The invention discloses a method for detecting cecropin B using Fe3O4@Au nanoparticles as a signal amplifier, which comprises the following steps: 1) acid treatment of the upper and lower slide; 2) soaking the upper slide in DMOAP, then rinsing and drying; at the same time soaking the lower slide in TEA/DMOAP, then rinsing and drying; 3) dropping cecropin B antibody solution onto the surface of the lower slide, incubating, then rinsing and blowing. Dry; 4) Fe3O4@Au composite cecropin B solution to be detected was added to the lower slide, incubated, then rinsed and dried; 5) The upper slide was placed on the lower slide, and filled with liquid crystal cell formed by liquid crystal 5CB between them, and then observed the color and brightness of the optical signal of the liquid crystal cell. This method can detect cecropin B with low cost, high sensitivity, less impact on objective environment and fast detection speed.
【技术实现步骤摘要】
一种以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法
本专利技术属于抗菌肽检测
,涉及一种以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法。
技术介绍
Fe3O4@Au复合纳米微粒是纳米级别的Fe3O4和Au形成的复合材料,以Fe3O4纳米微粒为核,Au纳米微粒包覆在Fe3O4纳米微粒周围形成Fe3O4-Au核壳结构,又被称为金磁复合微粒。其具有超顺磁性、良好的生物相容性及低毒性等优点,因此经常被应用于磁性靶向药物输送、生物分离、传感器、磁共振成像、抗体标记等领域。崔亚丽等在2001年首次合成了Fe3O4@Au复合纳米微粒,首先在水溶液中合成Fe3O4纳米微粒,将合成的Fe3O4纳米微粒作为“种子”加入到Au3+溶液中,以羟胺还原Au3+形成Au包覆的Fe3O4@Au复合纳米微粒。Jon等制备了一种PEG修饰的核壳Fe3O4@Au复合纳米微粒,并且发现其对生物细胞无毒副性,更加适应于生物体内检测。天蚕素是最早被发现和研究的一种阳离子抗菌肽。天蚕素B(CB)对革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌均具有很强的杀伤力,而对真菌和真核细胞没有毒,而在动植物抗病基因工程、植物育种、生物饲料添加剂等领域有着巨大的潜在应用价值。然而,现有的检测手段,现有多肽检测方法有电位滴定法、高效液相色谱法等,电位滴定法滴定终点难以判定,且受客观环境影响大;高效液相色谱法的分析成本高,耗时长。
技术实现思路
针对现有技术中存在的问题,本专利技术提供一种以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的装置及检测方法,能够实现天蚕素B的检测,且检测成本低,检测灵敏度高,受客观环境影响较小,且检测 ...
【技术保护点】
1.一种以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取上玻片及下玻片,将上玻片及下玻片进行酸处理,使其表面产生羟基,然后冲洗后吹干;2)将上玻片浸入DMOAP水溶液中进行浸泡,再冲洗后吹干;同时将下玻片放置于含TEM和DMOAP的乙醇溶液中浸泡,然后冲洗后吹干;3)将天蚕素B抗体溶液滴加到下玻片表面,并放置在28℃‑40℃的温度下温育,再冲洗后吹干;4)将Fe3O4@Au和天蚕素B的复合溶液滴加到下玻片上,再放置于28℃‑40℃的温度下温育,然后冲洗后吹干;5)将上玻片放置于下玻片上,其中,上玻片与下玻片之间用聚酯片隔开,聚酯片的中部开设有空腔,该空腔的一侧开口,再将热致型液晶加热使其呈各向同性的液态,然后将热致型液晶从开口处注入到所述空腔内,使得热致型液晶注满整个空腔,再冷却至室温,得液晶池,然后利用偏光显微镜观察液晶池光学信号的颜色及亮度,以实现对天蚕素B的检测。
【技术特征摘要】
1.一种以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取上玻片及下玻片,将上玻片及下玻片进行酸处理,使其表面产生羟基,然后冲洗后吹干;2)将上玻片浸入DMOAP水溶液中进行浸泡,再冲洗后吹干;同时将下玻片放置于含TEM和DMOAP的乙醇溶液中浸泡,然后冲洗后吹干;3)将天蚕素B抗体溶液滴加到下玻片表面,并放置在28℃-40℃的温度下温育,再冲洗后吹干;4)将Fe3O4@Au和天蚕素B的复合溶液滴加到下玻片上,再放置于28℃-40℃的温度下温育,然后冲洗后吹干;5)将上玻片放置于下玻片上,其中,上玻片与下玻片之间用聚酯片隔开,聚酯片的中部开设有空腔,该空腔的一侧开口,再将热致型液晶加热使其呈各向同性的液态,然后将热致型液晶从开口处注入到所述空腔内,使得热致型液晶注满整个空腔,再冷却至室温,得液晶池,然后利用偏光显微镜观察液晶池光学信号的颜色及亮度,以实现对天蚕素B的检测。2.根据权利要求1所述的以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法,其特征在于,步骤1)中,将上玻片及下玻片用Piranha溶液于80℃-100℃的温度下浸泡,使其表面产生羟基。3.根据权利要求1所述的以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法,其特征在于,步骤2)中,DMOAP水溶液的体积分数为0.1-0.4%。4.根据权利要求1所述的以Fe3O4@Au为信号放大器检测天蚕素B的方法,其特征在于,步骤2)中,下玻片在60℃-80℃乙醇溶液中浸泡...
【专利技术属性】
技术研发人员:苏秀霞,刘欢,彭正华,张婧,张海宁,徐佳,晏春苗,胡金龙,
申请(专利权)人:陕西科技大学,
类型:发明
国别省市:陕西,61
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