一种细胞保存液及其应用制造技术

本发明专利技术实施例公开了一种细胞保存液及其应用，该细胞保存液包括如下组分：0.03‑0.07M Tris缓冲液45‑55％(v/v)、93‑97％乙醇45‑55％(v/v)、钙盐8‑12％(w/w)和镁盐8‑12％(w/w)；本发明专利技术细胞保存液能够避免核酸物质的丢失，以及提高保存细胞形态的稳定性，并提高了保存样本时间。

A Cell Preservation Solution and Its Application

The embodiment of the invention discloses a cell preservation solution and its application, which comprises the following components: 0.03 0.07M Tris buffer 45 55% (v/v), 93 97% ethanol 45 55% (v/v), calcium salt 8 12% (w/w) and magnesium salt 8 12% (w/w); the cell preservation solution of the invention can avoid the loss of nucleic acid substances, improve the stability of the preserved cell morphology and improve the preservation. Sample storage time.

【技术实现步骤摘要】
一种细胞保存液及其应用
本专利技术实施例涉及检测
，具体涉及一种细胞保存液及其应用。
技术介绍
HPV检测是对付人乳头瘤病毒的一种手段，病毒是一种DNA病毒，人类是HPV唯一的宿主。HPV进入机体皮肤粘膜后，主要潜伏于表皮内基底细胞间，一旦时机成熟它就会致病。TCT检查是液基薄层细胞检测的简称，采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断，它是目前国际上最先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，与传统的宫颈刮片巴氏涂片检查相比明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率。目前，针对HPV和TCT的检测过程中，均需采用细胞保存液对宫颈细胞进行保存，然而，针对HPV检测和TCT检测所采用的宫颈细胞保存液为两种不同的保存方法；此外，现有细胞保存液保存时间较短，且HPV病毒核酸容易丢失，导致检出率较低；另外，现有细胞保存液保存细胞保持形态不变的时间较短，一般为30天左右。
技术实现思路
为此，本专利技术实施例提供一种细胞保存液，用以解决现有技术中由于所保存的核酸容易丢失以及细胞形态易改变导致的宫颈细胞保存时间较短，以及HPV检出率较低的问题；以及针对HPV和TCT检查需要两种不同细胞保存液对宫颈细胞进行保存的问题。为了实现上述目的，本专利技术的实施方式提供如下技术方案：在本专利技术的实施方式的第一方面中，提供了一种细胞保存液，所述细胞保存液包括如下组分：0.03-0.07MTris缓冲液45-55％(v/v)、93-97％乙醇45-55％(v/v)、钙盐8-12％(w/w)和镁盐8-12％(w/w)。通过上述各成分的添加以及含量的限定，实现了样本的常温保存，并且能够避免细胞保存液保存核酸物质的丢失，以及提高细胞保存液保存细胞形态的稳定性，实现了一次采样能够分别用于HPV和TCT两种检测的目的，并提高了保存时间。在本专利技术的一个实施例中，所述细胞保存液包括如下组分：0.05MTris缓冲液50％(v/v)、95％乙醇50％(v/v)、钙盐10％(w/w)和镁盐10％(w/w)。通过上述各组分含量的进一步限定，能够更好的提高所述细胞保存液保存的细胞形态以及核酸物质的稳定性。在本专利技术的另一个实施例中，所述Tris缓冲液的PH为7.5-8.0。通过对PH的限定，能够为保存样本提供稳定的环境，利于提高保存样本的保存时间。在本专利技术的又一个实施例中，所述钙盐为磷酸钙或一水氯化钙；优选地，所述钙盐为磷酸钙。在本专利技术的再一个实施例中，所述镁盐选自碳酸镁、氯化镁和溴化镁中的任意一种；优选地，所述镁盐为碳酸镁。在本专利技术的实施方式的第二方面中，提供了一种上述细胞保存液在保存宫颈细胞中的应用。上述应用能够使得细胞保存液对宫颈细胞进行常温保存，并提高了HPV病毒核酸和宫颈细胞形态的保存稳定性，实现了一份样本同时进行HPV检测和TCT检测，还提高了HPV病毒核酸的保存时间和阳性检出率，以及提高了宫颈细胞的保存时间。进一步地，所述宫颈细胞保存温度为5-30℃；保存时间为0-45天。在本专利技术的实施方式的第三方面中，提供了一种上述细胞保存液在保存胸腹水、尿液、脑脊液或肿瘤穿刺物中的应用。进一步地，所述细胞保存液保存温度为5-30℃；保存时间为0-45天。