The invention discloses a kit for mutation detection of POU3F4, a pathogenic gene of inner ear malformation/incompletely segregated type III cochlear malformation. The kit includes reagents for extracting DNA from the sample to be tested, PCR reaction reagents for amplifying the sample DNA, and reagents for sequencing the amplified products of the PCR. The PCR reaction reagents for amplifying the sample DNA include PCR primers. The kit can be used to detect the mutation of c.255_297del43 of POU3F4 gene in patients, thereby diagnosing the causes of inner ear malformation/incompletely segregated type III cochlear malformation. The kit will be helpful for clinical screening of POU3F4 mutation in patients with inner ear malformation/incompletely segregated type III cochlear malformation, and provide basis for diagnosis of patients with inner ear malformation/incompletely segregated type III cochlear malformation. According to.
【技术实现步骤摘要】
内耳畸形/不完全分隔III型耳蜗畸形致病基因POU3F4突变检测用试剂盒
本专利技术涉及基因检测领域,具体涉及在临床诊断内耳畸形/不完全分隔III型耳蜗畸形中应用的POU3F4基因突变c.255_297del43(p.Glu86Thrfs87*)分型检测试剂盒。
技术介绍
遗传性非综合征耳聋的遗传方式分为五种:一、常染色体显性及不完全显性,占22%;二、常染色体隐性遗传,占77%;三、X-连锁遗传;四、Y-连锁遗传;五、线粒体母系遗传。X染色体连锁引起的非综合征耳聋约占遗传性耳聋的1%-2%。目前,在X染色体上已确定的引起非综合征耳聋的基因有4个,分别是COL4A6、PRPS1、POU3F4和SMPX,其中X-连锁引起的非综合征耳聋中40%是由POU3F4基因引起的。POU3F4基因是首个发现的导致X-连锁非综合征型耳聋的基因,人类POU3F4基因位于Xq21.1区域,仅有一个外显子,外显子区域全长1491bp,开放阅读框架全长1083bp,编码361个氨基酸。POU3F4基因是一种转录因子,属于POU结构域家族成员之一,该家族基因均含有一个POU区域。在POU区域由一个高度保守的看家区域(含60个氨基酸)和一个POU特异区(含76-78个氨基酸)组成。POU家族基因对于器官形成、细胞分化发挥着极其重要的作用,POU3F4基因与内耳的发育关系密切。Minowa等在DFN3老鼠模型中发现老鼠中耳发育正常,但是听性脑干反应阈值增加;进一步研究发现其内耳螺旋韧带中的纤维细胞发生形态学改变,而内耳中其他组织细胞没有发生变化,故认为Brn4基因(人类POU3F4基因 ...
【技术保护点】
1.一种用于检测POU3F4基因c.255_297del43突变的试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括用于扩增DNA片段的PCR反应试剂,所述PCR反应试剂包括PCR引物,该PCR引物扩增的目标片段包含POU3F4基因编码区第255‑297位所对应的碱基。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测POU3F4基因c.255_297del43突变的试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括用于扩增DNA片段的PCR反应试剂,所述PCR反应试剂包括PCR引物,该PCR引物扩增的目标片段包含POU3F4基因编码区第255-297位所对应的碱基。2.根据权利要求1所述一种用于检测POU3F4基因c.255_297del43突变的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括用于从待测个体中提取PCR扩增所需的模板DNA的试剂。3.根据权利要求1所述一种用于检测POU3F4基因c.255_297del43突变的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括用于对PCR扩增的目标片段进行测序的试剂。4.根据权利要求1所述一种用于检测POU3F4基因c.255_297del43突变的试剂盒,其特征在于:所述PCR引物选自引物对P1,引物对P1的序列为:POU3F4-F1:5’-TAACCCGTGCTAGCGTCTTT-3’;POU3F4-R1:5’-CGAGCGAACGAGAGAGAGAG-3’。5.根据权利要求1所述一种用于检测POU3F4基因c.255_297del43突变的试剂盒,其特征在于:所述PCR引物选自引物对P2,引物对P2的序列为:POU3F4-F2:5’-ACCTCCCGCACCGCTATT-3’;POU3F4-R2:5’-CGAGCGAACGAGA...
【专利技术属性】
技术研发人员:查定军,李薇,陈俊,安晓刚,梁鹏飞,王淑娟,李琼,邱建华,
申请(专利权)人:中国人民解放军第四军医大学,
类型:发明
国别省市:陕西,61
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