885...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘云，肖毅，王文洪，喻昌燕，李三华，朱欣婷，
申请(专利权)人：遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52