一种辅酶助提取花椒麻味物质方法技术

本发明专利技术公开了一种酶辅助提取花椒麻味物质的方法，干燥花椒果皮粉碎过筛后，按料液比1:10‑15（w:v）加入蒸馏水和花椒粉末质量2‑2.5%的酶，震荡培育后加入复合酶进行酶解，结束后按花椒粉末料液比1:10‑15（w:v）加入食用酒精震荡提取，过滤、蒸干，得花椒麻味物质粗提物；再以食用酒精复溶麻味物质初提物，离心除杂、大孔吸附树脂纯化且收集麻味物质馏分。本发明专利技术优化了酶种类、酶添加量、培育时间和温度的参数，最终得到提取率为7.6‑12.2%的花椒麻味物质，且其中包括OH‑ε‑山椒素、OH‑α‑山椒素和OH‑β‑山椒素等花椒酰胺类物质，纯度达到90‑92%，麻味感觉显著。

A Coenzyme-Assisted Extraction Method of Pepper Spicy Substances

The invention discloses an enzyme-assisted extraction method for pepper numbness substance. After crushing and sieving peel of dried pepper, distilled water and 2.5% pepper powder enzymes are added according to the material-liquid ratio of 1:10_15 (w:v). After shaking cultivation, complex enzymes are added for enzymatic hydrolysis. After the end, pepper powder-liquid ratio of 1:10_15 (w:v) is added into edible alcohol shaking extraction, filtering and steaming, pepper numbness is obtained. The crude extract of flavor substances, the primary extract of flavor substances re-dissolved by edible alcohol, the impurity removal by centrifugation, the purification by macroporous adsorption resin and the collection of flavor substance fractions. The invention optimizes the parameters of enzyme type, enzyme dosage, incubation time and temperature, and finally obtains the pepper-flavor substance with the extraction rate of 7.6 12.2%, and includes the pepper-amide substances such as OH_epsilon

