一种用HPLC法测定甲氧普烯有关物质的方法技术

本发明专利技术提供一种用HPLC法测定甲氧普烯有关物质的方法，属于医药化工领域；所述方法可用于测定甲氧普烯原料药及其制剂中甲氧普烯有关物质的含量，所述方法的特征是采用以辛烷基硅烷键合硅胶相作为固定相的色谱柱，采用磷酸和甲醇为流动相进行梯度洗脱，在反相色谱系统中对甲氧普烯原料药及其制剂的有关物质进行分离测定。本发明专利技术提供的分析方法能够有效分离测定甲氧普烯有关物质，具有分离度好，灵敏度高，操作方便等优点。

A method for determination of methoxyprene-related substances by high performance liquid chromatography

【技术实现步骤摘要】
一种用HPLC法测定甲氧普烯有关物质的方法
本专利技术属于医药化工领域，更具体地涉及一种用HPLC方法测定甲氧普烯有关物质的方法。
技术介绍
甲氧普烯，CAS：40596-69-8。甲氧普烯是20世纪70年代出现的昆虫生长调节剂，保幼激素类似物。甲氧普烯工业品为琥珀色液体，沸点100℃(7Pa)，其在水中仅溶1.4mg/kg，与常用有机溶剂可混溶；其作为一种外用杀虫药，对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、同翅目多种昆虫有效，用于防治蚊、蝇等卫生害虫，及烟草螟蛾等贮藏期的害虫。也多用于宠物的灭虱除蚤，例如某些宠物杀虫喷雾剂的主要成分之一。甲氧普烯(methoprene)是一种保幼激素，可以使虫卵无法变成幼虫，幼虫无法变成成虫，达到杀虫卵的目的。本专利技术涉及一种甲氧普烯有关物质的检测方法，采用磷酸和甲醇为流动相进行梯度洗脱，可实现甲氧普烯与有关物质的有效分离。为了控制药品的质量，保证用药的安全需要开发出一种有效检测甲氧普烯有关物质的方法。
技术实现思路
专利技术概述现有技术中没有公开能够有效测定甲氧普烯有关物质原料药或其制剂的有关物质的分析方法。本专利技术将提供一种采用HPLC测定甲氧普烯有关物质原料药及其制剂的有关物质的分析方法。甲氧普烯具有长链烯烃结构，因此其具有较强的亲水性和氢键结合能力，因而甲氧普烯有关物质的有关物质也可能具有类似的结构。在反相色谱系统中，由于亲水性强所以化合物保留能力比较弱，很快将被洗脱，如此是不利于组分分离的。另外，由于化合物易于形成氢键，因此特别容易与色谱柱硅胶颗粒表面残存的硅羟基进行结合，导致部分组分不易洗脱，形成拖尾色谱峰的现象。本专利技术人通过多次的实验尝试，最终开发出一种有效测定甲氧普烯有关物质原料药及其制剂的有关物质的分析方法。所述方法采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相，采用磷酸和甲醇为流动相进行梯度洗脱，在反相色谱系统中对甲氧普烯有关物质原料药及其制剂的有关物质进行分离测定。本专利技术所述的分析方法能够有效分离测定甲氧普烯有关物质有关物质，具有分离度好，灵敏度高，操作方便等优点。术语定义术语“峰纯度”是指HPLC检测中，用于判断某一色谱峰是否只是由一个物质引起的一个考察参数，一般认为峰纯度在0.990～1.000之间即认为所考察的某一色谱峰纯净，该色谱峰是某单一物质的色谱峰。术语“不对称因子”是指在HPLC检测中，用于考察峰型对称性的参数，体现色谱柱效能；在液相色谱法中，当不对称因子在0.8～1.2之间认为峰型较好。术语“R”在HPLC检测中是指分离度，用于考察色谱峰之间分离情况的参数；通常两个峰型峰高相当的色谱峰，其分离度大于等于1.5则认为两峰的分离达到99％以上；R值越大分离情况越好。术语“约”在本专利技术中是指在所述数值的±10％以内。专利技术详述本专利技术提供的一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，其特征是采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱；流动相由A相和B相组成，其中以酸性溶剂作为A相，以有机溶剂作为B相。本专利技术所述的辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱可以选自不同厂家的色谱柱，在一些实施例中所述色谱柱是poroshell120SB-C8(4.6×100mm，2.7μm)。本专利技术所述有机溶剂可以是选自甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈或四氢呋喃中的一种或几种。在一些实施例中有机溶剂为甲醇。本专利技术所述的酸性溶剂可以是选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、磷酸或磷酸盐中的一种或几种。在一些实施例中酸性溶剂为磷酸。在一些实施例中，酸性溶剂为0.05％～0.5％磷酸溶液。在一些实施例中，所述酸性溶剂为0.1％的磷酸。在一些实施例中，A相和B相的体积比为1:20～5:1。在一些实施例中，本专利技术所述的分析方法是采用梯度洗脱程序进行的，其中梯度洗脱程序如下表1所示。