一种检测左氧氟沙星的方法技术

本申请公开了药物含量测定方法技术领域的一种检测左氧氟沙星的方法，包括以下步骤：1)左氧氟沙星储备液的配制；2)TritonX‑114溶液配制；3)SDS溶液的制备；4)氯化钠溶液的制备；5)水样的采集和预处理：采集水样后经滤膜过滤后，避光保存；6)左氧氟沙星测定：分别移取左氧氟沙星储备液和水样于两只离心管中，向两只离心管中均依次加入上述步骤中制得的十二烷基硫酸钠溶液，聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，氯化钠溶液，混匀，再加入盐酸溶液，调节体系的pH至1～4，静置后离心，得到富集相，用荧光分光光度计分别对其进行测定。本方案测定准确、重现性好、操作简单、成本低、绿色环保、分析速度快并且易于推广。

A Method for the Detection of Levofloxacin

This application discloses a method for the determination of levofloxacin in the technical field of drug content determination, including the following steps: 1) preparation of levofloxacin reserve solution; 2) preparation of Triton X 114 solution; 3) preparation of SDS solution; 4) preparation of sodium chloride solution; 5) collection and pretreatment of water samples: collection of water samples after filtration through a filter membrane, light-shielded preservation; 6) determination of levofloxacin: separation of Triton X 114 solution; Separately remove the levofloxacin reserve solution and water sample in two centrifugal tubes, and then add the sodium dodecyl sulfate solution, polyethylene oxide mono-tert-octyl phenyl ether solution, sodium chloride solution, mix and add hydrochloric acid solution, adjust the pH of the system to 1-4, centrifuge the concentrated phase after standing, and use fluorescence spectrophotometer to separate them. The determination was carried out. The method is accurate, reproducible, easy to operate, low cost, green, environmental friendly, fast and easy to popularize.

