一种黄桷树叶总黄酮的提取工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种黄桷树叶总黄酮的提取工艺，包括以下步骤：步骤一、黄桷树叶干燥粉末的制备；步骤二、黄桷树叶总黄酮的提取；步骤三、黄桷树叶总黄酮得率的计算；步骤四、黄桷树叶提取浓缩液的分级萃取。本发明专利技术提供的黄桷树叶总黄酮提取工艺具有操作简单，所用各种溶剂都可回收再用，成本低，分级萃取可将总黄酮进行一定程度的富集，有助于黄桷树叶总黄酮的进一步开发，本发明专利技术为黄桷树资源的开发利用提供一个参考。

Extraction Technology of Total Flavonoids from Leaves of Castanopsis fissa

The invention discloses an extraction process of total flavonoids from the leaves of Chinese cabbage, which includes the following steps: step 1, preparation of dry powder of Chinese cabbage leaves; step 2, extraction of total flavonoids from Chinese cabbage leaves; step 3, calculation of total flavonoids yield from Chinese cabbage leaves; step 4, hierarchical extraction of concentrated extract from Chinese cabbage leaves. The extraction process of total flavonoids from the leaves of Castanopsis obtusifolia has the advantages of simple operation, recyclable use of various solvents, low cost, and a certain degree of enrichment of total flavonoids by fractional extraction, which is conducive to the further development of total flavonoids from the leaves of Castanopsis obtusifolia. The invention provides a reference for the development and utilization of the resources of Castanopsis obtusifolia.

【技术实现步骤摘要】
一种黄桷树叶总黄酮的提取工艺
本专利技术涉及一种黄桷树叶的提取工艺，更具体地说，本专利技术涉及一种用水作为溶剂提取黄桷树叶总黄酮的提取工艺。
技术介绍
黄桷树又名大榕树、黄葛树，是桑科榕属类植物中的一种。原产于我国西南、华南地区，以四川、重庆地区居多。黄桷树枝繁叶茂，生命力顽强，既耐高温又能抵御寒冷。榕树叶具有抑菌、抗炎、解表、清热及化湿等药用功效，可用于支气管炎、哮喘、疟疾、咳嗽、急性肠炎和细菌性痢疾等疾病的防治。《中草药性备要》和《全国中草药汇编》都记录了桑科榕属植物黄桷树叶的药用价值，祛风通络，活血消肿，止痒敛疮。主治筋骨疼痛，迎风流泪.皮肤瘙痒，臁疮，跌打损伤和骨折。研究表明，榕树叶含三萜苷、黄酮苷、酸性树脂和鞣质等。黄酮类和萜内酯类等有效成分在治疗心脑血管疾病、神经系统疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有显著效果。黄酮类化合物是以2-苯基色原酮为母核结构的多酚类物质，作为植物的次生代谢产物大多以糖苷形式存在于各种植物中。黄酮类化合物药理作用显著，具有抗菌、抗炎、降压、抗氧化、抗突变、抗癌、镇静、清热解毒等作用，在医药领域已被广泛应用。