The invention discloses a method for detecting benzo [a] pyrene in urine of smokers by Soxhlet extraction device with solid phase extraction function, which comprises the following steps: (1) sample pretreatment; (2) sample extraction and concentration; (3) sample detection; (4) quantitative calculation by peak area method. A self-made extraction device with solid phase extraction function can separate, purify and concentrate samples under closed conditions, and the extraction efficiency is greatly improved without the operation steps of multiple transfers and concentrations required for traditional separation and purification and concentration.
【技术实现步骤摘要】
一种利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法
本专利技术属于烟草制品化学分析
,特别涉及一种利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法。
技术介绍
苯并[a]芘(B[a]P)是毒性最强的多环芳烃类化合物;肿瘤流行病学调查及动物实验研究发现B[a]P具有较强致癌性,与肿瘤的发生密切相关,尤其与人类肺癌的发生高度相关。苯并[a]芘是卷烟主流烟气中的重要有害成分,也是烟草安全评价的重要检测指标,因此准确测定吸烟者尿液中的B[a]P对于进一步深入了解吸烟与健康具有重要意义。对B[a]P的测定,常用的方法有:GC-MS法、LC-MS法和HPLC荧光检测法等。该类方法的样品前处理通常需采用萃取或固相萃取分离净化。样品前处理需多次的浓缩、转移,操作复杂麻烦,可引入实验误差的环节过多,导致实验结果精密度较差;而且有机溶剂消耗大,对环境污染大。因此,寻找更简便、快速且对环境友好的苯B[a]P测定方法具有非常重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法,其能够对吸烟者尿液中苯并[a]芘进行快速有效提取分离,无需多次的提取、转移、浓缩等过程,整个样品前处理过程高效简便,保障了检测结果的准确性和精密度。一种利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法,包括以下步骤:(1)标准溶液的配制:准确称取0.1g的苯并[a]芘于100mL容量瓶中,用乙腈定容至浓度为1.0mg/mL标准储备液,并逐级稀释标准储备液得到6级标准工作溶液,分别为: ...
【技术保护点】
1.一种利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)标准溶液的配制:准确称取0.1g的苯并[a]芘于100mL容量瓶中,用乙腈定容至浓度为1.0mg/mL标准储备液,并逐级稀释标准储备液得到6级标准工作溶液,分别为:10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、80.0ng/mL、120.0ng/mL、200.0ng/mL,通过HPLC分析,以标样峰面积(A)与浓度(C)进行线性回归,得到线性回归方程;(2)样品前处理:准确量取吸烟者尿液样品10~30mL于50mL锥形瓶中,用0.2mol/L的HCl将尿液样品的pH调节到5,并加入0.5mol/L的醋酸缓冲液(pH 5.0)1.25~3.75mL;随后再加入60μL的β‑葡糖甘酸酶/芳基硫酸酯酶,在37℃的振荡水浴锅中酶解8~12h,将酶解液浓缩至干,加入1.0~3.0g的硅胶并与尿液样品充分研磨均匀,烘干;(3)样品提取、浓缩:将步骤(2)处理好的样品置于本专利技术自制的提取净化装置中,冷凝回流、浓缩;(4)样品检测:用乙腈溶解步骤(3)浓缩后的残留物,并过滤至色 ...
【技术特征摘要】
1.一种利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)标准溶液的配制:准确称取0.1g的苯并[a]芘于100mL容量瓶中,用乙腈定容至浓度为1.0mg/mL标准储备液,并逐级稀释标准储备液得到6级标准工作溶液,分别为:10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、80.0ng/mL、120.0ng/mL、200.0ng/mL,通过HPLC分析,以标样峰面积(A)与浓度(C)进行线性回归,得到线性回归方程;(2)样品前处理:准确量取吸烟者尿液样品10~30mL于50mL锥形瓶中,用0.2mol/L的HCl将尿液样品的pH调节到5,并加入0.5mol/L的醋酸缓冲液(pH5.0)1.25~3.75mL;随后再加入60μL的β-葡糖甘酸酶/芳基硫酸酯酶,在37℃的振荡水浴锅中酶解8~12h,将酶解液浓缩至干,加入1.0~3.0g的硅胶并与尿液样品充分研磨均匀,烘干;(3)样品提取、浓缩:将步骤(2)处理好的样品置于本发明自制的提取净化装置中,冷凝回流、浓缩;(4)样品检测:用乙腈溶解步骤(3)浓缩后的残留物,并过滤至色谱瓶中,利用HPLC进行检测;(5)采用峰面积法进行定量计算,通过样品中苯并[a]芘的峰面积代入线性回归方程计算,即可确定吸烟者尿液样品中的苯并[a]芘含量。2.根据权利要求1所述的利用带固相萃取功能的索氏提取装置检测吸烟者尿液中苯并[a]芘的方法,其特征在于,步骤(3)中的HPLC的检测条件为:色谱条件:色谱柱为WatersAcquityUPLCBEHC18色谱柱(2.1×50mm...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘欣,李雪梅,杨光宇,李晶,黄海涛,许永,孔维松,米其利,王晋,高茜,杨叶昆,
申请(专利权)人:云南中烟工业有限责任公司,
类型:发明
国别省市:云南,53
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