【技术实现步骤摘要】
一种检测左氧氟沙星的方法
本专利技术涉及药物含量测定方法
，具体涉及一种检测左氧氟沙星的方法。
技术介绍
左氧氟沙星化学名为(S)-(-)-9-氟-2,3-二氢-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1,2,3-de]-[1,4]苯并恶嗪-6-羧酸，分子式为C18H20FN3O4，是第三代喹诺酮类广谱抗菌剂，具有广谱抗菌作用，抗菌作用强，对多数肠杆菌科细菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌和淋病奈瑟菌等革兰阴性菌有较强的抗菌活性。左氧氟沙星于1993年在日本上市，通过抑制细菌的DNA旋转酶的活性，从而抑制细菌DNA合成和复制而导致细菌的死亡，起到快速杀菌的作用。在临床上主要应用于敏感菌所致的呼吸系统感染、泌尿系统感染、生殖系统感染、皮肤软组织感染、五官感染、肠道感染、败血症等。左氧氟沙星在治疗和预防各类疾病的同时，也会引发相关的环境微生物的耐药性问题，它能通过饮用水、食品和其他途径传播给人，因此，很有必要建立一种环境水体中左氧氟沙星的分析检测方法，以便为研究左氧氟沙星相关的环境行为和风险评价提供技术支持。
技术实现思路
本专利技术提供了一种检测水样中痕量左氧氟沙星含量的方法，它测定准确、重现性好、操作简单、成本低、绿色环保、分析速度快并且易于推广。为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种检测左氧氟沙星的方法，包括以下步骤：1)左氧氟沙星储备液的配制：将左氧氟沙星标准品用冰醋酸溶解，并定容得到左氧氟沙星储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用，使用时用二次蒸馏水逐级稀释到1.0～2.0μg/mL；2)聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液配制：取聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为0.05％～0.5％(m/v)的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；3)十二烷基硫酸钠溶液的制备：取十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为0.1％～1％(m/v)的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；4)氯化钠溶液的制备：取氯化钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为3％～12％(m/v)的氯化钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；5)水样的采集和预处理：采集水样后经0.45μm滤膜过滤后，避光保存，在3～5℃的冰箱保存备用；6)左氧氟沙星测定：分别移取2.0mL左氧氟沙星储备液和水样于两只离心管中，向两只离心管中均依次加入上述步骤中制得的十二烷基硫酸钠溶液0.5～5.0mL，聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液0.1～1.0mL，氯化钠溶液1.0～4.0mL，混匀，再加入1mol/L的盐酸溶液，调节体系的pH至1～4，用二次蒸馏水定容至10mL，摇匀，于室温下静置5～30min后离心，弃去上层水相得到富集相，取富集相用荧光分光光度计分别对其进行测定,荧光分度检测时激发波长为295.93nm，发射波长为495.97nm。本专利技术的工作原理及有益效果为：浊点萃取技术的原理是基于表面活性剂胶束水溶液的增溶作用和浊点现象，通过改变体系pH值、温度、离子强度等实验参数引发相分离，从而使疏水性物质与亲水性物质实现分离的方法，本实验在左氧氟沙星溶液中加入一定浓度的十二烷基硫酸钠溶液，使左氧氟沙星分子处于更加有序的微环境中，减小了其由于碰撞引起的能量损失和其他淬灭作用，使荧光强度增强，从而提高检测的灵敏度，之后加入非离子表面活性剂聚氧乙烯单叔辛基苯基醚与包裹着左氧氟沙星分子的十二烷基硫酸钠胶束形成阴—非离子混合胶束，对水样中的左氧氟沙星进行浊点萃取，并联用荧光分光度法进行检测聚氧乙烯单叔辛基苯基醚起到增溶和协同增敏的作用。由于阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠可使非离子表面活性剂聚氧乙烯单叔辛基苯基醚在水溶液中的溶解度增大，从而使聚氧乙烯单叔辛基苯基醚的浊点升高。此时向体系中添加盐析型电解质氯化钠可促进两相分离，使表面活性剂的浊点降低，在室温下即可实现浊点萃取，在浊点温度平衡一段时间后，通过离心的操作加快水相与富集相的两相分离，将胶束包裹着的左氧氟沙星萃取至富集相，对富集相进行稀释，联用荧光分光光度计对两只离心管内的富集相进行检测，测定的时候观察左氧氟沙星标准品的标准曲线，和荧光强度有良好的线性关系就能证明此方法也能用于检测水样中左氧氟沙星的含量。以下是对基础技术方案的优化：进一步，所述步骤6)中离心后冰浴冷却3～5min，再弃去上层水相。这样能增加富集相的粘性，使水相和富集相更快的分离。进一步，步骤1)～步骤5)中，冰箱温度均为4℃。此温度下，溶液的稳定性最好。进一步，步骤6)中离心转速为3500～4000rpm，离心时间为3～5min。这样可以使水相和富集相的分离速度更快，提高效率。进一步，步骤6)中，采用无水乙醇稀释富集相并定容至3mL后再使用荧光分光光度计对富集相进行测定。在检测时是选取富集相进行检测，前面一步的冰浴冷却增加了富集相的粘性，便于水相与富集相的分离，但是富集相粘性太强会影响到检测结果，为了确保结果更准确，采用无水乙醇稀释富集相，这样就能降低富集相粘性对检测结果的影响。附图说明图1为不同表面活性剂对浊点萃取的影响；图2为本专利技术的左氧氟沙星浊点萃取前后的激发光谱图；图3为本专利技术的左氧氟沙星浊点萃取前后的发射光谱图；图4为pH在1～14范围内对浊点萃取的影响；图5为pH在1～4范围内对浊点萃取的影响；图6为十二烷基硫酸钠溶液浓度对浊点萃取的影响；图7为聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液浓度对浊点萃取的影响；图8为氯化钠浓度对浊点萃取的影响；图9为平衡温度对浊点萃取的影响；图10为平衡时间对浊点萃取的影响；图11为本专利技术左氧氟沙星浊点萃取后的标准曲线。