【技术实现步骤摘要】
一种辅酶助提取花椒麻味物质方法
本专利技术涉及调味品生产加工领域，具体涉及一种酶辅助提取花椒麻味物质方法。
技术介绍
花椒是中国一种传统的调味品，一直深受人们所喜爱。在中国八大菜系之一的川菜中应用最为广泛。川菜以麻辣特色出名，而其中麻味来源就是花椒。经过长时间的研究发现，花椒具有麻味刺激与它所含的不饱和酰胺类物质有直接关系。这些不饱和酰胺类物质可以通过刺激舌粘膜和口腔中神经来使人产生麻木感觉和刺痛感觉，并统称这些感觉为“麻”。目前发现的花椒不饱和酰胺物质有α-山椒素、β-山椒素、OH-ε-山椒素、OH-α-山椒素、OH-β-山椒素、OH-γ-山椒素、OH-γ-异山椒素和OH-ζ-山椒素等十多种物质。在食品行业中，花椒的麻味特色一直被人所追捧，越来越多的食品被要就赋予麻味特色。目前比较流行的以麻味为主要特色的食品有肯德基中藤椒味的汉堡和鸡翅、藤椒味烤鱼和藤椒味串串等。因此可以看出，花椒麻味特色食品在未来的食品行业中会有广泛的应用前景。但是，随着便捷化、数字化和自动化生产方式的到来，以花椒果实本身为麻味物质载体加入食品体系中的应用已经越来越不能满足工业大批量生产的要求。人们迫切的需要一种纯粹的麻味物质产品，并可将其麻味程度数字化，从而达到快速且准确定量制备不同麻味程度的食品。酶辅助提取技术是通过酶的水解作用来破化细胞结构，从而释放更多的目标产物以增加提取率，因此是一种方便、安全的绿色可信提取技术。201010615194.8公开了一种花椒有效成分的萃取方法，包括以下步骤：(a)原料处理：将花椒果实在密闭容器内进行酶解破壁，然后在低温下粉碎；(b)花椒香气成分的提取分离：将花椒粉加入萃取釜内用CO2萃取；后依次进入解析釜一和解析釜二，解析釜一的压力为10-12MPa进行解析；(c)花椒麻味成分的提取分离：随后缓慢将萃取的参数升高，同时向萃取釜加入夹带剂，收集花椒麻味素。上述专利技术中虽然利用酶的水解作用来辅助提取花椒中有效成分，但是该专利技术中更多的注重了超临界CO2技术的萃取和分离，没有对酶处理进行详细的研究和工艺参数的优化。现有酶辅助提取花椒麻味物质的技术中，科技工作者大多着重于利用其它技术为主要提取方法（如超临界流体提取），而仅仅将酶作为一种原料预处理手段，因此没有对酶处理进行详细的研究和参数优化。
技术实现思路
鉴于上述不足之处，本专利技术的目的在于提供一种酶辅助提取花椒麻味物质方法，研究影响酶处理的重要因素，包括酶种类、酶添加量、培育时间、温度和pH，从而得到一种高效的提取花椒麻味物质的酶处理方法。为了达到上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：一种辅酶助提取花椒麻味物质的方法，包括如下步骤：（1）原料预处理：将干燥的花椒果皮利用粉碎机粉碎，过筛网40-60目，得花椒粉末备用；（2）酶水解处理：称取花椒粉末按料液比1:10-15（w:v）加入蒸馏水，并加入花椒粉末质量2-2.5%的酶，控制温度、时间、pH值进行震荡培育，得花椒粉末酶解液备用；（3）溶剂萃取：将花椒粉末酶解液按料液比1:10-15（w:v）加入食用酒精，控制温度、时间震荡提取，待提取结束后过滤、收集滤液、蒸干回收食用酒精，得花椒麻味物质粗提物备用；（4）麻味物质纯化：利用食用酒精复溶花椒麻味物质粗提物，并离心除去固体杂质，收集上清液，将上清液通入大孔吸附树脂层析柱中，收集麻味物质馏分，最后蒸干回收食用酒精，得一种花椒麻味物质。进一步的，所述花椒果皮选自红花椒、藤椒或青花椒中的一种。进一步的，所述步骤（2）中控制温度为40-45℃、控制时间为2.5-3h、控制pH值为4.5-5.5。进一步的，所述酶由纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶按质量比3:2:1组成。进一步的，所述酶还可以由纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶按质量比2:1:1组成。进一步的，所述步骤（3）中控制温度为50-60℃、控制时间为3-3.5h。进一步的，所述步骤（4）中离心条件为4000-5000r/min，离心时间5-10min。进一步的，所述pH值的调控以10mg/ml的柠檬酸进行调节。本专利技术还公开了一种采用上述方法制得的花椒麻味物质。本专利技术与现有提取方法相比，具有如下优点：（1）酶种类的选择对于酶处理是至关重要的。本专利技术通过单因素实验从众多水解酶中优选出3种具有良好水解花椒细胞壁的酶，分别是纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶。并且通过混料实验研究它们之间的协同作用，发现比例在3:2:1和2:1:1时协同效果最好。因此，得到了一种具有优异水解花椒细胞壁效果的复合酶配比。（2）本专利技术中利用系统的实验对影响酶处理效果的因素进行了研究并优化，从中发现影响酶处理的主要因素，包括酶种类、酶添加量、培育时间和温度。