一种天然来源大黄素的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种天然来源大黄素的制备方法，包括将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过筛，取筛下部分为备用药材；将乙醇酸水溶液与备用药材共同置于提取罐内，提取得提取液，回收至无乙醇味，得到无醇提取液；将无醇提取液用石油醚萃取，浓缩萃余液；之后将浓缩萃余液离心，取上层液待用，弃去沉淀；用凝胶LH‑20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降后再加上样层析，洗脱流速为每小时0.2～0.25柱床体积，冲洗1～1.5柱床体积洗脱液后，调整洗脱流速为每小时0.3～0.5柱床体积，收集3～4个柱床体积洗脱液；最后将收集的洗脱液浓缩至干，即得到粗品大黄素。本发明专利技术天然来源大黄素的制备方法，其能有效解决现有大黄素样品提纯度不够、提取工艺复杂以及实验条件要求较高的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种天然来源大黄素的制备方法
本专利技术涉及药物制备
，具体涉及一种天然来源大黄素的制备方法。
技术介绍
大黄素是一种橙黄色长针状结晶，是中药大黄的重要活性成分之一，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡、抗炎、抗纤维化、抗肿瘤、防治心脑血管疾病、收缩平滑肌、降压、减少脂肪堆积等作用，广泛应用于临床、药物及保健品等研究开发中。但是目前大黄素的制备存在以下几方面的问题：首先，现有大黄素天然来源主要是大黄和虎杖两种药典收录药材，而大黄中除了大黄素以外还有大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚和芦荟大黄素，并且这些成分在药材中主要是以苷的形式存在，导致从中提取的大黄素样品纯度不够；其次，现有大黄素提取方法步骤多、工艺复杂、回收率低；另外，现在大黄素提取方法实验条件要求较高。因此，亟需设计一种新的技术方案，以综合解决现有技术中存在的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种天然来源大黄素的制备方法，其能有效解决
技术介绍
中存在的大黄素样品提纯度不够、提取工艺复杂以及实验条件要求较高的问题。为解决上述技术问题，本专利技术采用了以下技术方案：一种天然来源大黄素的制备方法，包括以下步骤：S1.药材处理，将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过60～80目筛，取筛下部分为备用药材；S2.提取，将乙醇酸水溶液按料液比1:10～15与备用药材共同置于提取罐内，提取3～4次，每次1～1.5小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至酒精度数低于5度，得到无醇提取液；S3.萃取，将步骤S2中的无醇提取液用石油醚于60～90℃萃取4～6次，萃余液置于45～50℃下浓缩至原体积的0.2～0.3，得到浓缩萃余液；S4.离心，将步骤S3中的浓缩萃余液在3500～4500rpm离心15～25min，取上层液待用，弃去沉淀；S5.柱层析，取200～300目的羟丙基葡聚糖凝胶LH-20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降12h以上再加上层液层析，其中上样体积：柱床体积为1:30～40，洗脱流速为每小时0.2～0.25柱床体积，冲洗1～1.5柱床体积洗脱液后，调整洗脱流速为每小时0.3～0.5柱床体积，收集3～4个柱床体积洗脱液；S6.干燥，将步骤S5收集的洗脱液置于45～50℃下浓缩至干，即得到粗品大黄素。步骤S2中的乙醇酸水溶液为乙醇与pH3.5～4.5酸水的混合溶液，其中乙醇与酸水的体积比为90:10；且酸水为盐酸溶液、硫酸溶液、三氟乙酸溶液三种中的一种。步骤S3中石油醚与无醇提取液的体积比为1:1～1.5。上述技术方案中提供的天然来源大黄素的制备方法，采用原料来源丰富且易得的野菠菜根进行大黄素的提取，能有效降低生产成本；利用乙醇酸水溶液作为提取溶剂，其中酸水的使用可以有效提高提取液中大黄素的含量；并且采用其提取工艺步骤少、耗时较短，能够实现大黄素的快速富集；采用上述方法提取的大黄素使用高效液相色谱法进行纯度检测超过90％。附图说明图1为大黄素标准品HPLC图；图2为90％乙醇酸水提取液HPLC图；图3为石油醚萃取液HPLC图；图4为萃余液HPLC图；图5为1.0倍柱体积洗脱液HPLC图；图6为1.3倍柱体积洗脱液HPLC图；图7为粗品大黄素HPLC图；图8为90％乙醇提取液HPLC图。具体实施方式为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行具体说明。应当理解，以下文字仅仅用以描述本专利技术的一种或几种具体的实施方式，并不对本专利技术具体请求的保护范围进行严格限定。实施例1一种天然来源大黄素的制备方法，包括以下步骤：将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过70目筛，取筛下部分为备用药材；将乙醇酸水溶液(乙醇与pH3.5～4.5三氟乙酸溶液的体积比为90:10)按料液比1:12与备用药材共同置于提取罐内，提取3次，每次1.5小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至无乙醇味，得到无醇提取液；将无醇提取液用石油醚(石油醚与无醇提取液的体积比为1:1)于75℃下萃取5次，萃余液置于45～50℃下浓缩至原体积的0.25，得到浓缩萃余液；之后将浓缩萃余液在4000rpm离心20min，取上层液待用，弃去沉淀；取200～300目的凝胶LH-20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降12h再加上层液层析，其中上样体积：柱床体积为1:35，洗脱流速为每小时0.2柱床体积，冲洗1柱床体积洗脱液后，调整洗脱流速为每小时0.4柱床体积，收集4个柱床体积洗脱液；最后将收集的洗脱液置于45～50℃下浓缩至干，即得到粗品大黄素。