黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了黄杆菌发酵提取物在化妆品中的应用。本发明专利技术人首次发现黄杆菌发酵提取物具有很好的抗氧化效果，将黄杆菌发酵提取物应用于化妆品中，得到了很好的祛皱美白效果，这一发现不仅拓宽了黄杆菌的应用领域，同时扩大了微生物发酵产物的使用选择，并补充了化妆品抗氧化原料。

Fermentation Extract of Flavobacillus and Its Application in Cosmetics

The invention discloses the application of Flavobacterium fermentation extract in cosmetics. For the first time, the Flavobacterium fermentation extract has good antioxidant effect. The Flavobacterium fermentation extract is applied to cosmetics and has good wrinkle-removing and whitening effect. This discovery not only broadens the application field of flavobacterium, but also enlarges the use and selection of microbial fermentation products, and adds antioxidant raw materials for cosmetics.

【技术实现步骤摘要】
黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用
本专利技术涉及化妆品领域，特别涉及黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用。
技术介绍
美国化学专家Dr.Harman于1993年时在DrugsAging期刊中证实，过多的自由基是造成生物老化的重要原因。在正常情况下，自由基的产生和消除处于动态平衡状态，然而，不论是生物体自身氧化代谢的反应过程，或是外在环境中的离子辐射，以及诸如空气污染与化学物质等的环境污染物，生活压力大、失眠等都会使生物体内自由基的动态平衡遭到破坏，而不断的产生自由基及其衍生物。对于皮肤而言，自由基会促进胶原蛋白的交联聚合，减少弹性蛋白基因，加速弹性纤维降解，还会直接降解透明质酸，导致真皮保湿性、张力、弹性和柔软性等产生改变，继而引起皮肤衰老、形成皱纹。而且自由基还会侵害人体细胞造成细胞磷脂或不饱和脂肪酸过氧化，继而还可以与蛋白质结合形成脂褐素，它们在细胞内大量沉积，妨碍细胞代谢，引起细胞老化，导致肤色暗沉。抗氧化即消除体内的自由基，是延缓衰老的关键途径。抗氧化剂的发展史是人类解决衰老的奋斗历程，总的来说可分为四代，第一代抗氧化剂主要是维生素类，包括VC、VE、生育酚，但这类抗氧化剂稳定性较差，其应用受到限制。第二代抗氧化剂包括β胡萝卜素、辅酶Q10，过氧化歧化酶SOD等，在实际应用中也遇到了不少难题：酶分子量通常都比较大，不易被皮肤吸收；酶易受温度和其他化学物质的影响而失活，难于保存和进行化学生产；失活的SOD反而促使发生自由基连锁反应，加速衰老过程。第三代抗氧化剂有黄酮类（如：白藜芦醇、芦丁）、类黄酮类（花青素（OPC）、葡萄籽提取物）、多酚类（原花青素、桂皮酸类、阿魏酸、丁羟甲苯、没食子酸丙酯、儿茶素、茶叶提取物）、硫辛酸、番茄红素类等，这类抗氧化剂具有相对分子量适中，稳定性稍好的特点而应用相对广泛。第四代抗氧化剂有虾青素、富勒烯等，此外，人体内存在着天然的抗氧化物质，包括谷胱甘肽（GSH）、褪黑素、尿酸、肌肽等也可以通过体外合成来制备。而黄杆菌发酵提取物具有抗氧化能力，同时作为化妆品制剂还未被发现。目前，兰州交通大学从菘蓝中筛选到的一株黄杆菌，经验证对植物病原菌有抑制作用；南京农业大学保藏黄杆菌菌种，发现其具有降解甲氰菊酯的能力。
技术实现思路
本专利技术提供一种新型抗氧化剂——黄杆菌发酵提取物。黄杆菌菌株（Microbacteriummaritypicum），0.4~0.8μm×1.0~4.0μm，属于微杆菌属，其在培养过程中分泌类胡萝卜素颜色物质，经发酵提取后，有明显的抗氧化作用，应用于化妆品中，具有很好的祛皱美白效果。这一发现不仅拓宽了黄杆菌的应用领域，同时扩大了微生物发酵产物的使用选择，并补充了化妆品抗氧化原料。本专利技术的目的是由以下技术方案实现的：黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用，所述黄杆菌发酵提取物含有抗氧化成分，通过筛选的黄杆菌经菌体培养、发酵、提取和纯化制成的冻干粉或溶液作为化妆品制剂，起到抗氧化作用。所述发酵为液态发酵、半固态发酵中的一种或两种；所述发酵的过程是将活化的黄杆菌Microbacterium单菌落接种到LB培养基中，好氧过夜培养获得种子液，然后按照接种量5-10%将培养好的种子接种到发酵培养基中发酵，发酵温度30-32℃，适当光照，发酵24-36小时，得到含有抗氧化物质的黄杆菌发酵液。进一步地，所述发酵培养基组成如下：胰蛋白胨10-20g/L、酵母提取物5-10g/L、氯化钠5-10g/L、葡萄糖5-20g/L、七水硫酸镁0.01-0.05g/L、硫酸锰0.01-1g/L、水1L，pH6.5-6.8。所述的提取和纯化方法选自以下至少三种的组合：浸提、萃取、沉淀、离心过滤、干燥、冻干。所述提取过程是：将发酵后的黄杆菌发酵液，反复离心收集菌体，然后加入萃取剂重悬菌体，再进行菌体破碎，离心，去除菌体沉淀，得黄杆菌发酵提取物的粗提液，再经旋转蒸发或真空干燥去除萃取剂，得到黄杆菌发酵提取物成分，最后还可经柱层析法进一步纯化。所述化妆品的形式包括但不限于水剂、凝胶、啫喱、乳液、膏霜、贴片精华类、气雾剂类、蜡基类、粉基类、护肤清洁类、护发清洁类、护发类、染烫发类、牙膏类等，功效包括但不限于保湿、美白、抗衰老、抗敏、舒缓、修复、防晒、祛痘、控油、生发、育发、美容修饰、美体、美乳等；使用部位包括但不限于头部、面部、颈部及全身；所述的黄杆菌发酵提取物占化妆品总质量的0-100%，不含两端数值0和100。进一步地，所述黄杆菌发酵提取物占化妆品总质量的0.005-50%。更进一步地，所述黄杆菌发酵提取物占化妆品总质量的0.01-20%。本专利技术的有益效果：本专利技术人首次发现黄杆菌发酵提取物具有很好的抗氧化效果，而后将黄杆菌发酵提取物应用于化妆品中，得到了很好的祛皱美白效果，这一发现不仅拓宽了黄杆菌的应用领域，同时扩大了微生物发酵产物的使用选择，并补充了化妆品抗氧化原料。下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步说明。附图说明图1为图1为黄杆菌发酵提取物与维生素C羟基自由基清除能力的对比图；图2为实例产品和对照产品对皮肤皱纹的影响；图3为实例产品和对照产品对皮肤颜色的影响。具体实施方式下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。黄杆菌发酵提取物的制备方法如下：1、黄杆菌菌体培养首先配置种子培养基：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化钠10g/L、蒸馏水1L，ph6.5-7.0，将活化的黄杆菌Microbacterium单菌落接种到培养基中，在30℃摇瓶好养培养24小时获得黄杆菌种子；2、黄杆菌发酵首先配置发酵培养基：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物6g/L、氯化钠6g/L、葡萄糖15g/L、七水硫酸镁0.03g/L、硫酸锰0.02g/L、水1L，ph6.5-6.8，黄杆菌种子在30-32℃下发酵培养32小时，适当光照，得到含有抗氧化物质的黄杆菌发酵液；3、黄杆菌发酵液的提取和纯化首先将发酵后的黄杆菌发酵液，5000r／min离心25min收集菌体，再加入蒸馏水，重悬菌体，再次离心，收集菌体；然后加入约10g/L甲醇，震荡2-4小时，离心(8000r／min，4℃)40min，去除菌体沉淀，收集上清液，得到黄杆菌发酵提取物的粗提物，再经过真空干燥获得黄杆菌发酵提取物成分。羟基自由基(·OH)清除能力的测定羟基自由基是活性氧中最活泼的自由基，也是毒性最大的自由基，几乎能与活细胞中任何分子发生反应，且反应速度极快。生物体在代谢过程中即可产生·OH，它与蛋白质交联变性，给人体带来危害。本专利技术利用Fenton试剂法分别测定黄杆菌发酵提取物与VC对羟基自由基的清除能力，具体测定步骤如下:（1）在10mL具塞比色管中，先后加入2mLpH为7的混合磷酸盐缓冲溶液、1.2mL0.50mmol/L的苋菜红、1.0mL4.0mmol/L的硫酸亚铁溶液和1.0mL0.02%的H2O2，用水稀至刻度，混匀，在室温下反应10min，然后于510nm波长处，用1cm比色皿，测其吸光度A1；(2)按以上操作加入各种溶液，只是不加Fenton试剂（硫酸亚铁溶液和H2O2溶液），相同条件下测定其吸光度值A0；(3)将合成的样品黄杆菌发酵提取物配制成一定浓度的乙醇溶液。按上述步骤在加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用，其特征在于，所述黄杆菌发酵提取物含有抗氧化成分，通过筛选的黄杆菌经菌体培养、发酵、提取和纯化制成的冻干粉或溶液作为化妆品制剂，起到抗氧化作用。