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种黄桷树叶总黄酮的提取工艺。为了实现根据本专利技术的目的，提供了一种黄桷树叶总黄酮的提取工艺，包括以下步骤：步骤一、将黄桷树叶洗净、干燥后粉碎，过20～100目筛，得黄桷树叶粗粉；步骤二、按照黄桷树叶粗粉质量(g):水体积(mL)为1:20～80的料液比加入去离子水进行水浴温度为50～95℃为期0.5～10.0h的回流提取；步骤三、提取液趁热过滤，减压浓缩至原体积的五分之一，加入两倍体积的95％乙醇，静置过夜，次日过滤，取滤液显色后测定吸光度值，计算总黄酮得率。步骤四、将滤液减压浓缩至原体积的10％，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇作为萃取剂依次萃取，对各部分萃取液吸光度值进行比较，发现水饱和正丁醇萃取部分中总黄酮的含量最大。上述黄桷树叶总黄酮的提取工艺中，优选的，所述步骤二中，准确称取黄桷树叶干燥粉末10.0g，按照1:50的料液比加入500mL去离子水，在95℃水浴中回流提取2.0h；前述黄桷树叶总黄酮的提取工艺中，优选的，所述步骤三中，计算黄桷树叶总黄酮得率的具体方法为：步骤a、将提取液趁热过滤，减压浓缩至原体积的五分之一，加入两倍体积的95％乙醇，静置过夜，次日过滤，按公式(1)计算滤液中总黄酮的浓度；Y＝0.0097X+0.0054(1)式中：Y：λ＝510nm处的吸光度值；X：待测物的浓度，单位为微克每毫升。步骤b、按黄酮得率(％)＝提取液浓度×体积×稀释倍数/原料质量×100，计算总黄酮得率。本专利技术至少包括以下有益效果：本专利技术提供的提取工艺具有易于操作，简便可行的特点；对影响得率的几个因素进行了考察；工艺中所用的溶剂都可回收再利用，经济环保；本专利技术对黄桷树叶中总黄酮的提取有助于实现黄桷树资源的有效利用。本专利技术的其他优点、目标和特征将分别通过下面的说明体现。附图说明图1是本专利技术的液料比对得率的影响曲线图，图中横坐标为液料比，纵坐标为提取率/％。图2是本专利技术的提取时间对得率的影响曲线图，图中横坐标为提取时间/h，纵坐标为提取率/％。图3是本专利技术的提取温度对得率的影响曲线图，图中横坐标为提取温度/℃，纵坐标为提取率/％。具体实施方式下面结合实施例，对本专利技术的具体实施方式做进一步的描述。以下实施例用于说明本专利技术，但不用于限制本专利技术的范围。<实施例>1仪器紫外分光光度仪、旋转蒸发仪、水浴锅。2材料与试剂黄桷树叶(黄色落叶)，采自重庆医科大学校园内，清洗后于65℃烘箱内干燥，粉碎过40目筛置于干燥器内储存备用；超纯水，由重庆医科大学创新药物及辅料分析技术平台提供；95％乙醇，由四川金山制药有限公司提供；NaNO2，Al3(NO3)3·9H2O，NaOH，均由成都市科隆化学品有限公司提供；芦丁对照品(99％，重庆医科大学药学院药物化学教研室)。3方法3.1黄桷树叶总黄酮的提取精密称取黄桷树叶干燥粉末1.0g，加入一定体积的去离子水，在一定水浴温度下提取一定时间后，过滤后将滤液于65℃水浴中旋转蒸发浓缩至原体积的20％，加入两倍体积的95％乙醇静置过夜，次日过滤后将滤液加水至30mL，取1.0mL进行显色反应后测定吸光度值，计算结果。3.2芦丁标准曲线的绘制精密称取0.1g芦丁于100mL容量瓶中，加入60％乙醇溶解并定容至刻度，得1.0mg/mL芦丁储备液。分别吸取芦丁标准溶液0.20、0.30、0.40、0.60、0.80和1.0mL于25mL容量瓶中,加入超纯水6.0mL，混匀，加入5％亚硝酸钠溶液1.0mL，摇匀，静置6min，再加10％硝酸铝1.0mL，摇匀，静置6min再加5％氢氧化钠10.0mL，超纯水定容后，静置15min，于510nm处测吸光度。以对照品的浓度为横坐标，对应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。标准曲线的线性回归方程为:y＝0.0097x+0.0054，R2＝0.0983，芦丁在8.0～40.0μg/mL范围内浓度与吸光度呈良好的线性关系。3.3提取条件的筛选3.3.1考察料液比、提取时间、提取温度对黄桷树叶总黄酮得率的影响。