其中，对上述90％乙醇酸水提取液、石油醚萃取液、萃余液、1柱床体积洗脱液分别进行HPLC分析，得到如图2～5所示的HPLC图，并对得到的粗品大黄素进行HPLC分析，得到如图7所示的HPLC图。实施例2一种天然来源大黄素的制备方法，包括以下步骤：将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过70目筛，取筛下部分为备用药材；将乙醇酸水溶液(乙醇与pH3.5～4.5三氟乙酸溶液的体积比为90:10)按料液比1:12与备用药材共同置于提取罐内，提取3次，每次1.5小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至无乙醇味，得到无醇提取液；将无醇提取液用石油醚(石油醚与无醇提取液的体积比为1:1)于75℃下萃取5次，萃余液置于45～50℃下浓缩至原体积的0.25，得到浓缩萃余液；之后将浓缩萃余液在4000rpm离心20min，取上层液待用，弃去沉淀；取200～300目的凝胶LH-20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降12h再加上层液层析，其中上样体积：柱床体积为1:35，洗脱流速为每小时0.2柱床体积，冲洗1.3柱床体积洗脱液后，调整洗脱流速为每小时0.4柱床体积，收集4个柱床体积洗脱液；最后将收集的洗脱液置于45～50℃下浓缩至干，即得到粗品大黄素。其中图6为1.3倍柱体积洗脱液的HPLC图，与实施例1中的图5相比，随着洗脱进行，洗脱液中杂质含量降低，大黄素含量明显提高。实施例3一种天然来源大黄素的制备方法，包括以下步骤：将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过60目筛，取筛下部分为备用药材；将乙醇酸水溶液(乙醇与pH3.5～4.5盐酸溶液的体积比为90:10)按料液比1:10与备用药材共同置于提取罐内，提取4次，每次1小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至酒精计显示低于5度，得到无醇提取液；将无醇提取液用石油醚(石油醚与无醇提取液的体积比为1:1.5)于60℃下萃取6次，萃余液置于45～50℃下浓缩至原体积的0.3，得到浓缩萃余液；之后将浓缩萃余液在4500rpm离心15min，取上层液待用，弃去沉淀；取200～300目的凝胶LH-20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降13h再加上层液层析，其中上样体积：柱床体积为1:30，洗脱流速为每小时0.2柱床体积，冲洗1柱床体积洗脱液后，调整洗脱流速为每小时0.3柱床体积，收集3个柱床体积洗脱液；最后将收集的洗脱液置于45～50℃下浓缩至干，即得到粗品大黄素。实施例4一种天然来源大黄素的制备方法，包括以下步骤：将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过80目筛，取筛下部分为备用药材；将乙醇酸水溶液(乙醇与pH3.5～4.5硫酸溶液的体积比为90:10)按料液比1:15与备用药材共同置于提取罐内，提取4次，每次1小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至酒精计显示低于5度，得到无醇提取液；将无醇提取液用石油本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种天然来源大黄素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.药材处理，将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过60～80目筛，取筛下部分为备用药材；S2.提取，将乙醇酸水溶液按料液比1:10～15与备用药材共同置于提取罐内，提取3～4次，每次1～1.5小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至酒精度数低于5度，得到无醇提取液；S3.萃取，将步骤S2中的无醇提取液用石油醚于60～90℃萃取4～6次，萃余液置于45～50℃下浓缩至原体积的0.2～0.3，得到浓缩萃余液；S4.离心，将步骤S3中的浓缩萃余液在3500～4500rpm离心15～25min，取上层液待用，弃去沉淀；S5.柱层析，取200～300目的羟丙基葡聚糖凝胶LH‑20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降12h以上再加上层液层析，其中上样体积：柱床体积为1:30～40，洗脱流速为每小时0.2～0.25柱床体积，冲洗1～1.5柱床体积洗脱液后，调整洗脱流速为每小时0.3～0.5柱床体积，收集3～4个柱床体积洗脱液；S6.干燥，将步骤S5收集的洗脱液置于45～50℃下浓缩至干，即得到粗品大黄素。

【技术特征摘要】
1.一种天然来源大黄素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.药材处理，将野菠菜根洗净晒干后，粉碎过60～80目筛，取筛下部分为备用药材；S2.提取，将乙醇酸水溶液按料液比1:10～15与备用药材共同置于提取罐内，提取3～4次，每次1～1.5小时，合并提取液，置于45～50℃下回收至酒精度数低于5度，得到无醇提取液；S3.萃取，将步骤S2中的无醇提取液用石油醚于60～90℃萃取4～6次，萃余液置于45～50℃下浓缩至原体积的0.2～0.3，得到浓缩萃余液；S4.离心，将步骤S3中的浓缩萃余液在3500～4500rpm离心15～25min，取上层液待用，弃去沉淀；S5.柱层析，取200～300目的羟丙基葡聚糖凝胶LH-20去离子水溶胀过夜后装柱，沉降12h以上再加上层液层析，其中上样体积：柱床体积为1:3...

【专利技术属性】
技术研发人员：许福泉，陈建华，冯媛媛，朱强，阎斌伦，
申请(专利权)人：淮海工学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32