【技术特征摘要】
1.黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用，其特征在于，所述黄杆菌发酵提取物含有抗氧化成分，通过筛选的黄杆菌经菌体培养、发酵、提取和纯化制成的冻干粉或溶液作为化妆品制剂，起到抗氧化作用。2.如权利要求1所述的黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用，其特征在于，所述发酵为液态发酵、半固态发酵中的一种或两种；所述发酵的过程是将活化的黄杆菌Microbacteriummaritypicum单菌落接种到LB培养基中，好氧过夜培养获得种子，然后按照接种量5-10%将培养好的种子接种到发酵培养基中发酵，发酵温度30-32℃，适当光照，发酵24-36小时，得到含有抗氧化物质的黄杆菌发酵液。3.如权利要求2所述的黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用，其特征在于，所述发酵培养基组成如下：胰蛋白胨10-20g/L、酵母提取物5-10g/L、氯化钠5-10g/L、葡萄糖5-20g/L、七水硫酸镁0.01-0.05g/L、硫酸锰0.01-1g/L、水1L，pH6.5-6.8。4.如权利要求1所述的黄杆菌发酵提取物及其在化妆品中的应用，其特征在于，所述的提取和纯化方法选自以下至少三种的组合：浸提、萃取、沉淀、离心过滤、干燥、冻干。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王培培，杨秀芬，郑春阳，
申请(专利权)人：天津强微特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12