根据本专利技术的实施方式，本专利技术具有如下优点：(1)本专利技术细胞保存液能够避免核酸物质的丢失，以及提高保存细胞形态的稳定性，提高了HPV病毒核酸的保存时间和阳性检出率，以及提高了宫颈细胞形态稳定的保存时间，并实现了一次采样能够分别用于HPV和TCT两种检测。(2)本专利技术细胞保存液通过对PH的限定，能够为保存样本提供稳定的环境，利于提高保存样本的保存时间。(3)本专利技术细胞保存液还能够对胸腹水、尿液、脑脊液或肿瘤穿刺物进行保存。具体实施方式以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例为一种细胞保存液，该细胞保存液包括如下组分：0.03MTris缓冲液55％(v/v)、97％乙醇45％(v/v)、一水氯化钙8％(w/w)和氯化镁12％(w/w)；其中，Tris缓冲液PH为7.5。实施例2本实施例为一种细胞保存液，该细胞保存液包括如下组分：0.07MTris缓冲液45％(v/v)、93％乙醇55％(v/v)、磷酸钙12％(w/w)和溴化镁8％(w/w)；其中，Tris缓冲液PH为8.0。实施例3本实施例为一种细胞保存液，该细胞保存液包括如下组分：0.05MTris缓冲液50％(v/v)、95％乙醇50％(v/v)、磷酸钙10％(w/w)和碳酸镁10％(w/w)；其中，Tris缓冲液PH为7.8。对照例1本对照例为一种细胞保存液，该细胞保存液与实施例3的细胞保存液基本相同，区别仅在于磷酸钙为20％(w/w)。对照例2本对照例为一种细胞保存液，该细胞保存液与实施例3的细胞保存液基本相同，区别仅在于将碳酸镁替换为同等份数的磷酸钙。对照例3本对照例为一种细胞保存液，该细胞保存液与实施例3的细胞保存液基本相同，区别仅在于Tris缓冲液pH为7.0。实验例1选取214例需要进行HPV检查的患者，获取患者的待检测样本(宫颈脱落细胞)；将获取每位患者的待测样本分为两份，第一份按照广州凯普医学检验所保存方法进行保存及检测，检测结果为阳性患者68例；将获取每位患者的待测样本另一份根据第一份检测结果分为4组，其中，每组阳性患者均为17例，第一组54例，第二组54例，第三组53例，第四组53例；第一组样本采用实施例3中的细胞保存液进行保存，第二组采用对照例1中的细胞保存液进行保存，第三组采用对照例2中的细胞保存液进行保存；第四组采用对照例3中的细胞保存液进行保存，控制第一-四组保存液保存温度为25℃；将四组待测样本送至广州凯普医学检验所采用相同方法进行检测，具体地，分别在保存第7、30、45、50天进行检查阳性患者数；检测结果如表1所示：表1组别7天30天45天50天第一组17例17例17例16例第二组17例15例13例12例第三组15例11例8例6例第四组16例15例13例10例由表1可知：本专利技术实施例3制备得到的细胞保存液能够更好的保存细胞中HPV病毒核酸的稳定性，有效保存时间达到45天，然而改变本专利技术保存液的PH以及钙、镁离子浓度易使的HPV病毒核酸丢失，降低了阳性检出率。实验例2选取111例需要进行TCT检查的患者，获取患者的待检测样本(宫颈脱落细胞)；将获取每位患者的待测样本分为两份，第一份按照广州和实科技有限公司保存方法进行保存及检测，检测结果为阳性患者54例；将获取每位患者的待测样本另一份根据第一份检测结果分为4组，其中，第一组28例，阳性患者14例；第二组28例，阳性患者14例；第三组28例，阳性患者13例；第四组27例，阳性患者13例；第一组样本采用实施例3中的细胞保存液进行保存，第二组采用对照例1中的细胞保存液进行保存，第三组采用对照例2中的细胞保存液进行保存；第四组采用对照例3中的细胞保存液进行保存，控制第一-四组保存液保存温度为25℃；将四组待测样本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞保存液，其特征在于，包括如下组分：0.03‑0.07M Tris缓冲液45‑55％(v/v)、93‑97％乙醇45‑55％(v/v)、钙盐8‑12％(w/w)和镁盐8‑12％(w/w)。

【技术特征摘要】
1.一种细胞保存液，其特征在于，包括如下组分：0.03-0.07MTris缓冲液45-55％(v/v)、93-97％乙醇45-55％(v/v)、钙盐8-12％(w/w)和镁盐8-12％(w/w)。2.根据权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，包括如下组分：0.05MTris缓冲液50％(v/v)、95％乙醇50％(v/v)、钙盐10％(w/w)和镁盐10％(w/w)。3.根据权利要求1或2所述的细胞保存液，其特征在于，所述Tris缓冲液的PH为7.5-8.0。4.根据权利要求1或2所述的细胞保...

【专利技术属性】
技术研发人员：程嘉骧，程骎，
申请(专利权)人：易普森智慧健康科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44