从而对其工艺参数进行了优化，最终得到花椒麻味物质（红花椒、藤椒和青花椒）提取率为7.6-12.2%，比一般的提取方法（2.0-8.9%）要高很多。（3）本专利技术通过酶辅助食用酒精浸提，得到了一种黄色或黄绿色且带有花椒香味的浸膏状流体。通过后续进一步的高效液相检测发现，花椒麻味物质中存在OH-ε-山椒素、OH-α-山椒素和OH-β-山椒素等花椒酰胺类物质，纯度达到90-92%。因此说明，本专利技术提取产物麻味物质纯度高、麻味感觉显著，是一种品质较好的花椒麻味物质提取物。附图说明图1为红花椒麻味物质HPLC检测酰胺类物质种类；图2为实施例1中花椒残渣电镜扫描图；图3为实施例2中花椒残渣电镜扫描图；图4为实施例3中花椒残渣电镜扫描图；图5为对比例1中花椒残渣电镜扫描图；图6为对比例2中花椒残渣电镜扫描图；图7为对比例3中花椒残渣电镜扫描图。具体实施方式下面通过实施例和对比例对本专利技术进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本专利技术进行进一步说明，不能理解为对本专利技术保护范围的限制。该领域的技术熟练人员可以根据上述本专利技术的内容，对本专利技术做出一些非本质的改进和调整。实施例1一种酶辅助提取花椒麻味物质（1）原料预处理：将干燥的红花椒果皮利用粉碎机粉碎，并控制过筛网40目。（2）酶水解处理：称取上述（1）中花椒粉末按料液比1:15g/ml（w:v）加入蒸馏水，并加入花椒粉末质量2%的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶三者比例为3:2:1）；采用震荡培育，并控制温度40℃、时间2.5h、pH4.5。（3）提取麻味物质：在上述（2）酶处理结束后，立即按花椒粉末料液比1:15g/ml（w:v）加入食用酒精。控制温度50℃、时间3h，采用震荡方式提取。待提取结束后进行过滤，收集滤液，并蒸干回收食用酒精，得到花椒麻味物质粗提物。（4）麻味物质纯化：利用食用酒精复溶（3）中麻味物质初提物，并在4000r/min，5min条件下除去固体杂质，收集上清液；然后将上清液通入大孔吸附树脂层析柱中，收集麻味物质馏分；最后蒸干回收食用酒精，得到花椒麻味物质。实施例2一种酶辅助提取花椒麻味物质（1）原料预处理：将干燥的红花椒果皮利用粉碎机粉碎，并控制过筛网40目。（2）酶水解处理：称取上述（1）中花椒粉末按料液比1:15g/ml（w:v）加入蒸馏水，并加入花椒粉末质量2%的复合酶（纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶三者比例为2:1:1）；采用震荡培育，并控制温度40℃、时间2.5h、pH4.5。（3）提取麻味物质：在上述（2）酶处理结束本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酶辅助提取花椒麻味物质的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）原料预处理：将干燥的花椒果皮利用粉碎机粉碎，过筛网40‑60目，得花椒粉末备用；（2）酶水解处理：称取花椒粉末按料液比1:10‑15（w:v）加入蒸馏水，并加入花椒粉末质量2‑2.5%的酶，控制温度、时间、pH值进行震荡培育，得花椒粉末酶解液备用；（3）溶剂萃取：将花椒粉末酶解液按料液比1:10‑15（w:v）加入食用酒精，控制温度、时间震荡提取，待提取结束后过滤、收集滤液、蒸干回收食用酒精，得花椒麻味物质粗提物备用；（4）麻味物质纯化：利用食用酒精复溶花椒麻味物质粗提物，并离心除去固体杂质，收集上清液，将上清液通入大孔吸附树脂层析柱中，收集麻味物质馏分，最后蒸干回收食用酒精，得一种花椒麻味物质。

【技术特征摘要】
1.一种酶辅助提取花椒麻味物质的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）原料预处理：将干燥的花椒果皮利用粉碎机粉碎，过筛网40-60目，得花椒粉末备用；（2）酶水解处理：称取花椒粉末按料液比1:10-15（w:v）加入蒸馏水，并加入花椒粉末质量2-2.5%的酶，控制温度、时间、pH值进行震荡培育，得花椒粉末酶解液备用；（3）溶剂萃取：将花椒粉末酶解液按料液比1:10-15（w:v）加入食用酒精，控制温度、时间震荡提取，待提取结束后过滤、收集滤液、蒸干回收食用酒精，得花椒麻味物质粗提物备用；（4）麻味物质纯化：利用食用酒精复溶花椒麻味物质粗提物，并离心除去固体杂质，收集上清液，将上清液通入大孔吸附树脂层析柱中，收集麻味物质馏分，最后蒸干回收食用酒精，得一种花椒麻味物质。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述花椒果皮选自红花椒、藤椒或...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵志峰，蒲升惠，刘福权，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川,51