设置料液比分别为1:20、1:30、1:40、1:50、1:60、1:70和1:80(g/mL)，精密称取1.0g黄桷树叶干燥粉末7份于圆底烧瓶内，加入相应体积的去离子水，在95℃水浴中回流提取2.0h，过滤后滤液用水定容到100mL，取1.0mL提取液显色后在λ＝510nm处测定吸光度并计算含量，考察料液比对黄桷树叶总黄酮得率的影响，结果见图1。从图中可以看出当料液比为1:50(g/mL)时，黄桷树叶提取液中总黄酮的含量最高。3.3.2考察提取时间对黄桷树叶总黄酮得率的影响设置提取时间分别为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、3.0h、4.0h、6.0h、8.0h和10.0h，精密称取1.0g黄桷树叶干燥粉末9份于圆底烧瓶内，加入50mL去离子水，在95℃水浴中回流提取相应时间，过滤，取1.0mL提取液显色后在λ＝510nm处测定吸光度并计算含量，考察提取时间对黄桷树叶总黄酮得率的影响，结果见图2。从图中可以看出当提取时间为2.0h时，黄桷树叶提取液中总黄酮的含量最高。3.3.3考察提取温度对黄桷树叶总黄酮得率的影响设置提取温度分别为50℃、60℃、70℃、80℃、90℃和95℃，精密称取1.0g黄桷树叶干燥粉末6份于圆底烧瓶内，加入50mL去离子水，在相应温度下水浴提取2h，过滤后取1.0mL提取液显色后在λ＝510nm处测定吸光度值并计算含量，考察提取温度对黄桷树叶总黄酮得率的影响，结果见图3。从图中可以看出当提取温度为95℃时，黄桷树叶提取液中总黄酮的含量最高。3.4各极性溶剂对黄桷树叶提取液萃取效果将醇沉后的滤液600mL浓缩至60mL，再用石油醚(1:1，v/v)萃取两次，合并萃取液，将约120mL萃取液旋蒸回收石油醚，残渣用50mL95％乙醇溶解，显色后于λ＝510nm处测定吸光度。石油醚萃取后的水层再用乙酸乙酯(1:1，v/v)，萃取三次，其他操作同石油醚；水层最后用水饱和正丁醇溶液(1:1，v/v)萃取三次，其余操作同乙酸乙酯，测定各萃取部分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄桷树叶中总黄酮的提取工艺，其特征在于，包括以下工艺步骤：步骤一、将黄桷树叶洗净、干燥后粉碎，过20～100目筛，得黄桷树叶粗粉；步骤二、按照黄桷树叶粗粉质量(g):水体积(mL)为1:20～80的料液比加入去离子水进行水浴温度为50～95℃为期0.5～10.0h的回流提取；步骤三、提取液趁热过滤，减压浓缩至原体积的五分之一，加入两倍体积的95％乙醇，静置过夜，过滤，取滤液显色后测定吸光度值计算总黄酮得率。步骤四、将滤液浓缩至原体积的十分之一，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇溶剂萃取，通过对各部分吸光度值的比较，最终确定用水饱和正丁醇萃取部分中总黄酮的含量最大。

【技术特征摘要】
1.黄桷树叶中总黄酮的提取工艺，其特征在于，包括以下工艺步骤：步骤一、将黄桷树叶洗净、干燥后粉碎，过20～100目筛，得黄桷树叶粗粉；步骤二、按照黄桷树叶粗粉质量(g):水体积(mL)为1:20～80的料液比加入去离子水进行水浴温度为50～95℃为期0.5～10.0h的回流提取；步骤三、提取液趁热过滤，减压浓缩至原体积的五分之一，加入两倍体积的95％乙醇，静置过夜，过滤，取滤液显色后测定吸光度值计算总黄酮得率。步骤四、将滤液浓缩至原体积的十分之一，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇溶剂萃取，通过对各部分吸光度值的比较，最终确定用水饱和正丁醇萃取部分中总黄酮的含量最大。2.如权利要求1所述的黄桷树叶中总黄酮的提取工艺，其特征在于，步骤二中对黄桷树叶提取的具体方法为：准确称取黄桷树叶干燥粉末10.0g，按照1:50的料液比加入500mL去离子水，在95℃水浴中回去提取2.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋心惠，刘永红，杜婷婷，林贤惠，张钰莹，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50