表1在一些实施例中，本专利技术提供的一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，其特征是：采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱；流动相A相是0.05％～0.5％磷酸溶液，其中0.05％～0.5％磷酸(体积比)与甲醇的体积比是约1:20～5:1；B相是甲醇；其中梯度程序如上表1所示；色谱柱柱温：约20℃～60℃；流速：约0.5mL/min～2.0mL/min；检测器：DAD检测器，检测波长约215nm～290nm。在一些实施例中，本专利技术提供的一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，其特征是：采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱；流动相A相是0.1％磷酸溶液；流动相B相是甲醇；梯度洗脱程序如上表1所示；色谱柱柱温：约45℃；流速：约1.0mL/min；检测器：DAD检测器，检测波长约264nm。本专利技术所述的分析方法，其中，供试品溶液可通过以下方法配制：取供试品约25mg，精密称定，置50mL容量瓶中，先用25mL甲醇超声溶解，再用超纯水稀释至刻度，摇匀得到。在一些实施例中，供试品溶液的进样量可以是1～100μL；在一些实施例中供试品溶液的进样量可以是10μL。本专利技术提供的一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，适合用于测定甲氧普烯有关物质原料药及其制剂中甲氧普烯有关物质的含量。附图说明图1示实施例1供试品溶液色谱图。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例对本专利技术作进一步的详细说明。本专利技术所使用的试剂均可以从市场上购得或者可以通过本专利技术所描述的方法制备而得。本专利技术所使用的分析试剂及溶液符合中国药典2010版附录的要求，除另有说明外。实施例1实验步骤：供试品溶液：取供试品约25mg，精密称定，置50mL容量瓶中，先用25mL甲醇超声溶解，再用超纯水稀释至刻度，摇匀，即得。色谱条件：色谱系统：美国Agilent1260型高效液相色谱系统及工作站；色谱柱：poroshell120SB-C8(4.6×100mm，2.7μm)；检测器：DAD检测器，检测波长约264nm；流动相A相：0.1％的磷酸溶液；流动相B相：甲醇；梯度洗脱程序如上表1所示；流速：约1.0mL/min；柱温：约45℃；供试品溶液进样体积为约10μL。梯度洗脱条件：取上述供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，图1是采用本专利技术的检测方法对甲氧普烯进行检测得到的液相色谱图。按照中国药典2010版第二部附录ⅤD高效液相色谱法，取供试品溶液，在所述色谱条件下进样检测，并记录色谱图，如图1所示。图1中保留时间13.16分钟的色谱峰为甲氧普烯有关物质(Methoprene)的色谱峰；其余为甲氧普烯有关物质的色谱峰；具体实验结果如表2所示：实施例1表明，本专利技术提供的分析方法，在测定甲氧普烯有关物质原料药的有关物质中，灵敏度高，分离度好，操作方便等优点。因此，本专利技术的一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，能够有效分离测定甲氧普烯有关物质，具有分离度好，灵敏度高，操作方便等优点。本专利技术的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，其特征是采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱；流动相由A相和B相组成，其中以酸性溶剂作为A相，以有机溶剂作为B相。

【技术特征摘要】
1.一种用HPLC测定甲氧普烯有关物质的方法，其特征是采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱；流动相由A相和B相组成，其中以酸性溶剂作为A相，以有机溶剂作为B相。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的色谱柱是poroshell120SB-C8。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述有机溶剂是选自甲醇、乙腈或四氢呋喃中的一种或几种。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述的酸性溶剂是选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、磷酸或磷酸盐中的一种或几种。5.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述方法是采用梯度洗脱程序进行的，其中梯度程序见下表：6.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征是：采用以辛烷基硅烷键合硅胶作为固定相的色谱柱；流动相A相是0....

【专利技术属性】
技术研发人员：董凛杰，李达威，刘玉婷，赵雏微，蔡景辉，刘国柱，黄芳芳，
申请(专利权)人：广东东阳光药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44