具体实施方式下面通过具体实施方式进一步详细说明：附图说明：图中a表示浊点萃取前，b表示浊点萃取后。实施例所示：本专利技术的实施例，一种检测左氧氟沙星的方法，包括以下步骤：1)左氧氟沙星储备液的配制：精密称取左氧氟沙星标准品10.0mg于烧杯中，用0.5mL冰醋酸完全溶解后，用二次蒸馏水定容至100mL的容量瓶中，摇匀制得浓度为100.0μg/mL储备液，于4℃的冰箱保存备用；使用时用二次蒸馏水逐级稀释；2)聚氧乙烯单叔辛基苯基醚(TritonX-114)溶液配制：精密称取5.00g聚氧乙烯单叔辛基苯基醚于烧杯中，用适量二次蒸馏水溶解，定容到100mL的容量瓶中，摇匀制得浓度为0.15％(m/v)的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在4℃的冰箱保存备用；3)十二烷基硫酸钠(SDS)溶液的制备：精密称取十二烷基硫酸钠固体2.00g于烧杯中，用适量二次蒸馏水溶解，定容到100mL的容量瓶中，浓度为0.4％(m/v)，在4℃的冰箱保存备用；4)氯化钠溶液的制备：精密称取氯化钠固体6.00g于烧杯中，用适量二次蒸馏水溶解，定容到100mL的容量瓶中，浓度为6.0％(m/v)，在4℃的冰箱保存备用；5)水样的采集和预处理：本实施例中的水样：湘江河水、仁江河水、校园池塘水、天鹅湖水和自来水水样，均采集于遵义当地，采集后的水样经0.45μm滤膜过滤后，放置于棕色玻璃瓶中，4℃的冰箱保存备用。6)左氧氟沙星测定：分别移取2.0mL的左氧氟沙星溶液和水样于两只15mL离心管中，向两只离心管中均依次加入0.4％(m/v)的SDS溶液2.0mL，0.15％(m/v)的Tri本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测左氧氟沙星的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)左氧氟沙星储备液的配制：将左氧氟沙星标准品用冰醋酸溶解，并定容得到左氧氟沙星储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用，使用时用二次蒸馏水逐级稀释到1.0～2.0μg/mL；2)聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液配制：取聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为0.05％～0.5％(m/v)的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；3)十二烷基硫酸钠溶液的制备：取十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为0.1％～1％(m/v)的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；4)氯化钠溶液的制备：取氯化钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为3％～12％(m/v)的氯化钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；5)水样的采集和预处理：采集水样后经0.45μm滤膜过滤后，避光保存，在3～5℃的冰箱保存备用；6)左氧氟沙星测定：分别移取2.0mL左氧氟沙星储备液和水样于两只离心管中，向两只离心管中均依次加入上述步骤中制得的十二烷基硫酸钠溶液0.5～5.0mL，聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液0.1～1.0mL，氯化钠溶液1.0～4.0mL，混匀，再加入1mol/L的盐酸溶液，调节体系的pH至1～4，用二次蒸馏水定容至10mL，摇匀，于室温下静置5～30min后离心，弃去上层水相得到富集相，取富集相用荧光分光光度计分别对其进行测定,荧光分度检测时激发波长为295.93nm，发射波长为495.97nm。...

【技术特征摘要】
1.一种检测左氧氟沙星的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)左氧氟沙星储备液的配制：将左氧氟沙星标准品用冰醋酸溶解，并定容得到左氧氟沙星储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用，使用时用二次蒸馏水逐级稀释到1.0～2.0μg/mL；2)聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液配制：取聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为0.05％～0.5％(m/v)的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；3)十二烷基硫酸钠溶液的制备：取十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为0.1％～1％(m/v)的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；4)氯化钠溶液的制备：取氯化钠用二次蒸馏水溶解，定容得到浓度为3％～12％(m/v)的氯化钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；5)水样的采集和预处理：采集水样后经0.45μm滤膜过滤后，避光保存，在3～5℃的冰箱保存备用；6)左氧氟沙星测定：分别移取2.0mL左氧氟沙星储备液和水样于两只离心管中，向两只离心管中均依次加入上述步骤中制...

【专利技术属性】
技术研发人员：余兰，姜坤妤，
申请(专利权)人：遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52